潰瘍性結腸炎患者血清自身抗體檢測的價值分析

彭強

重慶市銅梁區中醫院檢驗科，重慶 402560

潰瘍性結腸炎為慢性疾病，通常表現為粘液膿血便、腹痛、腹瀉，屬于一種非特異性炎性疾病，有可能出現肝膽、皮膚、骨關節損害等多種腸外癥狀，是累及結腸或直腸黏膜下層的一種自身免疫反應性腸道疾病，屬于一種炎癥性腸病。由于該病情具有較高的反復性，遷延不愈，而且病程長，極易造成此疾病的進一步發展，產生大量并發癥，治療具有一定難度，且遠期預后不良等，導致患者機體健康、生活質量受到嚴重影響。腸黏膜免疫系統對于UC發病具有重要作用[1]，因此對血清免疫特異性抗體進行檢測重要較高臨床價值[2]。該文方便選取2015年2月—2016年6月收治的68例潰瘍性結腸炎患者，探討p-ANCA、GAB、ASCA、PAB的檢測價值，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

方便選取收治的68例潰瘍性結腸炎患者，設定為觀察組，其中男35例，女33例；年齡15～63歲，平均年齡為（38.62±6.92）歲。患者均符合第七次全國消化病學術會議上制定的炎癥性腸病診斷標準，均經全結腸鏡、病理組織學檢查，未合并其他胃腸道疾病、細菌病毒感染等。并選取同時期腸易激綜合征患者68例，設定為對照組，經均結腸鏡檢查表明為腸易激綜合征(IBS)，無自身免疫疾病、遺傳性疾病家族史及腹瀉癥狀，其中男36例，女 32 例；年齡 16～60 歲，平均年齡為（39.02±7.18）歲。兩組基礎資料對比差異無統計學意義（P＞0.05），可臨床比較。患者均同意，且經倫理委員會批準。

1.2 方法

患者早晨空腹時采集靜脈血液2 mL，經離心處理后分離血清，放置到-20℃環境下待用。采用間接免疫熒光儀實施間接免疫熒光法檢測 pANCA、PAB、ASCA、GAB水平，應用自身抗體檢測試劑盒進行檢測，且嚴格按照試劑盒說明書完成操作步驟，置于每個平板反應區加樣經PBS緩沖液使之稀釋為25 μL血清，以生物薄片進行覆蓋，維持30 min后取出通過室溫進行孵育的生物薄片，且立即將其浸泡導致PBS內，持續5 min。再加樣到另一個反應平板反應區的抗人球蛋白，通過熒光標記20 μL，自PBS內取出生物薄片，覆蓋到反應平板，持續5 min，生物薄片經PBS沖洗后浸泡到PBS內且封片，通過熒光顯微鏡進行觀察，以自動由儀器進行數據讀取。

1.3 統計方法

數據均通過SPSS 20.0統計學軟件進行處理分析，計數資料通過χ2進行檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組血清自身抗體檢測陽性率比較

觀察組血清p-ANCA、GAB檢測陽性率均高于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05）；兩組血清 ASCA、PAB檢測陽性率對比差異無統計學意義（P＞0.05）。觀察組 p-ANCA、GAB、ASCA、PAB聯合檢測陽性率明顯高于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表1。

表1 兩組血清自身抗體檢測陽性率比較[n（%）]

2.2 兩組血清自身抗體聯合檢測陽性率比較

因p-ANCA檢測陽性率最高，則將其與其他3種分別聯合檢測，陽性率均提高，且p-ANCA/GAB聯合檢測對比單項檢測的陽性率提高較為顯著，與四項聯合檢測結果對比差異無統計學意義（P＞0.05）。兩組聯合檢測結果對比差異有統計學意義（P＜0.05）。見表2。

表2 兩組血清自身抗體聯合檢測陽性率比較[n（%）]

3 討論

目前，潰瘍性結腸炎發病機制與發病原因并無明確闡釋，大多認為，環境、遺傳、免疫等因素均與潰瘍性結腸炎發生具有顯著相關性，此類因素對腸黏膜形成一定作用，從而使之出現較高的免疫反應，由此引發炎癥性病變，使得腸道黏膜受到損傷，而免疫因素對于潰瘍性結腸炎發生、發展具有顯著作用。潰瘍性結腸炎患者往往承受較大的身心壓力，而且此疾病病變程度不同，發作與緩解通常會交替出現，發病具有較高的反復性，在早期診斷方面具有一定難度，若不及時治療往往導致潰瘍性結腸炎難以治療或出現重癥潰瘍性結腸炎，由于疾病易復發，存在較高癌變風險，造成較高死亡率，使得結直腸癌風險明顯提高。臨床中對于潰瘍性結腸炎的診斷并無較為標準的理想指標，通常對患者實施內鏡、病理學檢查、放射學檢查等[3]，且有的方法比較復雜性，患者耐受性受到一定限制，導致早期診斷潰瘍性結腸炎存在一定難度，使得患者難以及早得到明確的診斷結果，影響臨床治療，所以尋求更為簡單、有效的臨床診斷方法具有重要價值[4]。實驗室診斷指標在潰瘍性結腸炎的診斷使用中越來越受到關注，尤其p-ANCA、GAB、ASCA、PAB在自身抗體中比較具有代表性，該文重要對上述抗體進行研究。

ANCA可使得細胞胞漿成分成為自身靶抗原，靶抗原供源細胞通常為中性粒細胞、單核細胞。ANCA可分成胞漿型（C-ANCA）、核周染色型（p-ANCA）。上述兩類抗體即可針對把抗原存在不同，而潰瘍性結腸炎患者中的ANCA類型通常我為p-ANCA。p-ANCA的靶抗原處在細胞核周圍，一般是腸系膜、腸黏膜固有層內淋巴結的淋巴細胞形成，往往呈現出不連續性的核周分布狀態。經檢測可知，p-ANCA在大部分潰瘍性結腸炎患者中呈現出陽性表達。經該文研究可知，p-ANCA在觀察組的陽性率為58.82%，在對照組的陽性率為1.47%，觀察組陽性率明顯高于對照組。有研究[5]得到UC患者ANCA陽性率為68.3%，健康者為1.7%。ANCA對于潰瘍性結腸炎具有較高的特異性，達到92.7%，靈敏度為65.9%。國外有報道稱，ANCA敏感性為42%，特異性為97%。有些研究結果具有一定差異[6]，極有可能和研究對象病情程度具有一定關系，而且實驗室方法、人種、地區等均可能對結果造成一定影響。經組織病理學研究表明，隱窩內存在的大量杯狀細胞可作為潰瘍性結腸炎的組織學診斷標志，小腸杯狀細胞所呈現的宏觀、微觀分布對于病灶分布具有決定性作用，GAB屬于診斷潰瘍性結腸炎的一個特異性指標，但目前在我國并無較多的研究報道。經該文研究可知，GAB在觀察組的陽性率為32.35%，對照組為8.82%，差異有統計學意義（P＜0.05）。ASCA為真菌菌屬的一種抗體，可有效反映腸道特殊抗原的免疫耐受性喪失情況，也認為其可對無法識別的病原體形成免疫反應[7]。在該文研究中，觀察組ASCA陽性率為10.29%，對照組為4.41%，兩組差異無統計學意義（P＞0.05）。國外一些資料認為，ASCA對于診斷炎性腸道疾病具有較高價值[8]，但在我國并無明顯價值[9]，對其差異原因進行分析，有可能是：種族遺傳具有一定差異性，因歐美與亞洲人群具有不同遺傳背景[10]，由此導致血清自身抗體具有明顯差異；因實驗室、實驗技術手段具體一定差別[11]；對ASCA檢測時所使用的試劑盒說明書中的cut-off值(1∶1 000)源自歐洲人群參考值，在中國群體中是否適用需要進行研究[12]。PAB對于潰瘍性結腸炎、克羅恩病的臨床診斷及鑒別存在一定價值，但在該文研究中，觀察組陽性率為4.41%，對照組為0.00%，兩組差異無統計學意義。由此可知，PAB對于潰瘍性結腸炎并不敏感。P-ANCA與GAB聯合檢測潰瘍性結腸炎具有較高的陽性率，可有效提高UC的臨床診斷，ASCA、PAB對于潰瘍性結腸炎患者并無較高表達，因此p-ANCA分別與ASCA、PAB進行聯合檢測，其對UC的陽性率并無顯著提高[13]。

綜上所述，在對潰瘍性結腸炎患者進行血清自身抗體檢測時，P-ANCA、GAB具有結果的診斷價值，但PAB、ASCA對于UC的診斷并無較高價值，也有可能是因為該文選取樣本較少，無法確定其診斷意義，還需進一步擴大樣本進行討論。

[1]李慕然，劉艷迪，鄭曉莉，等.血清學抗體檢測對炎癥性腸病的診斷價值[J].中華臨床醫師雜志：電子版，2013,7(6)：2425-2427.

[2]謝文，汪付兵，余曉萍，等.潰瘍性結腸炎患者血清自身抗體檢測的臨床價值[J].國際醫學檢驗雜志，2013，34(15)：1959-1960.

[3]韓曉芳，劉洋，譚艷，等.鈣衛蛋白及抗中性粒細胞胞漿抗體聯合檢測對炎癥性腸病的診斷價值研究[J].國際檢驗醫學雜志，2012，33(11)：1286-1288.

[4]張玲玲，許鐘，黃國美，等．血清抗體檢測在炎癥性腸病中的臨床應用研究[J].中國實用醫藥，2016，11(26)：1-3．

[5]李艷萍．867例抗中性粒細胞胞漿抗體檢測的臨床分析[J].吉林醫學，2012，33（11）：2265-2266.

[6]麻婧，吳開春．糞鈣衛蛋白在炎癥性腸病應用中的優勢探討[J].胃腸病學和肝病學雜志，2016，25(2)：231-234.

[7]李莉，張文．抗中性粒細胞胞漿抗體檢測臨床意義分析[J].國際醫學檢驗雜志，2012，33（18）：2281-2282.

[8]王璋，吳泉峰.血清自身抗體.P-ANCA及GAB檢測在潰瘍性結腸炎中的臨床診斷價值探討[J].檢驗醫學與臨床，2016，13（16）：2288-2290.

[9]時玉菲，章先，謝琿，等.金黃色葡萄球菌A型腸毒素雙抗體夾心ELISA檢測方法的建立及應用[J].微生物學通報，2016，43（3）：687-694.

[10]Mooci G,Marzo M,Papa A,et al.Dermatological adverse reactions during anti-TNFtreatments：focus on inflammatory bowel disease[J].J Crohns Colitis，2013，7(10)：769-779.

[11]薛霖，余楠，郭勇暉，等.手足口病相關腸道病毒感染血清中交叉抗體反應的初步鑒定[J].中華疾病控制雜志，2015，19（7）：655-658.

[12]Baar JE,Nuij VJ,Oldenburg B，et al.Majority of patients with inflammatory boweldisease in clinical remission have mucosal inflammation[J].Inflamm Bowel Dis，2012，18(9)：1634-1640.

[13]毛毅影.血清腸道EV71病毒抗體快速檢測手足口病患兒的臨床意義[J].遼寧醫學雜志，2016，30（1）：30-31.