2017年中科基因?qū)ξ覈?guó)豬群常發(fā)疫病檢測(cè)結(jié)果統(tǒng)計(jì)與分析

孫哲 晉春霞 劉守川 黨占國(guó) 趙坤坤

2017年中科基因?qū)幽稀⒑稀⑺拇ǖ戎饕B(yǎng)殖地區(qū)送檢的豬群樣品進(jìn)行了豬瘟（CSF）、豬繁殖與呼吸綜合征（PRRS）、豬偽狂犬（PR）和豬O型口蹄疫（FMD-O）等常發(fā)疫病的免疫效果評(píng)估、感染狀況監(jiān)測(cè)和（或）疫病檢測(cè)診斷。結(jié)果顯示，除PR外，其它幾種病原的抗體陽(yáng)性率均在70%以上；送檢樣品PRV野毒感染血清學(xué)陽(yáng)性率達(dá)到77%，而CSFv和PRRSv的抗體水平處于相對(duì)穩(wěn)定的狀態(tài)；從疫病的檢測(cè)診斷的案例看，PRv和PEDv等病毒性病原以及葡萄球菌和副豬嗜血桿菌等細(xì)菌性病原的危害較大。以上結(jié)果可為我國(guó)豬群常發(fā)疫病的防控提供參考。

1抗體檢測(cè)結(jié)果的統(tǒng)計(jì)與分析

2017年我們共檢測(cè)豬瘟（抗體18510份、豬偽狂犬病gE抗體18783份、gB抗體15456份、豬繁殖與呼吸綜合征抗體20331份、豬O型口蹄疫抗體3870份。下面對(duì)檢測(cè)結(jié)果做一簡(jiǎn)要統(tǒng)計(jì)與分析。

1.1豬瘟

匯總后的CSF抗體檢測(cè)結(jié)果顯示，各階段豬群的抗體陽(yáng)性率均在70%以上，總體陽(yáng)性率為87.5%，免疫效果良好（表1）。但檢測(cè)中發(fā)現(xiàn)個(gè)別豬群在豬瘟疫苗首免時(shí)，母源抗體偏高，阻斷率多數(shù)在70%以上，導(dǎo)致免疫后抗體不升反降。對(duì)這些豬群調(diào)整免疫程序，待抽檢豬只抗體一半陽(yáng)（阻斷率不高于70%）、一半陰，或80%以上豬只阻斷率降至50% - 60%時(shí)進(jìn)行豬瘟疫苗首免，后續(xù)跟蹤二免后一個(gè)月豬群陽(yáng)性率即可達(dá)到70%以上。說(shuō)明豬群需根據(jù)母源抗體水平確定首免時(shí)間，以確保豬瘟疫苗的免疫效果。

1.2豬偽狂犬病

1.2.1 PRV gE抗體

從2011年至2016年中國(guó)動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心的監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)[1]看，重點(diǎn)監(jiān)測(cè)的100家原種豬場(chǎng)，gE場(chǎng)陽(yáng)性率由64.3%下降到13.7%，個(gè)體平均陽(yáng)性率由1 7.8%下降到13.7%。而我們2017年P(guān)RV gE抗體檢測(cè)場(chǎng)陽(yáng)性率為77.0%，個(gè)體平均陽(yáng)性率為43.3%（表2和表3），其中個(gè)別阻性種豬場(chǎng)的個(gè)體阻性率超過(guò)60%，表明PRV野毒感染在部分豬群中仍比較嚴(yán)重。在原種豬場(chǎng)gE抗體阻性率逐漸下降的情況下，種豬場(chǎng)與商品豬場(chǎng)gE抗體阻性率仍居較高水平，提示引種企業(yè)在引進(jìn)PRV陰性種豬前后，需做好本場(chǎng)的凈化維持工作，尤其是后備種豬，必須逐頭檢測(cè)，剔除陽(yáng)性豬，不能留作種用。根據(jù)我公司的監(jiān)測(cè)結(jié)果，遼寧、吉林和福建等地多個(gè)種豬場(chǎng)采用該法維持了引進(jìn)陰性種豬群的偽狂犬陰性狀態(tài)。

1.2.2 PRV gB抗體

通過(guò)對(duì)在售PRV gB抗體檢測(cè)試劑盒的評(píng)價(jià)，我們?cè)跈z測(cè)中采用了與攻毒保護(hù)效果相關(guān)性良好的試劑盒（購(gòu)自普萊柯萬(wàn)泰公司和荷蘭BioChek公司）對(duì)樣品進(jìn)行PRVgB抗體檢測(cè)。

結(jié)果表明，2017年P(guān)RV gB抗體平均阻性率為83.6%，總體水平較高，但在保育和育肥階段，抗體陽(yáng)性率為60%左右，不盡如人意（表4）。

對(duì)使用兩種試劑盒檢測(cè)的結(jié)果分別進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，總體陽(yáng)性率均在80%以上，總體效果較好；其中對(duì)于不同階段的商品豬，抗體阻性率均呈現(xiàn)一直下降的趨勢(shì)，而處于偽狂犬野毒感染預(yù)警值范圍的樣品比例則呈現(xiàn)先下降、后上升的趨勢(shì)（表5和表6），證實(shí)了在gB抗體水平不高的情況下產(chǎn)生了偽狂犬野毒的感染。綜合分析認(rèn)為，對(duì)于這些豬群，應(yīng)根據(jù)母源抗體水平調(diào)整免疫程序，以提高偽狂犬疫苗的免疫效果，盡可能延緩野毒的再次感染時(shí)間，并減少偽狂犬感染后可能引起的發(fā)病損失。

另外，從兩種試劑盒的檢測(cè)結(jié)果對(duì)比可以看出，對(duì)于不同階段的豬群，普萊柯萬(wàn)泰試劑盒的檢測(cè)陽(yáng)性率均稍低于BioChek試劑盒的陽(yáng)性率，根據(jù)前期的評(píng)價(jià)結(jié)果以及試劑盒供應(yīng)商的說(shuō)明，主要原因在于普萊柯萬(wàn)泰將試劑盒陽(yáng)性判界設(shè)置在用新流行毒株攻毒后也可完全保護(hù)的滴度，因此略高于BioChek試劑盒的陽(yáng)性判界。同時(shí)提示我們?cè)谂R床應(yīng)用檢測(cè)數(shù)據(jù)指導(dǎo)生產(chǎn)時(shí)，要根據(jù)不同檢測(cè)試劑的特點(diǎn)對(duì)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行分析。

1.3豬繁殖與呼吸綜合征

2017年檢測(cè)的PRRSV抗體陽(yáng)性率為84.3%。其中包被N蛋白的檢測(cè)試劑盒檢測(cè)陽(yáng)性率為76.4%，S/P值高于3.O的樣品占5.4%（表7）；包被糖蛋白的試劑盒檢測(cè)樣品陽(yáng)性率為90.8%，未出現(xiàn)IRPC值大于180的情況（表8）。兩種試劑盒的檢測(cè)結(jié)果均表明本年度絕大部分豬場(chǎng)的豬繁殖與呼吸綜合征處于相對(duì)穩(wěn)定狀態(tài)，發(fā)病豬群較少，主要見(jiàn)于引種、轉(zhuǎn)群等豬只移動(dòng)后的點(diǎn)狀發(fā)生。

1.4豬口蹄疫

2017年檢測(cè)FMDV（O型）抗體陽(yáng)性率為82.2%（表9），免疫效果較為理想。但鑒于豬群中O型口蹄疫仍時(shí)有發(fā)生，提示我們應(yīng)做好豬群中O型口蹄疫的抗原監(jiān)測(cè)，并對(duì)當(dāng)前疫苗對(duì)流行株的攻毒保護(hù)效果進(jìn)行進(jìn)一步評(píng)估。

2病原檢測(cè)結(jié)果與分析

2.1病毒性病原

2017年進(jìn)行了豬的常見(jiàn)病毒病的核酸檢測(cè)，其中PRRSV、PCV2和PEDV的檢出率較高，均在15%以上，PRV和PoRV次之，結(jié)果見(jiàn)表10和表11。

2.1.1豬繁殖與呼吸綜合征病毒

雖然核酸檢出率較高，但根據(jù)血清學(xué)監(jiān)測(cè)結(jié)果，PRRS在豬群中處于總體相對(duì)穩(wěn)定的狀態(tài)，發(fā)病豬群較少，發(fā)病豬群主要見(jiàn)于引種、轉(zhuǎn)群等豬只移動(dòng)后的點(diǎn)狀發(fā)生。為了確定當(dāng)前PRRSV的優(yōu)勢(shì)基因型，我們對(duì)其中78株P(guān)RRSV進(jìn)行了進(jìn)一步鑒定，6/78為經(jīng)典株，18/78為高致病性藍(lán)耳病變異株，其余的54株均屬于NADC30-Like。結(jié)果表明，NADC30-Like毒株為當(dāng)前的優(yōu)勢(shì)流行株。由于NADC30-Like毒株的高變性以及現(xiàn)售疫苗不能對(duì)其完全保護(hù)[1-2]，因此除了考慮疫苗防控外，重要的是應(yīng)做好引種監(jiān)測(cè)及加強(qiáng)生物安全措施。

2.1.2病毒性腹瀉

在出現(xiàn)腹瀉的豬群中，大部分檢出了豬流行性腹瀉病毒（ PEDV）、傳染性胃腸炎病毒（ TGEV）和輪狀病毒（ PoRV）這三種病原，但亦有部分腹瀉豬群未能檢測(cè)到這三種病原。說(shuō)明除了檢測(cè)這3種主要病原外，我們還應(yīng)關(guān)注其它與腹瀉相關(guān)的原因。

2.1.3豬圓環(huán)病毒

PCV2檢出率總體較高，由于PCV2在豬群中感染較為普遍，所以抗原檢出率較高也與目前的臨床實(shí)際情況相符。鑒于PCV2對(duì)豬場(chǎng)的危害相對(duì)較輕，同時(shí)高抗體情況下病原可同時(shí)存在，難以凈化，所以在相當(dāng)長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)，PCV2在國(guó)內(nèi)豬群中將持續(xù)存在。另外，需要注意的是PCV3目前已在我國(guó)十幾個(gè)省份檢出，感染豬主要表現(xiàn)為皮炎腎病綜合征以及繁殖障礙等。由于PCV2與PCV3的Cap蛋白氨基酸序列同源性僅有30%左右，推測(cè)目前的PCV2疫苗對(duì)PCV3不具有交叉保護(hù)性[3]。因此，在目前的情況下，豬場(chǎng)應(yīng)做好引種監(jiān)測(cè)及加強(qiáng)生物安全措施，以防引入PCV3。

2.1.4豬偽狂犬病毒

臨床送檢樣品均為經(jīng)臨床診斷初步懷疑為偽狂犬發(fā)病的豬場(chǎng)。核酸檢測(cè)結(jié)果顯示，2017年送檢的豬場(chǎng)中，有17.2%的豬場(chǎng)出現(xiàn)了偽狂犬發(fā)病。需要注意的是，由于偽狂犬發(fā)病豬臟器呈灶性病變，取材不到位易導(dǎo)致無(wú)法檢出，另外，因病毒血癥時(shí)間短，血液中病原檢出率較低，因此，臨床送檢時(shí)，取樣必須準(zhǔn)確，否則易出現(xiàn)臨床癥狀典型、但實(shí)驗(yàn)室核酸檢測(cè)無(wú)法檢出的情況。

2.1.5其他病原

對(duì)PPV、JEV、SIV、PDCoV等病原進(jìn)行了檢測(cè)，結(jié)果均未檢測(cè)到（數(shù)據(jù)未顯示）。

2.2細(xì)菌病

對(duì)細(xì)菌的分離情況進(jìn)行了統(tǒng)計(jì)和分析，結(jié)果見(jiàn)圖1。結(jié)果顯示，鏈球菌和大腸桿菌的分離率均達(dá)到了20%以上，葡萄球菌、副豬嗜血桿菌和沙門(mén)氏菌的分離率也都在10%以上，分離率均較高。對(duì)部分分離株進(jìn)行了藥敏試驗(yàn)，結(jié)果鏈球菌主要對(duì)頭孢噻呋、阿莫西林、桿菌肽等高敏；大腸桿菌主要對(duì)頭孢噻呋、硫酸黏菌素等高敏；副豬嗜血桿菌對(duì)頭孢噻呋、甲砜霉素、硫酸粘菌素等高敏。

2.3混合感染

對(duì)2017年混合感染情況進(jìn)行統(tǒng)計(jì)和分析，結(jié)果在混合感染病例中，PRRSV、PCV2和PRV三種病原的檢出率最高，均在15%以上，結(jié)果見(jiàn)圖2。這些病原可與病毒（ PEDV、CSFV）和細(xì)菌（副豬嗜血桿菌、鏈球菌、葡萄球菌）等混合感染（數(shù)據(jù)未顯示）。

3總結(jié)

2017年豬的病毒病仍以豬偽狂犬病和豬病毒性腹瀉為主要問(wèn)題，豬繁殖與呼吸綜合征在個(gè)別豬群存在危害，而豬瘟及豬圓環(huán)病毒2型處于總體穩(wěn)定狀態(tài)。對(duì)于豬偽狂犬病，在原種場(chǎng)凈化已見(jiàn)成效的情況下，下游引種企業(yè)應(yīng)做好本場(chǎng)的陰性群維持工作，及時(shí)剔除阻性豬；同時(shí)，對(duì)于商品豬場(chǎng)，應(yīng)采取適當(dāng)措施，例如根據(jù)抗體監(jiān)測(cè)情況，選擇合適的首免日齡，調(diào)整免疫程序，以盡可能延緩野毒感染的時(shí)間。對(duì)于豬病毒性腹瀉，目前感染無(wú)明顯的季節(jié)性，一年四季均可發(fā)病，并且在表現(xiàn)腹瀉的豬群中，除了檢測(cè)PEDV、TGEV和PoRV這3種主要病原外，我們應(yīng)同時(shí)關(guān)注其它腹瀉相關(guān)的病因。

豬細(xì)菌病中，鏈球菌與其他病原混合感染引起的保育及育肥豬喘氣、咳嗽、消瘦等多見(jiàn)，部分有神經(jīng)癥狀或猝死。細(xì)菌性疾病的預(yù)防控制過(guò)程中，除做好日常保健、環(huán)境控制，使用敏感藥物控制癥狀外，還需找到其原發(fā)性病毒性病原，做好免疫預(yù)防，提高機(jī)體免疫力。

參考文獻(xiàn)

[1] Bai Xiaofei， Wang Yuzhou， Xu Xin etal. Commercial vaccines provide limited protection to NADC30-like PRRSV infection[J]. Vaccine， 2017， 34 （46）： 5540-5545

[2] Li Chunge， Zhuang Jinshan， Wang Juan， et al. Outbreak Investigation of NADC30-Like PRRSV in South-East China[J]. Transbound Emerg Dis， 2016，63 （5）：474-479

[3]湛洋，王東亮，王乃東等.豬圓環(huán)病毒3型檢測(cè)及其Cap結(jié)構(gòu)序列和抗原性預(yù)測(cè)分析[J]畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào)，201 7，6（48）：1076-1084