EB病毒感染陽性鼻咽癌與調節性T細胞的相關性分析

鐘啟龍 傅國武 梁小明

[摘要]目的 分析EB病毒感染陽性鼻咽癌與調節性T細胞的相關性，探討其對疾病臨床診療和預后判斷的參考價值。方法 選取我院2015年4月～2017年2月收治的35例EB病毒感染陽性鼻咽癌患者和同期于我院接受體檢的40名健康體檢者作為研究對象，分別作為觀察組和對照組，抽取兩組受檢者的空腹靜脈血，對于調節性T細胞水平進行檢測，比較兩組患者檢測結果上的差異，觀察治療前后的調節性T細胞水平檢測結果的變化。結果 觀察組患者的調節性T細胞CD4+CD25+Foxp3+Treg水平和CD4+CD25+Foxp3+Treg/CD4+T水平高于對照組，差異有統計學意義（P<0.05）。治療后觀察組患者調節性T細胞CD4+CD25+Foxp3+Treg水平和CD4+CD25+Foxp3+Treg/CD4+T水平均低于治療前，差異有統計學意義（P<0.05）。結論 EB病毒感染陽性鼻咽癌的發生、發展，會引起患者調節性T細胞水平的變化。通過對調節性T細胞水平的檢測，能夠在一定程度上反映出患者的病情和治療恢復情況，對疾病臨床診療和預后判斷有著重要的參考價值。

[關鍵詞]EB病毒感染陽性鼻咽癌；調節性T細胞；相關性

[中圖分類號] R739.63 [文獻標識碼] A [文章編號] 1674-4721（2018）4（b）-0078-03

Correlation analysis of nasopharyngeal carcinoma in Epstein-Barr virus positivity and regulatory T cells

ZHONG Qi-long FU Guo-wu LIANG Xiao-ming

Department of Otolaryngology，People′s Hospital of Maoming City，Guangdong Province，Maoming 525000，China

[Abstract]Objective To analyze the correlation between nasopharyngeal carcinoma in Epstein-Barr（EB） virus positivity and regulatory T cells and to explore its reference value for the clinical diagnosis and prognosis of the disease.Methods 35 patients with EB virus positivity of nasopharyngeal carcinoma admitted in our hospital from April 2015 to February 2017 and 40 healthy participants during the same period undergoing physical examinations in our hospital were selected as research objects.They were divided into observation group and control group respectively.Fasting venous blood was collected from the two groups to detect the level of regulatory T cells.The difference between the detection results of nasopharyngeal carcinoma patients with EB virus positivity and healthy participants was compared，and the change of regulatory T cell levels before and after treatment were observed.Results The levels of CD4+CD25+Foxp3+Treg and CD4+CD25+Foxp3+Treg/CD4+ T of regulatory T cells in the observation group were significantly higher than those in the control group with significant differences between the two groups（P<0.05）.After treatment，the levels of CD4+CD25+Foxp3+Treg and CD4+CD25+Foxp3+Treg/CD4+ of regulatory T cells in the observation group were lower than that in the before treatment，with statistical differences （P<0.05）.Conclusion The occurrence and development of nasopharyngeal carcinoma in EB virus positivity may cause the change of regulatory T cell levels in patients.By detecting the level of regulatory T cells，it to a certain extent can reflect the patient′s condition and the recovery after treatment，which has an important reference value for the clinical diagnosis and prognosis of the disease.

[Key words]Nasopharyngeal carcinoma in epstein-barr virus positivity；Regulatory T cells；Correlation

鼻咽癌是一種高發的惡性腫瘤疾病，其病因復雜，以EB病毒感染較為常見[1]。EB病毒感染陽性鼻咽癌的發生，主要是由于EB病毒感染B細胞所致，進而引起細胞毒性T淋巴細胞的過度免疫[2]。早期癥狀不明顯，尤其是鼻部癥狀少，往往僅表現為后吸性涕中帶血，或反復一側耳閉塞感，或頸上部無痛性淋巴結腫大，但是難以進行病情判斷，容易受到忽視[3]。隨著病情的進展，EB病毒感染陽性鼻咽癌的危害程度明顯提升，患者的視力、顱神經功能均會受到影響，還會侵犯骨、肺、肝等組織器官，危及患者的生命健康[4]。EB病毒感染陽性鼻咽癌的發生與進展，往往會調節性T細胞水平的改變，可將其作為疾病臨床診斷和預后判斷的參考依據[5]。本研究選取我院收治的EB病毒感染陽性鼻咽癌患者作為研究對象，分析該疾病與調節性T細胞的相關性，現報道如下。

1資料與方法

1.1 一般資料

本組研究對象為我院2015年4月～2017年2月收治的35例EB病毒感染陽性鼻咽癌患者，將其作為觀察組。納入標準：經EB病毒血清學檢測、影像學檢查以及組織病理學予以確診，符合鼻咽癌診斷標準；排除標準：其他鼻咽部疾病以及存在精神障礙患者。選取同期于我院接受體檢的40名健康體檢者作為對照組。本研究經我院醫學倫理委員會批準，參與研究者簽署知情同意書。觀察組男22例，女13例；年齡22～69歲，平均（44.2±4.8）歲。對照組男24例，女16例；年齡25～72歲，平均（45.3±4.6）歲。兩組受檢者的一般資料比較，差異無統計學意義（P>0.05），具有可比性。

1.2方法

清晨抽取兩組受檢者的空腹靜脈血2 ml，經EDTA-Na2抗凝處理后，用Navios 6 COLORS流式細胞儀（貝克曼庫爾特商貿有限公司）和配套的試劑盒，對CD4+CD25+Foxp3+Treg進行測定。該過程中，在1 ml紅細胞裂解液中加入抗凝血100 μl，均勻混合后，需要能進行孵育（室溫）、洗滌（PBS）。然后將其與FITC-CD4、APC-CD25混合，在室溫、避光條件下發生反應。使用流式細胞儀測定管、氬離子激光器等設備，并對相關參數進行校正和調節，收集1×105個細胞，并結合CD4+CD25+、CD4Foxp3+以及CD4+T細胞中CD4+CD25+Foxp3+所占比例等數據，進而分析調節性T細胞的改變。EB病毒感染陽性鼻咽癌患者經確診后，主要實施放射治療，并輔以化療。治療后，再次抽取其空腹靜脈血進行監測，觀察治療前后的調節性T細胞的變化。

1.3觀察指標

觀察兩組患者外周血調節性T細胞水平的檢測結果，對比其CD4+CD25+Foxp3+Treg、CD4+CD25+Foxp3+Treg/CD4+T的大小。同時觀察觀察組治療前后外周血調節性T細胞水平變化。

1.4統計學方法

以SPSS 19.0統計學軟件進行數據的處理和分析，計量資料以均數±標準差（x±s）表示，采用t檢驗；計數資料以率表示，采用χ2檢驗，以P<0.05為差異有統計學意義。

2結果

2.1兩組患者外周血調節性T細胞水平的比較

觀察組患者調節性T細胞CD4+CD25+Foxp3+Treg水平和CD4+CD25+Foxp3+Treg/CD4+T水平高于對照組，差異有統計學意義（P<0.05）（表1）。

表1 兩組患者外周血調節性T細胞水平的比較（x±s）

2.2 患者治療前后調節性T細胞水平的比較

治療后，EB病毒感染陽性鼻咽癌患者調節性T細胞CD4+CD25+Foxp3+Treg水平和CD4+CD25+Foxp3+Treg/CD4+T水平均低于治療前，差異有統計學意義（P<0.05）（表2）。

表2 患者治療前后調節性T細胞水平的比較（x±s）

3討論

鼻咽癌的發病率為耳鼻咽喉惡性腫瘤之首，尤其居住在我國嶺南地區的黃種人群中，起病變位于鼻咽后頂部和側壁，與遺傳因素和環境因素存在密切的聯系，而EB病毒感染對該病的影響更為突出、顯著[6]。經免疫學和生物學研究[7]顯示，EB病毒在鼻咽癌的發生、發展中起重要作用，EB病毒感染陽性鼻咽癌是一種常見的疾病類型。EB病毒感染陽性鼻咽癌早期無明顯癥狀，或表現為后吸性涕中帶血，或反復一側耳閉塞感，或頸上部無痛性淋巴結腫大，往往不受重視，并會產生誤判，未能及時實施治療[8]。隨著病情的進展，病變直接侵及破裂孔及其周圍骨質向顱內侵犯，引起相關神經的損害及顱腦等癥狀，同時還會侵犯其他組織器官，癌細胞發生轉移和擴散，增加疾病風險程度和治療難度[9]。根據EB病毒感染陽性鼻咽癌的發生，對于患者機體免疫功能造成了一定的破壞，相關的免疫功能指標會出現異常變化，尤其是調節性T細胞，從中反映出患者的病情，能夠為疾病的早期診斷提供參考[10]。患者經放療、化療等治療后，患者的病情得到有效控制，機體免疫功能得以恢復，CD4+CD25+、CD4Foxp3+等調節性T細胞水平也會相應的發生變化，出現異常表達的情況[11-12]。

本研究結果顯示，觀察組患者的調節性T細胞CD4+CD25+Foxp3+Treg水平和CD4+CD25+Foxp3+Treg/CD4+T水平高于對照組，差異有統計學意義（P<0.05）。治療后觀察組患者的調節性T細胞CD4+CD25+Foxp3+Treg水平和CD4+CD25+Foxp3+Treg/CD4+T水平均低于治療前，差異均有統計學意義（P<0.05）。治療后，其調節性T細胞水平得以降低，逐漸恢復為正常的表達，對腫瘤有免疫抑制作用，能反映出患者的病得到好轉。EB病毒感染陽性鼻咽癌與調節性T細胞水平存在相關性，其對疾病的臨床治療提供了新的思路[13-14]。除了傳統的放療、化療、手術外，免疫療法成為了新的治療選擇。采取生物細胞治療方法，用以糾正機體內環境失衡，而提高免疫功能，加強對腫瘤的有效抑制，防止其進一步轉移與擴散[15]。

綜上所述，EB病毒感染陽性鼻咽癌的發生、發展與調節性T細胞水平改變存在相關性，影響著患者的機體免疫功能。在臨床疾病的診斷中，調節性T細胞水平的變化，能夠真實、準確的反映出患者的病情。在患者的治療恢復期間，同樣可以參考調節性T細胞水平進行判斷。由于本組研究樣本較少，其研究結論不能完全保障其準確性，仍需要深入進行探索和研究。

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（收稿日期：2018-01-02 本文編輯：崔建中）