Gli1在乳腺癌侵襲轉移過程中的作用及與病理特征的關系

孟尚文，鄭建云

乳腺癌是女性常見惡性腫瘤，近年其發病率呈上升趨勢，嚴重影響女性健康。上皮細胞間質細胞轉化與乳腺癌侵襲轉移密切相關[1]，而異常增殖激活的Hedgehog-Gli信號通路對于上皮細胞間質細胞轉化非常重要，能夠導致腫瘤的發生、發展。該通路由配體蛋白、跨膜蛋白、下游轉錄因子Gli組成[2]。脊椎動物存在3種Gli，其中Gli1是一種活性很強的轉錄激活因子，其表達能夠直接反映通路的活性狀態[3]。本研究旨在探討Gli1在乳腺癌侵襲轉移過程中的作用及病理學意義，為研究乳腺癌提供依據。

1 資料與方法

1.1 病例資料 西安醫學院第一附屬醫院2010年1月～2016年1月采取根治性腋窩淋巴結切除術的女性乳腺癌患者共566例，隨機選取其中191例的病例資料進行回顧性分析，年齡25～75（55.3±6.5）歲。均完整實施腫瘤切除和腋窩淋巴結清掃，術后切除的淋巴結組織標本送病理學檢查。

1.2 Gli1蛋白免疫組織化學染色 送檢病理標本通過固定-包埋-切片-脫蠟-水化-修復-阻酶-封閉-富裕-顯色-復染-脫水-透明-封片等步驟，進行Gli1蛋白免疫組織化學染色。免疫組織化學染色結果通過雙盲評分法進行評分。在高倍視野（×400）下，隨機選取5個視野，分別統計陽性染色細胞所占百分比和著色強度。著色強度評分標準：由淺至深無色、淺黃色、黃色、棕黃色分別記 0、1、2、3 分；陽性染色細胞所占百分比評分標準：由少到多0、0%～10%、11%～50%、51%～80%、＞80%分別記 0、1、2、3、4分。總分=著色強度評分×百分比評分。總分＜6分為Gli1蛋白染色陰性，≥6分為陽性。

1.3 方法 統計Gli1蛋白免疫組化染色結果，分析腫瘤病理特征與Gli1表達的關系，以及淋巴結跳躍式轉移與病理特征的相關性。

1.4 統計學方法 應用SAS 9.0軟件分析數據，計量資料以±s表示，采用t檢驗；計數資料用例和百分率表示，采用χ2檢驗；采用Logistic回歸分析進行多因素分析，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 Gli1蛋白免疫組化染色結果 191例中，淋巴結組織中Gli1陽性表達率為21.47%（41/191）。陽性染色呈棕黃色顆粒，染色部位位于細胞核、細胞質。

2.2 Gli1陽性表達與病理特征的關系 Gli1陽性表達與患者年齡、是否絕經、原發腫瘤分期、腫瘤位置、區域淋巴結分期、淋巴結轉移、TNM分期、分子分型等無關，但Gli1表達陽性組的ER、BRCA1、E-cadherin蛋白表達陽性率均顯著低于Gli1陰性組（P ＜ 0.01）。 見表 1。

2.3 淋巴結跳躍式轉移與病理特征的相關性 腫瘤大小、區域淋巴結分期、TNM分期、Gli1表達、乳腺癌分子分型均與淋巴結轉移方式有一定相關性。跳躍式轉移組腫瘤明顯小于正常順序轉移組，區域淋巴結分期N0-1、TNM分期Ⅰ+Ⅱ期患者比率明顯高于正常順序轉移組，Gli1表達陽性比率明顯高于正常順序轉移組，乳腺癌分子分型Luminal A型比率均明顯低于正常順序轉移組（P＜0.05～P＜0.01）。見表2。

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多因素Logistic回歸分析結果顯示，Gli1陽性表達（OR=20.122，95%CI=4.712，P ＜ 0.01）及區域淋巴結分期（OR=0.312，95%CI=0.148，P ＜ 0.05）是影響乳腺癌腋窩淋巴結跳躍式轉移的獨立危險因素。

3 討論

乳腺癌侵襲轉移與上皮細胞間質細胞轉化（EMT）密切相關，E-cadherin表達下調是EMT最重要的標志[4]。本研究發現，乳腺癌組織中Gli1的表達與E-cadherin有明顯相關性，Gli1表達陽性組 E-cadherin蛋白表達陽性率明顯低于Gli1陰性組。提示Gli1表達陽性可導致E-cadherin的表達下調，這可能是Gli1導致乳腺癌侵襲轉移能力得到增強的一個重要機制。本研究發現，Gli1表達陽性組ER蛋白陽性表達率明顯低于Gli1陰性組，提示Gli1的高表達與ER陰性表達密切相關，這可能也是Gli1調控乳腺癌侵襲轉移的一個重要機制，與Boelens等[5]的研究結果一致。本研究還發現，Gli1表達陽性組BRCA1蛋白（抑癌基因）表達陽性率明顯低于Gli1陰性組，進一步證實了Gli1促進乳腺癌發生的病理生理作用。

乳腺癌腋窩淋巴結跳躍式轉移現象的原因目前尚不完全清楚，本研究結果顯示，腫瘤大小、區域淋巴結分期、TNM分期、Gli1表達、乳腺癌分子分型均與淋巴結轉移方式有一定相關性。多因素分析結果顯示，區域淋巴結分期和Gli1的陽性表達是影響乳腺癌腋窩淋巴結跳躍式轉移的獨立危險因素。這將為臨床評估乳腺癌患者腋窩淋巴結狀態提供新的檢測目標。

綜上所述，Gli1表達陽性可增強乳腺癌細胞侵襲轉移能力，且Gli1是影響乳腺癌腋窩淋巴結跳躍式轉移的獨立危險因素。因此，Gli1可能作為預測腋窩淋巴結轉移的指標，為降低乳腺癌患者淋巴轉移提供治療靶點。