反復(fù)輸血者血小板抗體對(duì)血小板輸注的分析與研究

任 俊

（廣州血液中心機(jī)采成分部，廣東 廣州 510095）

臨床上常通過血小板輸血來預(yù)防、治療因血小板功能缺陷、血小板減少等原因?qū)е碌某鲅猍1]。但患者在多次反復(fù)輸血的情況下，可能引起血小板相關(guān)抗體的出現(xiàn)，并導(dǎo)致血小板輸注無效的情況。作為臨床輸血治療中最常見的一類問題，做好血小板抗體的檢測(cè)，把握反復(fù)輸血者血小板抗體對(duì)血小板輸注的影響對(duì)于提高患者的輸注效果十分重要。本文收集2015年9月至2016年9月在我中心接受臨床血小板配型標(biāo)本200份作為研究對(duì)象，并采用固相凝集法對(duì)血小板抗體的產(chǎn)生進(jìn)行監(jiān)測(cè)，分析其對(duì)血小板輸注效果的影響。具體報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料：收集2015年9月至2016年9月在我中心接受臨床血小板配型標(biāo)本200份作為研究對(duì)象，標(biāo)本來源的患者均為反復(fù)輸血，且輸血次數(shù)均＞2次，涉及患者的男35份，女30份，其年齡在20～74歲，平均年齡為（50.2±3.7）歲。患者的原發(fā)性疾病包括了慢性白血病、急性白血病、惡性腫瘤、再生障礙性貧血、骨髓增生異常綜合組，各有14、20、7、12、12份。

1.2 方法：采用固相凝集法對(duì)血液標(biāo)本中的血小板抗體進(jìn)行監(jiān)測(cè)：抽取4 mL靜脈血作為標(biāo)本，將其平均分成兩份，一份置于普通真空管中，另一份置于含有EDTA-K2抗凝劑的真空管中，每份2 mL，通過離心分別獲得上層血清及上層2/3富含PLT的血漿待用。同時(shí)，以凍干血小板稀釋后獲得血小板混懸液。取出反應(yīng)板條，設(shè)處理孔（加樣本）、未處理孔（自身對(duì)照樣本）、陽性對(duì)照孔、陰性對(duì)照孔，先在處理孔、陽性對(duì)照孔、陰性對(duì)照孔內(nèi)加入50 μL血小板混懸液，然后于未處理孔中加入等量自身含PLT血漿。經(jīng)平板離心機(jī)分別離心，使血小板在反應(yīng)孔固定后，再經(jīng)多次洗滌后吸干殘余液體，分別向其中加入100 μL低離子強(qiáng)度溶液后，再于處理孔、未處理孔中加入患者血清50 μL，而陽性對(duì)照孔中加入陽性對(duì)照血清50μL，陰性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照血清50 μL。然后將反應(yīng)板置于37 ℃水浴條件下孵育半小時(shí)，多次洗滌后吸去殘余液體，并向各孔中加入抗人IgG和指示細(xì)胞各50 μL，振蕩混合后，離心，將處理孔、未處理孔的結(jié)果與對(duì)照孔進(jìn)行比較，其顏色變化同陽性孔則為陽性，同陰性孔則為陰性。其中，當(dāng)處理孔陰性而未處理孔呈陽性提示抗體類型為HLA抗體；當(dāng)處理孔與未處理孔均為陽性提示抗體類型為HPA抗體；當(dāng)處理孔弱陽性而未處理孔陽性提示兩種抗體同時(shí)存在；當(dāng)處理孔與未處理孔均為陰性則提示無相關(guān)抗體存在。

同時(shí)，對(duì)血小板輸注前1 h、輸注后1 h及24 h血小板計(jì)數(shù)變化進(jìn)行測(cè)定，采用Sysmex 2100型全自動(dòng)血液細(xì)胞計(jì)量儀對(duì)血小板進(jìn)行定量監(jiān)測(cè)，同時(shí)借助血庫型濾器、床旁型濾除器針對(duì)紅細(xì)胞懸液中、血小板內(nèi)部的白細(xì)胞實(shí)施濾過處理。計(jì)算輸血者血小板輸注結(jié)束后的增值（CCI），CCI=輸注完成后的血小板增值×體表面積/血小板總數(shù)（體表面積=[0.0061×患者身高（cm）+0.0128×患者體質(zhì)量（kg）]-0.01529），如輸血者的血小板輸注完成后1 h內(nèi)CCI＞7.5×109/L，且血小板輸注完成后24 h內(nèi)CCI＞4.5×109/L，認(rèn)為輸注有效[2]。

1.3 觀察指標(biāo)：按照標(biāo)本的血小板抗體監(jiān)測(cè)結(jié)果將其分為陽性組和陰性組，記錄并比較血小板輸注完成后1、24 h后的CCI值以及血小板輸注有效率。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法：本次實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS12.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，其中計(jì)量資料對(duì)比采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料對(duì)比采用卡方檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

200份反復(fù)輸血者的血液標(biāo)本經(jīng)血小板抗體監(jiān)測(cè)，共檢出陽性標(biāo)本114份，占57.00%，陰性標(biāo)本86份，占43.00%，對(duì)兩組標(biāo)本血小板輸注后1、24 h內(nèi)的CCI值進(jìn)行比較，結(jié)果可見陽性組均顯著低于陰性組，同時(shí)，陽性組的輸注有效率（21.05%）也顯著低于陰性組（68.60%），比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異 （P＜0.05）。見表1、2。

表1 血小板抗體監(jiān)測(cè)陰性或陽性者在血小板輸注后1、24 h內(nèi)的CCI值比較（±s）

表1 血小板抗體監(jiān)測(cè)陰性或陽性者在血小板輸注后1、24 h內(nèi)的CCI值比較（±s）

組別 輸注后1h 輸注后24h陽性組(114) 6.79±1.87 2.37±0.74陰性組(86) 19.31±2.04 8.86±1.53 t值 19.297 15.924 P值 0.000 0.000

表2 血小板抗體監(jiān)測(cè)陰性或陽性者的血小板輸注效果比較[n（%）]

3 討 論

血小板輸注無效是血液制品輸注中的常見問題，造成該問題的因素有免疫性因素和非免疫性因素兩種，非免疫性因素以感染、出血、發(fā)熱、藥物使用等為主。免疫因素則以HPA抗原、HLA抗原不合等為主[3]，血小板表面抗原系統(tǒng)有血小板特異性抗原、血小板相關(guān)抗原之分，而血小板相關(guān)抗原與其他細(xì)胞表面或組織共有，因HPA抗體、HLA抗體引起的血小板輸注無效在所有免疫因素中占八成以上，尤以HLA抗體為主[4]。反復(fù)輸血者很容易出現(xiàn)同種免疫反應(yīng)，并產(chǎn)生血小板相關(guān)抗體，再次輸注含有相關(guān)抗體抗原成分的血小板制品時(shí)，抗原抗體反應(yīng)的發(fā)生可能導(dǎo)致血小板破壞，并致血小板輸注無效的產(chǎn)生[5]。

本文對(duì)200份反復(fù)輸血者的血液標(biāo)本中血小板抗體存在情況進(jìn)行了監(jiān)測(cè)，結(jié)果顯示，血小板抗體陽性率為56.92%，同時(shí)，陽性組輸血者血小板輸注后1、24 h內(nèi)的CCI值（CCI值被認(rèn)為是評(píng)價(jià)血小板輸注無效的科學(xué)指標(biāo)，當(dāng)輸血者連續(xù)兩次及以上輸注足量同型血小板，但其循環(huán)血液中的血小板計(jì)數(shù)未見明顯增加，輸血者出血問題無法緩解就可以判斷為血小板輸注無效[6]）均顯著低于陰性組，而輸注無效率則顯著高于陰性組，提示血小板抗體陽性對(duì)其輸注效果有顯著影響。

針對(duì)上述情況，如輸血者出現(xiàn)血小板輸注無效，但仍對(duì)血小板有需求的情況下，可以通過血小板抗體的檢測(cè)及交叉配血試驗(yàn)的實(shí)施，對(duì)免疫因素導(dǎo)致的血小板無效輸注問題進(jìn)行針對(duì)性解決。為了降低血小板抗體陽性導(dǎo)致的血小板輸注無效情況，可通過血小板配合性輸注提高輸注效果。

總之，反復(fù)輸血者可能因免疫反應(yīng)的發(fā)生產(chǎn)生血小板相關(guān)抗體，并影響血小板的輸注效果。

參考文獻(xiàn)

[1] 朱春玲.反復(fù)輸血者血小板抗體對(duì)血小板輸注效果的影響分析[J].生物技術(shù)世界,2015,32(2):53.

[2] 徐煜,吳林伯,吳芳,等.血液病反復(fù)輸血者血小板抗體對(duì)血小板輸注效果的影響[J].河北醫(yī)學(xué),2016,22(6):931-933.

[3] 張秋會(huì),張婧,劉麗娜,等.多次輸血后患者血小板輸注無效的血小板抗體檢測(cè)與分析[J].臨床輸血與檢驗(yàn),2015,17(5):409-411.

[4] 阿不都外力?阿巴拜克力,呂萍,阿布都肉蘇力?肉孜.分析血小板抗體檢測(cè)在反復(fù)輸血患者中的應(yīng)用效果[J].臨床醫(yī)藥文獻(xiàn)雜志,2016,3(18):3558-3559.

[5] 賈曉冰.老年反復(fù)輸血者血小板抗體對(duì)血小板輸注效果的影響[J].中國老年保健醫(yī)學(xué),2014,12(6):200-67.

[6] 夏世勤,蘇莉,劉秋洪,等.血液病患者血小板抗體檢測(cè)及其與血小板輸注療效的相關(guān)性研究[J].醫(yī)學(xué)檢驗(yàn),2013,28(22):82-86.