煙酸阿莫西林可溶性粉在豬體內血藥濃度測定和藥代動力學試驗

武晉孝,劉曉東,孟冬霞,武果桃,任 杰,衛順生,趙 娟,孟 帆,閆益波

(1.山西省飼料獸藥監察所,山西 太原 030027;2.山西省武鄉縣動物防疫監督所 ,山西 長治 046300;3.山西省農業科學院畜牧獸醫研究所,山西 太原 030032)

阿莫西林 (Amoxicilin)又稱羥氨芐青霉素,為半合成的耐酸廣譜青霉素類抗生素。該藥抗菌譜廣、殺菌力強、作用迅速,對主要的革蘭陽性菌及一些陰性菌如鏈球菌、巴氏桿菌、不產青霉素酶的葡萄球菌、大腸桿菌、沙門菌、奇異變形桿菌等均敏感,可廣泛用于治療各種動物的尿道、呼吸道及皮膚的敏感菌感染。目前,國內已批準使用于豬、牛及家禽的敏感菌感染,臨床使用的主要為阿莫西林三水合物。由于阿莫西林水溶性差,按照獸藥典生產阿莫西林可溶性粉溶解性較差,通過查閱文獻,煙酸作為助溶劑,可顯著提高阿莫西林的溶解度。本項目通過研究煙酸阿莫西林可溶性粉在豬體內的生物利用度及藥動學特征,并比較煙酸阿莫西林可溶性粉與市售阿莫西林可溶性粉的藥動學差異,為臨床提供依據。

1　材料與方法

1.1動物 12頭健康的長白 ×約克夏×杜洛克雜交豬,公母各半,8周齡左右,體重范圍 13～17(15.6 ±1.8)kg。 按常規飼養,自由飲水和采食,飼料為全價日糧,不含抗菌藥物。臨床觀察一周表現健康。豬只隨機平均分為兩組[1-3],按隨機交叉試驗設計,第1組進行口服市售的10%阿莫西林可溶性粉藥動學試驗,第2組進行煙酸阿莫西林可溶性粉的藥動學試驗。給藥劑量均為 10 mg/kg·bw。試驗前16 h起及試驗期間禁食,僅自由飲水。

1.3儀器 Waters2695高效液相色譜分析系統(2478紫外檢測器);渦旋混合機(VORTEX 4);高速冷凍離心機(Biofuge Stratos)。

1.4色譜條件 色譜柱 XDB C18(Φ4.6 mm ×250 mm,5 μm), 流動 相:乙 腈 -0.068 mol/L KH2PO4(4.5∶95.5)[4],流速:1.0 mL/min,檢測波長:225 nm,柱溫:25℃ ±0.1℃。

1.5給藥和血樣采集 豬只仰臥保定,從前腔靜脈采血。給藥前采一次空白血?？诜?胃管灌服)給藥后分別于 5,20,40 min 及 1、2、3、4、8、12、15、24、36 h采血。每次從靜脈采血約3 mL,置于含肝素的離心管中,混勻,4 000 r/min離心 10 min,分離血漿,-20℃冰箱保存至測定。

1.6血漿樣品處理 精密量取上述儲備血漿樣本0.4 mL,補加0.1 mL蒸餾水(添加樣品不再補加),加入20%(V/V)高氯酸溶液0.1 mL沉淀蛋白[5],旋渦震蕩30 s,高速冷凍離心15 000 r/min(4℃)離心5 min,取上清液100 μL,待測。

1.7藥代動力學參數測定 取“1.5”項下儲備的血漿樣本,按“1.6”和“1.4”項下方法操作,得色譜峰面積(A),代入阿莫西林標準線,得阿莫西林血漿樣本濃度。

采用3P97軟件處理實測血漿阿莫西林濃度一時間數據,計算出有關藥代動力學參數。阿莫西林可溶性粉和煙酸阿莫西林可溶性粉的藥代動力學參數采用配對t檢驗進行統計學比較。

2　結果

藥代動力學參數測定 受試豬口服兩種阿莫西林可溶性粉后,不同時間血藥濃度的實測值見表1,藥代動力學最佳數學模型均為一級吸收二室模型,即血藥濃度與時間的關系可用下列方程式表示:C=Ae+Be—p一(A+B)e—kat?？诜煞N阿莫西林可溶性粉的藥代動力學參數見表2。

表1　豬單劑量口服兩種阿莫西林可溶性粉的血藥濃度(μg/mL)　(± SD,n=6)

表1　豬單劑量口服兩種阿莫西林可溶性粉的血藥濃度(μg/mL)　(± SD,n=6)

ND:notdetectable(檢測不到,P＜0.05 μg/mL)

采血時間　　口服阿莫西林______________________可溶性粉(10/%)口服煙酸阿莫西林可溶性粉(60/%)5 m　0.07 ±0.04　0.17 ±0.08 20 m　0.70 ±0.41　1.52 ±0.75 40 m　3.12 ±1.56　6.38 ±3.12 1 h　5.03 ±2.36　6.05 ±3.08 1.5 h　4.85 ±2.32　5.61 ±2.68 2 h　4.75 ±2.38　5.25 ±2.58 3 h　4.23 ±2.16　4.65 ±2.41 4 h　2.54 ±1.32　3.05 ±1.35 8 h　1.02 ±0.52　1.45 ±0.76 12 h　0.16 ±0.08　0.35 ±0.16 15 h　0.10 ±0.04　0.16 ±0.07 24 h　0.05 ±0.02　0.06 ±0.03________36_______________________________________________h_ND_ND

表2　豬單劑量口服兩種阿莫西林可溶性粉(10 mg/kg·bw)的藥代動力學參數

3　討論

3.1本試驗建立了煙酸阿莫西林可溶性粉中阿莫西林血漿藥物濃度的反相高效液相色譜測定方法

利用色譜柱XDB C18柱(Φ4.6 mm×250 mm,5 μm),乙腈 -0.068 mol/L KH2PO4(4.5∶95.5)流動相系統,能夠將血漿中雜質、血漿中阿莫西林有效分離,分離度大于1.5。采用20%(V/V)高氯酸溶液直接沉淀血漿蛋白,取上清液測定阿莫西林血漿藥物濃度,方法簡便,適合于阿莫西林血漿藥物濃度測定。

3.2煙酸阿莫西林可溶性粉藥代動力學特征 健康豬口服煙酸阿莫西林可溶性粉后,主要動力學參數為:tmax(h)=0.75,Cmax(μg/mL)=6.38,AUC0→t(h·μg/mL)=32.394。以上參數說明煙酸阿莫西林可溶性粉比市售阿莫西林可溶性粉吸收迅速,達峰提前,峰濃度提高,AUC明顯增加,揭示了煙酸阿莫西林可溶性粉因溶解度提高而顯著提高了阿莫西林的生物利用度。

參考文獻: