血標本冷藏放置和放置時間對血凝結果的影響

（1庫爾勒市第二人民醫院檢驗科 新疆 巴州庫爾勒 841000）

（2庫爾勒市第二人民醫院重癥醫學科 新疆 巴州庫爾勒 841000）

隨著人們對于醫療水平的要求越來越高，廣大基層患者常常需要進行臨床血凝檢查以明確診斷和觀察療效，而每一個社區診所和家庭醫生都配備一套化驗設備是不現實的，不僅購置設備花費高昂，而且維護設備需投入大量的資金和人力。這里存在一個問題：以冷藏保存的方式、花費若干小時轉送標本回檢驗科，然后進行化驗得出結果是否可靠、可行？血標本冷藏放置和放置時間對血凝結果是否存在影響？目前尚無定論，為此，我們設計并實施了本次試驗。

表 血凝配對t檢驗結果

1.資料與方法

1.1 一般資料

自2017年4月至6月，隨機抽取庫爾勒市第二人民醫院住院的輕癥患者、門診患者，共計120例，試驗對象均為成人，不包括兒童，不包括重癥或病危患者，以避免其內環境嚴重異常而影響化驗結果。此次試驗已通過醫院倫理委員會準許，所有參加試驗的人員均已被告知，并簽署知情同意書，試驗費用由醫院和試驗研究人員自行承擔。

1.2 試驗設備：

全自動血凝化驗儀（SYSMEX CS-2000i型），醫用冷藏設備（4℃恒溫冰箱），醫用離心機。

1.3 試驗方法：

通過查閱操作規程[1-2]并結合臨床實踐，得出對標本處理的“臨床標準”（此為對照組，A組）：室溫下采血15～20min后先行離心出血清，其離心參數為：轉速：3800r/min，時間：10min，離心完畢后立即送檢，最長不超過1h，得出結果A；本次試驗中標本放置標準（4℃、4h，此為試驗組，B組）：室溫下采血15～20min后先離心出血清，參數同前，離心后繼續4℃保存，據采血時間4h時開始化驗，得出結果B。

1.4 統計方法

使用SPSS22統計軟件，將對照組（A組）、試驗組（B組）所得數據以配對t檢驗的方法進行統計學比較，得出統計學結果，并結合臨床得出結論。

2.結果

如表所示：對照組（A組）和試驗組（B組）統計學對比，部分活化凝血酶時間（APTT）無統計學差異（P＞0.05）；凝血酶原時間（PT）、國際標準化比值（PT-INR）均存在統計學差異（P＜0.05）；所有對應項目差值的95%可信區間均在臨床參考值升高或降低10%以內，故均視其對臨床結論判讀無影響，兩組的臨床結論無差別。

備注：在臨床過程中，在判讀某個化驗結果的臨床結論時，一般認為其較臨床參考值升高或降低20%以上才具有臨床意義，此次試驗中，以其臨床參考值下限為基準，項目數據差值升高或降低至少10%以上，則視其較參考值存在變化，具有臨床意義，對臨床判讀產生影響。以A、B兩組凝血酶原時間（PT）統計對比舉例，其P值小于0.05，提示A、B兩組凝血酶原時間（PT）化驗結果有統計學上顯著性差異，其差值的95%可信區間為-0.33～-0.07，即：A-B≈（-0.33～-0.07），臨床上凝血酶原時間的參考值范圍為11～14.3，大于或小于參考值范圍均有臨床意義，其“影響臨床結論判讀的最小變化范圍”為：11*10%=1.1（參考值下限*10%），大于其差值的95%可信區間上、下限的絕對值，故此差值對于化驗數據的臨床結論判讀無影響，A、B兩組中凝血酶原時間結果在臨床結論中無差別。

3.討論

查閱相關文獻可以看到類似的試驗報道。例如張敏[4]通過試驗發現，血凝標本在4℃條件下保存24h后，血凝指標無明顯變化（P＞0.05），與本試驗結果基本相同；而-20℃保存24h后，APTT明顯延長（P＜0.05）；在室溫下，放置4h、8h后，各指標無明顯變化（P＞0.05）；說明不同溫度下放置會對血凝結果產生一定的影響。劉桂華[5]研究發現，PT、APTT在20℃保存2h，所測結果與即時測定結果無顯著性差異，但4h后隨著時間的推移，PT呈縮短趨勢，APTT呈延長趨勢，均存在統計學差異。姚家勇等[6]研究發現，標本室溫放置4h，PT略縮短（P＜0.01），APTT無差異（0.10＞P＞0.05），與本試驗結果一致；放置8h，PT延長、APTT均明顯延長（P＜0.01），也提示長時間放置會對血凝結果造成影響。

黎建安等[7]試驗發現，血標本采集后以加用抗凝血劑的形式室溫放置2h，再離心分離血漿后即刻進行凝血指標檢測，各項血凝指標均明顯異常，可見血樣及早離心（采血后20min內）對保證血凝結果的準確是必要的，延遲離心、使用抗凝藥物均會導致血凝結果異常，本試驗中采用及時離心（采血后15～20min）的方法，并且不添加任何抗凝藥物，從而保證血凝結果的準確性。還有文獻[8]認為血漿標本32℃保存6h Ⅷ因子活性消失50%、Ⅴ因子活性消失25%，4℃保存6h Ⅷ因子活性消失5%，在室溫中貯存過久，第Ⅴ因子會破壞，在4℃貯存過久,會導致Ⅶ因子活化，等等，提示許多凝血因子均會隨著時間的推移而破壞，故盡早化驗血凝為宜。

4.結語

綜上所述，并結合本試驗結果和相關文獻結果[9]，可見：不同溫度、儲存時間均可能對血凝結果產生影響，采取“4℃、4h”冷藏保存血樣的方法可以保證血凝結果的準確、可靠，可以保證臨床結論的一致。

[1]葉應嫵，王毓三，申子瑜.全國臨床檢驗操作規程（第3版）[M].南京：東南大學出版社，2006：45-46.

[2]魏國安，石玉玲.血液標本放置時間對血液化驗結果的影響[J].實用心腦血管病雜志，2010，18（8）：1151.

[3]葉應嫵，王毓三，申子瑜.全國臨床檢驗操作規程（第3版）[M].南京：東南大學出版社，2006：1017-1031.

[4]張敏.標本放置溫度、時間對凝血檢驗結果的影響[J].醫藥前沿，2015，5（10）：221-222.

[5]劉桂華.抽血時間對PT、APTT測定結果的影響[J].中國社區醫師，2011，13（18）：195.

[6]姚家勇，劉培明.凝血檢驗標本放置時間對結果的影響[J].臨床醫學，2003，23（12）：59-60.

[7]黎建安，劉紫菱，林珠.存放時間和溫度對凝血功能指標檢測結果的影響[J].檢驗醫學與臨床，2012，9（1）：5-7.

[8]叢玉隆.關于衛生部出凝血時間操作規程《通知》的理解[J].中華檢驗醫學雜志，2001，24（3）：183-185.

[9]趙欣宇，宋鑒清，張麗霞.標本放置時間對凝血酶原時間和活化的部分凝血活酶時間檢測結果的影響[J].中國醫科大學學報，2012，41（7）：656-658.