病毒血清學及DNA聯合檢測用于嬰幼兒傳染性單核細胞增多癥的分析

徐勇軍

傳染性單核細胞增多癥，即IM，因EB病毒感染引發的傳染性疾病，以兒童為高發人群，臨床表現復雜多變，以體溫過高、咽峽炎、肝脾腫大、淋巴結增多等為典型臨床表現，任意季節均可發病，而且多伴發臟器損傷，導致臨床表現比較擔憂，早期診斷難度較大，漏診及誤診風險非常高，這就導致IIM病情進展迅速，若未能及時接受抗病毒等有效治療，很容易發生死亡，重癥IM患者死亡數量甚至高達九成[1-2]。本次研究選擇2014年1月～2016年12月于本院接受治療的單核細胞增多癥患兒80例，均在清晨空腹狀態下抽取靜脈血樣本，分別經ELISA法+EBV抗體，及PCR定量+外周核細胞EBV-DNA方案進行檢測，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 本次研究選擇2014年1月～2016年12月于本院接受治療的單核細胞增多癥患兒80例，男51例，女29例，年齡6個月～10歲，平均（5.10±1.46）歲。其中＜1歲19例，1歲組20例，2～3歲20例，≥4歲21例；春夏季發病39例，秋冬季發病41例。

納入標準：①臨床資料完整；②入院后完善相關檢查，明確單核細胞增多癥診斷；③能夠耐受本次研究，中途未脫出；④所有患兒、家屬、法定監護人或法定代理人均對本次研究內容知情，自愿參與，并同醫院簽訂知情同意書。排除標準：①臨床資料不完整，哭鬧不止不肯配合，無法完成本次研究者；②腫瘤患者，心肝腎等重要臟器嚴重疾病，波及全身的重度感染；③凝血障礙、白血病等血液系統疾病；④其他不適合參加本次研究者。

1.2 方法 所有患兒均在清晨空腹狀態下抽取靜脈血樣本，分別經ELISA法+EBV抗體，及PCR定量+外周核細胞EBVDNA方案進行檢測，分析檢測結果。其中檢測抗體是指VCAIgM/G,EA-IgG以及EBNA-IgG；EB病毒檢測儀器，并使用配套試劑，EB病毒DNA使用儀器是進口ABI7500，以及深圳達安基因的相應試劑；急性期是指患病21 d以內，恢復期是指患病后4～8周時間內，隨訪期是指超過24周時間均可。本次研究中設置陰性對照，同時將檢測后低于10×103拷貝者設為檢驗結果陰性[3-4]。

1.3 統計學方法 采用SPSS 18.0統計學軟件進行數據分析，計數資料以例數表示，采用χ2檢驗；計量資料采用“x±s”表示，采用t檢驗；P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 檢測所有患兒VCA-IgM結果 所有患兒均在體溫升高21 d內開始檢測，其中＜1歲組19例，1歲組20例，2～3歲組20例，≥4歲組21例，陽性率分別為31.58%、40.00%、60.00%、80.95%；表明隨著年齡的不斷升高，VCA-IgM陽性率隨之不斷上升；比較不同年齡段上下陽性率，統計學分析結果：①＜1歲VS≥1歲，陽性率比較（χ2=4.927 2，P=0.026 4）；②＜2歲VS≥2歲，陽性率比較（χ2=9.756 2，P=0.001 8）；③＜4歲VS≥4歲，陽性率比較（χ2=8.475 8，P=0.003 6）。≥8周，所有患兒復檢VCA-IgM結果均為（-），見表1。

表1 所有患兒初次檢測VCA-IgM/G（+）、EBV-DNA（+）結果[n（%）]Table 1 The results of VCA-IGM/G(+)and EBV-DNA(+)were first detected in allchildren[n(%)]

2.2 檢測所有患兒EBV-DNA結果 ＜1歲小兒檢驗EBV抗體結果均為（-），均需二次檢測，EBV-DNA載量（+）%為68.42%（13/19），病變早期測定VCA-IgM結果均為（-），見表2、表3。

表2 不同時間段內檢測各年齡組患兒的EA-IgG（+），以及EBNA-IgG（+）結果Table 2 The EA-IgG(+)and EBNA-IGG(+)results forchildren with various age groups were tested fordifferenttime period

表3 檢測急性期所有患兒VCA-IgM，以及EBV-DNA檢測結果Table 3 Testresults of VCA-IGMand EBV-DNAin allchildren with acute phase

3 討論

傳染性單核細胞增多癥，即IM，是指因EB病毒感染后發生的以體溫升高，淋巴結/肝脾腫大，咽峽炎，多發性皮膚黏膜皮疹為主要臨床表現的一種傳染性疾病，多見于小兒，尤其是學齡前兒童，以唾液及輸血作為主要感染途徑[5-6]。EB感染人體后，多在口咽內繁殖，經不斷裂解、侵襲鄰近組織細胞等致使毒素被釋放入血，引發病毒血癥，感染淋巴細胞，沿淋巴系統在體內傳播EBV，不斷增加感染病灶，進而產生相應的臨床癥狀。據文獻報道，IM患者死亡率為1%～2%，但重癥IM死亡率最高可超過90%，致死原因主要為呼吸系統神經麻痹導致呼吸衰竭后死亡，而脾破裂或心肌炎等原因導致IM患者死亡發生風險較低，嚴重威脅兒童健康。而IM好發于兒童提示IM患者年齡與發病率有一定的關聯[7]。

IM初期多無典型癥狀，病情復雜多變，容易出現誤診，因此需盡早檢測，明確診斷。而在EB病毒感染過程中，依次產生IgM/G抗原，而在急性期/恢復期的晚期，經檢測可發現IgG抗核抗原生成，而且患兒終身均檢測抗VCA-IgG（+），以及抗EBNV-IgG（+），這為臨床確診IM提供具有一定可靠性的依據。本次研究結果顯示，單核細胞增多癥急性期，＜1歲、≥4歲小兒VCA-IgM（+）率分別為31.58%（6/19）、80.95%（17/21）；＜1歲小兒檢驗EBV抗體結果均為（-），均需二次檢測，EBV-DNA載量（+）%為68.42%；表明隨著年齡的不斷升高，VCA-IgM陽性率隨之不斷上升。但需要注意的是，在EBV攜帶者淋巴細胞中，EBV-DNA載量通常維持較低水平。據醫學研究發現，檢測CAEBV患者血液中的EBV-DNA載量，結果發現其載量多少，與患者病情實際情況、預后關系密切[8]。

總之，IM急性期，僅經由血清學檢查完成IM的診斷無法令人滿意，建議聯合EBV-DNA檢測，有助于提高IM患兒檢出率，判斷治療效果及預后。

參考文獻

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[8] 楊琴,周太光.311例兒童傳染性單核細胞增多癥臨床分析[J].西南軍醫,2017,19(2)：119-121.