薄層色譜法測定調味品中苯甲酸的研究

詹永能

薄層色譜法（簡稱：TLC）是一種快速、簡便的色譜分析方法。薄層色譜過程是混合終點將首先在薄的均勻的固定相涂層分離，然后端板浸入流動相，在濕片樣品的流動相的過程中，隨著流動相進行了不同成分的流動相不同的速度，在板的不同位置，向前移動，最終保留下來，從而達到使用不同成分的適當分離目的的方法進行檢測，可以是定性的或定量的樣本分析。由于它具有成本低、速度快、可在同一薄膜中測量多個樣品的優點，因此本文采用聚酰胺聚酰胺膜代替國標法有效地測定了苯甲酸中的含量，具體如下：

試驗部分

儀器與試劑

儀器：層析展缸（23cm ×23cm ×10 cm），聚酰胺薄膜（12 cm ×22 cm）

展開劑：異丙醇+氨水+無水乙醇（8+1+1）

氯化鈉溶液： 30 g /L，加 HCl 10～15 滴。

氫氧化鈉，無水硫酸鈉，無水乙醚均為分析級

試劑配制根據國標方法。

試驗方法

1.樣品（標準樣品）的預處理。（1）樣品（如豆瓣醬）： 樣品磨細后，稱取10 g左右， 加入0. 1mol/ L氫氧化鈉溶液稀釋至15倍， 放置過夜， 過濾 ，吸取濾液25mL ，稀鹽酸調節至溶液為中性。（2）含油脂試樣（如方便面醬包）：稱取樣品10g，加0.08mol/L氫氧化鈉溶液至100g，40℃水浴，并不時攪拌浸泡2h以上，取出，用乙醚多次萃取油脂，棄去乙醚層，再經40℃水浴揮去殘留的乙醚，過濾，取濾液適量，用鹽酸調pH至中性。

2.樣品提取及純化。經上述處理后的樣液中加鹽酸酸化至約1mol/L，用適量乙醚分3～4次萃取，每次劇烈振搖1min，合并萃取后的乙醚液，用40g/L氯化鈉溶液洗滌兩次，靜置15min，醚層經無水硫酸鈉過濾至容量瓶，定容，吸取適量乙醚提取液，在40℃水浴上小心揮干乙醚，殘渣用適量無水乙醇溶解。

3.定性檢出。取苯甲酸標準溶液、樣品溶液和標準溶液分別2μl，點在2cm的基線在影片的下端。每一個點的時間間隔為1.5～2.0cm處在槽的內壁貼有流動相過濾，擴展槽為50 ～ 100ml膨脹劑，將擴展槽的傾斜位置，對好點位置，加蓋，放置10min，從溶劑到達10cm左右，取出。在空氣中搖擺或吹去剩下的展開劑。細水霧均勻地灑在薄膜表面，斑點呈黃色，背景為藍色。將樣品與標準樣品進行比較。比較了待測樣品中苯甲酸和苯甲酸標準溶液的斑點。

4.定量。測量樣品和標準樣品以1.2.3相同，根據粗略的定量結果，選擇合適的加標量，加入標準樣品的標準，根據1.2.3的方法，操作，在標準亮度相同的樣品和標準樣品點的比較，根據標準樣品和計算量的含量，樣品中苯甲酸含量的測定。

結果與討論

酸化程度影響。酸化程度不夠，苯甲酸轉化為苯甲酸，測定值較低。如果酸化過多，會引起干擾。研究表明，酸化程度控制在1mol/ L。

樣品中的干擾及排除。樣品中組分常會對苯甲酸的展開產生干擾，使樣品中苯甲酸和山梨酸的Rf值與標準溶液中的Rf值不一致。為此，常采用樣品中加入標準溶液，如未加標的樣品斑點與加標后的樣品斑點Rf值一致，則為陽性。

方法的回收率試驗。在10 g 辣椒醬樣品中加入 200 mg /L苯甲酸標準溶液，經高效液相色譜測定 ，進行回收率測定。結果見表 1

方法檢出限及準確性。聚酰胺薄膜在定量精度、檢測靈敏度和分離度方面優于聚酰胺粉片。在聚酰胺膜，苯甲酸的檢測限為0.8mg/ L。該方法對苯甲酸的定量分析是非常直觀的。每次4～8人得出一致結論。與苯甲酸標準溶液相比，測定結果比較困難，標準樣品加標法是有效的。當標準樣品中苯甲酸含量高于待測樣品時，樣品中加入標準，可計算出相同的標準。酸的含量。該方法的樣品提取和測定過程簡單，測定結果直觀，可比性強，測定誤差較大。