RP—HPLC法測定鹽酸左氧氟沙星片的含量

王妍

摘 要：鹽酸左氧氟沙星具有抗菌譜廣，抗菌作用強的特點，它的主要作用機理是通過抑制細菌DNA旋轉(zhuǎn)酶（細菌拓撲異構(gòu)酶Ⅱ）的活性，阻礙細菌的復制而達到抗菌作用。方法：采用安捷倫C18色譜柱（218mm×4.6mm，5μm），醋酸銨高氯酸鈉溶液（pH=2.2）-乙腈（85：15），檢測波長為294nm，流速為1.0ml/min，柱溫為30℃。結(jié)論：本法簡便、準確，可用于鹽酸左氧氟沙星片中鹽酸左氧氟沙星的含量測定。

關(guān)鍵詞：鹽酸左氧氟沙星片；含量；測定

鹽酸左氧氟沙星片為氧氟沙星的左旋體，其抗菌活性約為氧氟沙星的兩倍，對大腸埃希菌、沙門氏菌屬、枸櫞酸桿菌、不動桿菌屬以及銅綠假單胞菌、肺炎鏈球菌、化膿性鏈球菌、克雷伯菌屬、志賀菌屬、流感嗜血桿菌、淋病菌等有較強的抗菌活性。鹽酸左氧氟沙星片適用于呼吸系統(tǒng)感染、泌尿系統(tǒng)感染、生殖系統(tǒng)感染、皮膚軟組織感染、腸道感染、敗血癥、粒細胞減少及免疫功能低下等。本實驗采用高效液相色譜法對鹽酸左氧氟沙星片中的鹽酸左氧氟沙星的進行了含量測定。

1 儀器與試藥

1.1 儀器：HS11-1電熱恒溫水浴鍋（上海昨非實驗室設(shè)備有限公司）；Waters2695高效液相色譜儀（北京京科瑞達科技有限公司）；液相柱溫箱（滕州市滕海分析儀器有限公司）；TH-UP實驗室專用高純水機（滕州市滕海分析儀器有限公司）；德安特分析天平0.1mg（上海升徽電子有限公司）；精密電子天平（廈門德量檢測儀器有限公司）；721可見光分光光度計（四川賽恩思儀器有限公司）；SB25-12D超聲波清洗機（寧波新芝生物科技股份有限公司）。

1.2 色譜柱：安捷倫C18色譜柱（218mm×4.6mm，5μm）。

1.3 對照品：青霉素購自中國藥品生物制品檢定所。

1.4 試劑：甲醇（青島雅各化學試劑銷售有限公司）、乙腈（青島雅各化學試劑銷售有限公司）、冰醋酸（青島雅各化學試劑銷售有限公司）、磷酸二氫鈉（濟南匯豐達化工有限公司）、三乙胺（濟南匯豐達化工有限公司）、磷酸（濟南匯豐達化工有限公司）、醋酸銨（濟南匯豐達化工有限公司）、高氯酸鈉（濟南匯豐達化工有限公司）、鹽酸（濟南匯豐達化工有限公司）。

1.5 試藥：鹽酸左氧氟沙星片。

2 測定方法確定

2.1 色譜條件

依據(jù)查閱文獻及考查的結(jié)果，確定色譜條件如下[1-6]。流動相：醋酸銨高氯酸鈉溶液（pH=2.2）-乙腈（85：15），檢測波長：294nm，流速：1.0m·min-1。柱溫：30℃。理論板數(shù)按鹽酸左氧氟沙星峰計算應(yīng)不得低于2000。

2.2 對照品溶液的制備

精密稱取鹽酸左氧氟沙星對照品適量，置容量瓶中，加流動相制成每1mL含10？滋g的溶液，即得。

2.3 供試品溶液的制備

取鹽酸左氧氟沙星片適量，研細，精密稱取，加5毫升0.1mol/l鹽酸溶液，超聲1分鐘，過濾，濾液轉(zhuǎn)移至10毫升容量瓶內(nèi)，即得。

2.4 專屬性試驗

取微晶纖維素、淀粉、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉、硬脂酸鎂等制成陰性樣品，依上述方法測定，結(jié)果在鹽酸左氧氟沙星出峰處陰性液無色譜峰，結(jié)果陰性試驗沒有干擾，表明本方法專屬性良好。

2.5 精密度試驗

精密稱取鹽酸左氧氟沙星對照品適量，加流動相使溶解，制成濃度為10？滋g·mL-1的供試品溶液。照上述色譜條件，精密吸取10μl，連續(xù)進樣6次，記錄峰面積。結(jié)果，RSD=0.68%，表明本方法精密度良好。

2.6 對照品的線性考察

精密稱取鹽酸左氧氟沙星對照品15mg，置250ml容量瓶中，加入流動相溶液使溶解并稀釋至刻度，搖勻，分別精密吸取0.5、1.5、2.5、3.0、3.5、4.5mL，置于5mL量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻。分別精密上述溶液吸取10μL，注人液相色譜儀，依照2.1項下的色譜條件測定，記錄色譜峰。以峰面積（Y）為縱坐標，對照品進樣量（X）為橫坐標，繪制標準曲線，計算回歸方程。結(jié)果表明，鹽酸左氧氟沙星在6～60？滋g·mL-1范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。

2.7 準確度試驗

精密稱取已知含量的樣品6份，分別加入一定量的鹽酸左氧氟沙星對照品，上述方法進行測定，計算回收率，平均回收率為99.1%，RSD=0.92%。結(jié)果表明此方法的回收率良好。

3 結(jié)論

鹽酸左氧氟沙星用藥期間可能出現(xiàn)惡心、嘔吐、腹部不適、腹瀉、食欲不振、腹痛、消化不良、蕁麻疹、發(fā)熱感、皮疹、搔癢、紅斑、視覺異常、耳鳴、幻覺、嗜睡、失眠、頭暈、頭痛等癥狀。對鹽酸左氧氟沙星片質(zhì)量控制至關(guān)重要。實驗還分別考察磷酸鹽緩沖液（pH4.5）-甲醇-乙腈（80：10：10），醋酸銨高氯酸鈉溶液（pH=3.0）-乙腈（85：15），醋酸銨高氯酸鈉溶液（pH=2.2）-乙腈（80：20），磷酸二氫鉀（磷酸調(diào)pH2.8）-乙晴（80：20），磷酸二氫鉀（磷酸調(diào)pH2.8）-甲醇（80：20），磷酸二氫鉀（磷酸調(diào)pH2.8）-乙晴（82：18）磷酸二氫鉀（磷酸調(diào)pH3.0）-乙晴（82：18），乙腈-0.02mol/L磷酸二氫鉀溶液 （pH6.5）（36：64），醋酸銨高氯酸鈉溶液（pH=2.2）-乙腈（85：15）不同比例的流動相，結(jié)果以醋酸銨高氯酸鈉溶液（pH=2.2）-乙腈（85：15）為流動相，供試品各峰分離效果最好，故選用醋酸銨高氯酸鈉溶液（pH=2.2）-乙腈（85：15）為流動相。本實驗表明此方法可用于鹽酸左氧氟沙星片中鹽酸左氧氟沙星的含量測定。鹽酸左氧氟沙星片中鹽酸左氧氟沙星的含量為標示量的95-105%。

參考文獻

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