離子色譜法測定蜂蜜中麥芽糖含量

鄧偉恒 吳國輝 王柳玲 吳俊發

蜂蜜富含多種營養物質，風味獨特，有較高的營養價值。我國是蜜生產、消費和出口大國。蜂蜜種類繁多，成分復雜，很容易造假摻假。其中一種蜂蜜的摻假方式，就是以麥芽糖為摻假物加入到蜂蜜中。

目前，檢測蜂蜜中糖的含量主要采用國標GB 5009.8- 2016《食品安全國家標準 食品中果糖、葡萄糖、蔗糖、麥芽糖、乳糖的測定》第一法高效液相色譜法進行檢測，采用示差折光檢測器，外標法進行定量。當利用此法對一個含有多種二糖成分的蜂蜜作麥芽糖檢測時，其麥芽糖色譜峰會與其他二糖色譜峰相連或重疊，對實際麥芽糖含量的檢測準確度造成了影響。另外，也有文獻提出利用高效液相色譜儀連接熒光檢測器對蜂蜜的還原糖作檢測。通過衍生化使還原糖獲得熒光基團從而通過熒光檢測器檢測。該方法的優點是靈敏度高、選擇性高等優點。但是同時也有衍生化等的操作，較為繁瑣，不利于檢驗機構大批量檢測。

近紅外反射光譜是一種快速無損檢測方法，通過儀器對樣品進行檢測，獲得光譜數據，對數據進行一系列的處理計算比對從而判定蜂蜜是否有添加麥芽糖摻假。此方法實驗前需對光譜進行處理，建立穩定可靠的模型，但同時也不能準確定量，不同源的蜂蜜需各自完成定量校正分析。方法并不完善。

此外，蜂蜜的糖類檢測還有氣質聯用法、高效毛細管電泳法、核磁共振法等。但這些方法都有儀器昂貴，操作復雜繁瑣的缺點，同樣不適宜實驗室大批量檢測。

采用離子色譜法對蜂蜜中的糖類進行檢測。解決部分含多種二糖的蜂蜜樣品在使用國標高效液相色譜法檢測麥芽糖時可能出現的麥芽糖峰與其他非目標峰分離度不足的問題，準確測定麥芽糖的含量。該方法簡單快捷，無需衍生，各種糖目標峰分離清晰，靈敏度高，結果穩定。

實驗部分

液相色譜法。

麥芽糖標準峰出現在9.2分鐘處。在樣品圖中，麥芽糖峰附近，都有非目標峰的出現，對麥芽糖的定量造成一定干擾。而示差檢測器基于本身工作原理，無法對目標峰進行定性，所以會對測定麥芽糖的結果帶來一定的影響。

離子色譜法。

（1）儀器與試劑

離子色譜儀（戴安Dionex ICS- 5000）配備脈沖安培檢測器；

Milli- Q去離子水發生器（美國Millipore公司）

麥芽糖標準品來（Dr. E hrenstorfer GmbH）

淋洗液乙酸鈉和氫氧化鈉（戴安）

蜂蜜樣品來自于市場購買。

（2）樣品處理

稱取蜂蜜樣品1g于250mL容量瓶中，加入50mL去離子水，溶解均勻，加水定容。過0.22μm水相濾膜后使用離子色譜儀分析。

（3）離子色譜條件

色譜柱：Carbodac PA1柱（4 mm × 250 mm ）；

柱溫：30 ℃；進樣體積：10 μL；流速：1.2 mL/min；

參考電極：pH/AgCl（AgCl mode）

淋洗液：A為H2O，B為 氫氧化鈉溶液（150mmol/L），C為乙酸鈉（500mmol/L）氫氧化鈉（150mmol/L）混合溶液；

方法學考察

標準曲線。用去離子水配制麥芽糖標準工作溶液。以分析物的峰面積（y）和對應的質量濃度（x，mg/L）進行線性回歸計算，得到線性方程和相關系數（見表2）。線性范圍5.0～ 100 mg/L之間。麥芽糖在線性范圍內，有良好的線性關系（相關系數R大于0.999）。

檢出限與定量限。根據儀器的檢出限（LOD，S/N= 3）及定量限（LOQ，S/ N=10），結合樣品的前處理過程，計算得到麥芽糖的檢出限在 g/100g，定量限為g/100g（見表2），表明方法具有較高的靈敏度。

加標回收率和精密度。為驗證方法的準確度，按本實驗方法對樣品進行了0.5 g/100g、1.0 g/100g和2.0 g/100g三個水平的加標回收實驗（n=6）。實驗結果見表3，麥芽糖的回收率在95.3% ～ 101%，相對標準偏差（RSD，n=6）3.6%，方法顯示了良好的準確性和重現性。（表3）

實際樣品分析。本次選取5個麥芽糖陽性樣品，通過同時用離子色譜法和國標方法（液相色譜法）完成麥芽糖含量的測定，作出比較。（表4）

離子色譜法提供了一個方便快捷的檢測蜂蜜中麥芽糖的方法，解決了液相色譜法可能帶來的測定影響，更能準確測定蜂蜜中麥芽糖的含量，同時也能對蜂蜜主要成分果糖和葡萄糖進行定量檢測，適合商品檢測實驗室用來作為一個輔助方法對部分使用國標檢測方法不能準確檢測麥芽糖含量蜂蜜樣品進行檢驗，得出數據作為參考。