應用SP免疫組化法檢測宮頸鱗癌組織中SOX2蛋白表達水平的臨床價值分析

胡 幸，徐曙光，符青云(.江門市五邑中醫院病理科，廣東 江門 5900；.江門市婦幼保健院病理科，廣東 江門 5900)

宮頸癌是臨床常見的惡性腫瘤疾病，具有較高的發病率和死亡率，直接影響著女性患者的身心健康[1]。目前，有研究結果證實，白血病、結腸癌、肺癌等中均存在腫瘤干細胞，可見其在腫瘤發生、發展中發揮著重要作用。SOX2蛋白屬于干細胞轉錄因子，在胚胎干細胞、生殖腫瘤細胞中均有表達[2-3]。分析SOX2蛋白在宮頸鱗癌、CIN組織以及正常宮頸組織中的表達情況，探討其在宮頸鱗癌發展中的參與作用，現報告如下。

1 資料與方法

1.1一般資料：選取2011年6月～2016年6月96例宮頸鱗癌組織、75例宮頸CIN組織，術中切除并行組織病理學檢查證實。96例宮頸鱗癌患者，年齡39～68歲，平均(49.62±2.43)歲，TNM分期：56例Ⅰ期，40例Ⅱa期；分化程度：36例低分化，33例中分化，27例高分化；38例合并淋巴結轉移，58例無淋巴結轉移。74例CIN患者，年齡35～64歲，平均(50.26±3.26)歲，44例正常宮頸組織均來源于子宮肌瘤切除術患者，年齡31～60歲，平均(24.26±2.65)歲。以三組患者年齡對比，差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2SP免疫組化檢測：取宮頸組織標本行切片、脫蠟、水化處理。取pH值6.0枸櫞酸鈉對抗原行修復處理，對切片進行加熱，加熱溫度控制100℃，并取PBS沖洗切片。依次滴入過氧化酶阻斷液、非免疫生動物、第一抗體、生物素標記的第二抗體、SP溶液，每滴入1次溶液，于常溫下孵育10 min，最后滴入DAB顯色劑顯色，于室溫下孵育5 min，將切片置于顯微鏡下觀察染色情況。

1.3結果判斷標準：于顯微鏡下觀察細胞核染色情況，若為棕褐色顆粒狀，則提示SOX2為陽性表達。判定標準：①觀察細胞核染色深度積分，分值為0～3分，0分為無染色，1分為弱染色，2分為中度染色，3分為強染色；②觀察細胞的染色率，分值為0～3分，0分為無染色，1～3分染色率臨界值分別為25%、50%。兩種判定標準值：將染色深度和細胞染色率分值相加，0分提示SOX2為陰性表達，<2分為弱陽性，3～4分為中度陽性，>5分為強陽性。

2 結果

2.1不同宮頸組織的SOX2-mRNA的表達情況：宮頸鱗癌組織的SOX2-mRNA相對表達量為0.895±0.197，明顯高于CIN組織0.453±0.068和正常宮頸組織0.218±0.065，差異具有統計學意義(P<0.05)，見表1。

表1 同宮頸組織的SOX2-mRNA的表達對比

注：與宮頸鱗癌組織相比，①t=18.58，P<0.05；②t=22.86，P<0.05

2.2宮頸鱗癌臨床病理表表現與SOX2表達的關系：Ⅱa期宮頸鱗癌組織的SOX2陽性表達率為82.50%，顯著高于Ⅰ期51.79%，低分化宮頸鱗癌組織的SOX2陽性表達率94.44%，顯著高于中分化(69.70%)和高分化(51.85%)，有淋巴結轉移宮頸鱗癌組織的SOX2陽性表達率84.21%，顯著高于無淋巴結轉移的50.34%，差異均具有統計學意義(P<0.05)。見表2。

表2 宮頸鱗癌臨床病理表表現與SOX2表達的關系[例(%)]

3 討論

SOX屬于SRY相關基因中的一種，在胚胎干細胞、生殖道細胞、腫瘤中的陽性表達相對較高。梁洪享等指出，SOX蛋白可直接參與神經、器官發育中，若其出現病變，可能誘發疾病[4]。隨著臨床對SOX的是深入研究，發現SOX2作為SOX的轉錄因子在肺癌、乳腺癌的陽性表達率相對較高[5-6]。有文獻指出，食管鱗癌的SOX2陽性表達率高達56.0%顯著高于食管癌正常黏膜組織。臨床研究表明，宮頸鱗癌的發生、發展可能與SOX2表達存在直接關系。HPV感染是宮頸鱗癌發病的高危影響因素，部分HPV感染的細胞球可能病變為腫瘤細胞，誘發宮頸鱗癌[7]。

本研究中，宮頸鱗癌組織的SOX2-mRNA相對表達量為0.895±0.197，明顯高于CIN組織和正常宮頸組織，差異具有統計學意義(P<0.05)。Ⅱa、低分化以及存在淋巴結轉移患者宮頸鱗癌組織的SOX2陽性表達率相對高，與Ⅰ期、中高分化、無淋巴結轉移的宮頸鱗癌組織相比，差異具有統計學意義(P<0.05)。結果顯示,SOX2可能參與至宮頸鱗癌的發展中。陳淑貞等[8]分析SOX2在胃癌中的表達情況，發現與正常胃組織相比，SOX2-mRNA呈明顯上升趨勢。蔡永萍等[9]提出SOX2在骨肉瘤中的陽性表達率相對較高，本研究結果與其相符。有研究表明，腫瘤分期與分化情況均存在SOX2陽性表達，含SOX2蛋白細胞可能是腫瘤細胞，但該研究結果結果還有待進一步證實。谷冀暉等認為，SOX2的陽性表達與腫瘤分化程度呈負相關關系，可能與腫瘤組織的浸潤深入有關[10]。

綜上所述，SOX2與宮頸鱗癌的分化程度、淋巴結轉移情況等存在直接關系，對患者的預后診治具有指導意義。

4 參考文獻

[1] 蔡春芳,譚國勝,俞 奇，等.轉錄因子SOX2在宮頸上皮內瘤樣病變及宮頸癌中的表達及臨床意義[J].南方醫科大學學報,2013,33(1):128.

[2] 李鵬飛,呂慧娜,韓立波，等.轉錄因子Oct4、Sox2在人肺癌中的表達及其臨床意義[J].山東醫藥,2012,52(20):79.

[3] 蓋文君,姚 宏,姚孟飛，等.SOX2 OCT4β-連環蛋白p120ctn在甲狀腺癌中的表達及臨床意義[J].中國藥物與臨床,2014,21(7):885.

[4] 梁洪享,鐘 竑,羅 勇，等.腫瘤干細胞標志物CD133、CD44、SOX2、OCT4、ALDH1在非小細胞肺癌組織中的表達及臨床意義[J].腫瘤防治研究,2013,40(12):1138.

[5] 張廣杰.轉錄因子SOX2在常見腫瘤研究中的新進展[J].重慶醫學,2012,41(21):2221.

[6] 姚孟飛.SOX2 OCT4基因在惡性腫瘤轉移中的研究進展[J].中國藥物與臨床,2014,11(7):917.

[7] 常曉晗,張 晶,魏 恒，等.沉默SOX2對宮頸癌細胞增殖及侵襲能力的影響及機制研究[J].醫學臨床研究,2014,9(6):1056.

[8] 陳淑貞,許 玲,劉鳳軍，等.SOX2在胃癌組織中的表達與臨床意義[J].中國現代普通外科進展,2012,15(7):537.

[9] 蔡永萍,萬 陽,劉德寶，等.Sox2在骨肉瘤組織中的表達及其臨床病理意義[J].中國組織化學與細胞化學雜志,2014,23(1):6.

[10] 谷冀暉,王 心,胡春艷，等.宮頸鱗癌組織中Sox-2的表達變化及意義[J].山東醫藥,2012,52(30):36.