全自動細胞腫瘤篩查分析系統在良惡性腹水診斷中的應用

楊夏彤，馮驚濤，陳科全，王永，王金朋

（1.深圳市龍華區中心醫院，廣東 深圳 518110；2. 湖南省血吸蟲病防治院，湖南 岳陽 414000；3.廣州醫科大學附屬第一醫院，廣東 廣州 510120）

0 引言

良惡性腹水的判斷，是臨床工作中經常遇到的問題，準確、快速的判斷腹水的良惡性，對臨床具有重要的意義。判斷腹水的良惡性，最常用的方法是腹水涂片或腹水涂片聯合液基細胞學，該方法雖然操作方便、易于實施，但存在惡性腹水漏檢的情況。某些腫瘤標志物的檢測，如癌胚抗原（CEA）、糖鏈抗原（CA）等，雖具有相當的參考價值，但特異性和敏感性均不足。腫瘤相關MicroRNA（miRNA）的檢測，目前尚處于研究階段，鮮有臨床應用的報道[1]。DNA倍體分析是細胞學判讀中的計算機輔助診斷技術，已在臨床細胞學檢測的多個領域廣泛應用[2-3]。本課題采用全自動細胞腫瘤篩查分析系統（DNA倍體分析）判斷腹水的良惡性，然后與腹水涂片聯合液基細胞學鏡檢比較，觀察全自動細胞腫瘤篩查分析系統在我院良惡性腹水判斷中的應用情況。

1 材料與方法

1.1 標本來源

腹水標本為本院2016.9-2017.3期間臨床送檢的207例樣本（男性118例，女性89例）。

1.2 方法

1.2.1 細胞收集

取送檢腹水約50-200mL，3000r/min離心3分鐘，小心棄上清，沉淀用于下一步實驗。

1.2.2 腹水涂片聯合液基細胞學鏡檢

腹水涂片：將上一步驟的細胞沉淀和未棄盡的上清液混勻，取混勻液一滴，用推片法涂片兩張，HE 染色用于鏡檢。

液基細胞學：將前述混勻液用沉降式制片染色機（廣州安必平醫藥科技股份有限公司儀器）制片一張（HE染色）。

結果的判讀：以檢見異型細胞為陽性結果，檢見可疑異型細胞為可疑陽性結果，未檢見異型細胞為陰性結果。

1.2.3 全自動細胞腫瘤篩查分析系統

取1.2.1步驟的細胞沉淀，用全自動細胞腫瘤篩查分析系統（武漢呵爾醫療科技發展有限公司儀器，SPICM-DNA型）制片（Feulgen 染色）分析。結果的判斷以DNA指數（DI）在1.75-2.5之間的細胞數≥10%、或DI≥2.5的細胞≥3個為陽性，以1.25≤DI＜1.75的細胞形成峰值、或DI≥2.5的細胞＜3個為可疑陽性，其余為陰性。

1.2.4 統計學方法

不同方法之間的敏感性和特異性比較采用χ2檢驗。

2 結果

2.1 全自動細胞腫瘤篩查分析系統在良惡性腹水判斷中的應用情況

經免疫組化、活檢和/或半年以上的隨訪，207例臨床送檢的腹水中，最終確診為惡性49例，全自動細胞腫瘤篩查分析系統陽性39例（敏感性79.6%），腹水涂片聯合液基細胞學鏡檢陽性40例（敏感性81.6%），兩者之間敏感性的差別沒有統計學意義（P＞0.05）。207例腹水中，診斷為良性158例，全自動細胞腫瘤篩查分析系統陰性135例（特異性85.4%），腹水涂片聯合液基細胞學鏡檢陰性142例（特異性89.9%），兩者之間特異性的差別沒有統計學意義（P＞0.05）（詳見表1）。

表1 腹水涂片聯合液基細胞學鏡檢與全自動細胞腫瘤篩查分析系統對腹水的檢測結果

2.2 全自動細胞腫瘤篩查分析系統在良惡性腹水判斷中的意義

DNA倍體分析在腹水中的應用價值，已有不少學者進行了探討[4-6]。本研究采用全自動細胞腫瘤篩查分析系統對腹水細胞進行DNA倍體分析，結果發現：在24例腹水涂片聯合液基細胞學鏡檢難以確定良惡性的腹水中（8例被證實為惡性），其中有6例陽性（5例為前述惡性腹水）；在143例腹水涂片聯合液基細胞學鏡檢判讀為良性的腹水中（1例被證實為惡性，為癌），其中有2例陽性（1例為前述癌）（詳見表2）。

表2 全自動細胞腫瘤篩查分析系統與腹水涂片聯合液基細胞學鏡檢的比較

3 討論

目前，DNA倍體分析在我國已經得到了比較廣泛應用，尤其在宮頸癌的篩查方面[2,3]。DNA倍體分析在腹水中的應用價值，也有不少學者進行了探討[4-6]，本研究采用全自動細胞腫瘤篩查分析系統對腹水細胞進行DNA倍體分析。通過比較，本研究發現全自動細胞腫瘤篩查分析系統的敏感性和特異性與腹水涂片聯合液基細胞學鏡檢沒有不同，但可以檢出部分腹水涂片聯合液基細胞學鏡檢難以確定良惡性和甚至漏診的標本。

腹水涂片聯合液基細胞學鏡檢是目前判斷良惡性腹水最常用的檢測手段，盡管該方法可以準確地判讀惡性腹水，但卻常遇到難以判斷良惡性的情況，甚至有時會漏診惡性腹水。這時， DNA倍體分析將可以快速地輔助判斷腹水的良惡性情況，本研究采用的全自動細胞腫瘤篩查分析系統，確實有效地輔助了腹水涂片聯合液基細胞學鏡檢對腹水良惡性的判斷。但是，DNA倍體分析也有其局限性，比如當細胞反應性增生的時候，DNA倍體分析可能出現假陽性；而當實體腫瘤為二倍體腫瘤、或者腫瘤細胞聚集成團的時候，DNA倍體分析也可能出現假陰性。本研究采用的全自動細胞腫瘤篩查分析系統的結果中，也出現了類似的假陽性和假陰性。

總之，全自動細胞腫瘤篩查分析系統比常規細胞學鏡檢具有重復性好、客觀性強、操作簡便、不需要培訓良好的細胞學病理醫師等優勢，還具有讀片（掃描）全面、準確性較高、不易疲勞、不受個人狀況影響等特點。因此，其在腹水良惡性的判斷中具有較高的輔助應用價值，特別對于臨床上，消化內科診斷肝癌惡性腹水、胰腺癌腹膜轉移、肝硬化腹水、腹膜炎腹水、子宮附件癌、胃腸惡性腫瘤腹膜轉移等疾病所致的腹水具有較好的鑒別作用。

[1] 陳鳳,劉崇梅,王彩霞.良惡性胸腹水病理檢測中的研究進展[J].中國醫藥指南, 2014,12(25):78-82.

[2] 毛志遠,熊梅,任力,等.DNA倍體分析在良惡性支氣管刷片或支氣管灌洗液中的診斷價值[J].華西醫學,2014,29(12):2226-2229.

[3] David Garner.Clinical application of DNA ploidy to cervical cancer screening:A review[J].World Journal of Clinical Oncology, 2014,5(5): 931-965.

[4] 李德昌,任力,李煒,等.全自動細胞圖像分析系統在鑒別良惡性腹水中的應用[J]. 診斷病理學雜志,2011,18(2):134-136.

[5] 趙煥,郭會芹,李華,等.探討全自動DNA_ICM對漿膜腔積液細胞學的輔助診斷價值[J].中國醫刊,2015,50(3):57-59.

[6] 馬文,杜娟,張先明,等.脫落細胞DNA倍體分析及胸腹水CEA與血清CEA比值的診斷價值[J].貴陽醫學院學報,2016,42(6):209-212.