紫外分光光度法測定大米中微量元素硒的含量

何娜

作為人體必需微量元素的一種，硒的氧化性極強，能為細胞提供保護，避免生物膜氧化損傷和體內脂質過氧化反應，也能清除、抑制生物體代謝產生的活性氧。本文以紫外分光光度法測定大米中硒含量，該方法步驟簡單、選擇性好、靈敏度高、干擾少。

材料與方法

材料。泰國香米、富硒大米及龍江縣大米。

儀器與試劑。UVmini1240紫外可見分光光度計；凱氏燒瓶；HY5回旋式振蕩器；pH213型酸度計。

5% EDTA溶液、0.2%鄰苯二胺溶液、1000μg/mL硒標準溶液、10.0μg/mL硒標準儲備液。上述試劑均為分析純，水為去離子水。

方法。（1）樣品處理。依次使用自來水、去離子水洗凈米樣品，隨后以105℃鼓風持續2h干燥，放于粉碎機中磨碎，保存至干燥器，待用；稱取樣品10.0g，浸泡于30.0ml的水中2h，攪拌5～6次，過濾。用少量去離子水將殘渣洗滌后混勻、過濾，合并提取液，轉至50mL容量瓶內定容，待用；稱取樣品1.0g，加入高氯酸4.0mL、硝酸10.0mL，冷消化過夜，并于次日將溶液加熱消化至澄清透明，冷卻待用。

（2）硒含量測定。量取1.0mL硒標準溶液并定容至100mL，得到標準溶液。在5個125mL的分液漏斗中分別加入0.1、0.2、0.3、0.8、1.0mL標準溶液，隨后加入25.0mL水，借助氨水及0.1mol/L的鹽酸溶液將其pH調至2，加入2.0mL的1%鄰苯二胺鹽酸鹽試液，振蕩、靜置，并在10.0mL甲苯加入后再次振蕩，靜置15min，取甲苯層。同時以不含硒標準品的甲苯溶液做空白試驗，在335nm處重復測定吸收度值，取平均值。

結果與討論

實驗條件的確定。鄰苯二胺鹽酸鹽與Se（Ⅳ）可在酸性條件下形成絡合物，而在紫外區該物質擁有335nm的最大吸收峰波長。

工作曲線的繪制。分別量取0.10、0.20、0.50、1.00mL的硒標準溶液（1g/mL），以樣品測定步驟為根據對吸光度（A）進行測定，繪制下圖1所示的標準工作曲線。回歸方程為 Y=0.2975x+0.0020，r=0.9998。硒在0.01～0.1μg/mL的濃度范圍內具有較好的時線性。

大米樣品硒含量。以上述方法為依據測定三類大米內的硒含量，具體如下表1所示。結果顯示，各類大米有著不同的硒含量，其中含量最低的為泰國香米0.033μg/g，最高的為富硒大米0.258μg/g。

精密度。量取5份硒標準溶液（0.5μg/ mL），根據上述方法平行進行5次測定，結果顯示RSD為2.25%，該方法具有較好的精密度。

回收率。在1.000g的富硒大米樣品中分別加入0.50mL、1.00、2.00硒標準溶液（1μg/ mL），采用同等于樣品的條件進行預處理，根據上述方法對每個加標水平平行進行3次測定，結果如下表2所示，該方法加標回收率在98.5%～103.1%，平均回收率為101.4%。

以紫外分光光度法對幾類大米硒含量進行測定，得到較為滿意的結果。結果顯示，富硒大米相對于其他大米而言，微量硒元素含量明顯更高。幾類大米硒含量在0.033～0.258之間，該方法操作簡單，具有較高的靈敏度、實用性，操作費用低、干擾少。