pH值反調技術在注射用替加環(huán)素生產工藝中的應用

王燕清 陳嘉璐 羅灼輝 曾華哲*

（1 麗珠醫(yī)藥集團股份有限公司，廣東 珠海 519020；2 麗珠集團麗珠制藥廠，廣東 珠海 519020）

替加環(huán)素由惠氏（Wyeth）公司研發(fā)，美國FDA于2005年6月至2006年7月批準惠氏的替加環(huán)素（Tigecycline，商品名Tygacil注射用替加環(huán)素）為治療復雜腹腔內感染和復雜皮膚感染的一線藥物[1]，其化學結構式見圖1。該品種是甘氨酰四環(huán)素類抗生素中獲得批準的第一個產品。替加環(huán)素對G+菌、G-菌、厭氧菌有廣譜抗菌活性, 包括多重耐藥性的G+菌，如MRSA、MRSE、抗青霉素的肺炎鏈球菌、VRE。對不同耐藥機制的耐四環(huán)素致病菌同樣有效[1-3]。

圖1 替加環(huán)素結構式

注射用替加環(huán)素在儲存過程中會因為產品中存在水分而使其差向異構體增加的比例增加，要控制產品中的差向異構體的量小于3%，必須嚴格控制產品的水分在留樣過程中始終不能超過2%，條件極其苛刻。但實際產品在留樣過程中會因為膠塞本身含有水分等各種因素，很難保證產品在兩年的留樣過程中始終保持在2%以內，從而導致產品的差向異構體超標。本實驗擬在生產工藝中增加pH值回調技術，可使產品的差向異構體在40 ℃加速留樣6個月內增加不超過0.5%，絕對值不超過1.0%，而且水分可控制在4%以內，在提高產品質量的同時使生產更具有可控性。

表1 不同pH處方工藝40 ℃加速穩(wěn)定性情況

表2 不同pH起點返調的處方40 ℃加速穩(wěn)定性情況

表3 不同pH返調終點的處方40 ℃加速穩(wěn)定性情況

表4 不同原料廠家制備成的制劑40 ℃加速穩(wěn)定性數據

1 材 料

1.1 實驗器材：冷凍干燥機、pH計、水分儀、高效液相色譜儀。

1.2 原料藥：替加環(huán)素、購自。

1.3 試劑：NaOH、HCl、注射用水、2M的NaOH溶液、2M的HCl溶液。

2 方法與結果

2.1 反調工藝的初步考察：按處方量配制溶液四份，取兩份，以2M鹽酸分別調pH至4.0、4.8；另取2份，以2M鹽酸調pH至4.0，再以2M氫氧化鈉分別返調溶液pH至4.8、5.2，凍干，考察加速實驗穩(wěn)定性變化情況。結果詳見表1。

由以上數據可見，在一定pH范圍內，藥液經返調處理，產品穩(wěn)定性明顯高于未經返調的產品，pH4.8與pH4.0返調至4.8處方相比，加速6個月內，返調處理可降低EPI增長率達 0.9%，且返調幅度越大，EPI增長率越低，穩(wěn)定性越高。另外，普通生產工藝下，如果不將產品的水分始終控制在2.0%以下，產品的差向異構體無法達到質量標準規(guī)定的3%以下；但是，經過反調的生產工藝，即使水分最終達到4.0%，產品仍然合格。

2.2 返調起點的考察：按處方量配制溶液若干份，取三份，以2M鹽酸分別調pH至4.0、3.5、3.0，再以2M氫氧化鈉返調pH至5.2，凍干，考察加速實驗穩(wěn)定性變化情況。結果詳見表2。

由實驗結果可得出結論，返調起點對產品的穩(wěn)定性有明顯的影響，在一定的pH范圍內，返調前pH值越低，返調幅度越大，雜質EPI越小，產品越穩(wěn)定。因此試探著往更低的考察。

研究數據表明，把返調起點控制在pH 2.0～2.5，加速實驗6個月內，能把EPI增長控制在0.5%以內。因而處方工藝返調起點可定在pH 2.0～2.5。

2.3 返調終點的考察：由2.1可知，當返調起點相同時，不同的返調終點對產品的穩(wěn)定性也會產生一定的影響，因此，我們繼續(xù)考察不同返調終點的影響情況。

按處方量配制溶液若干份，取兩份，以2M鹽酸調pH2.5，再以2M氫氧化鈉分別返調pH至5.2、6.0。凍干，考察加速實驗穩(wěn)定性變化情況。結果詳見表3。

實驗數據表明，以pH2.5為返調起點時，返調至pH5.2與返調至6.0，加速6個月內穩(wěn)定性差異較小，返調至6.0，成品EPI略優(yōu)約0.1%；另一方面，考慮到替加環(huán)素進口注冊標準中制劑以5.3 mL生理鹽水復溶后pH要求在4.5～5.5，故把返調終點定在pH4.8～5.4。

2.4 生產工藝適應性驗證：為了驗證確定后的生產工藝，選擇了市場上獲得的其他三個不同廠家的小試原料，按照確定的生產工藝進行小試生產，并留樣考察其穩(wěn)定性情況，結果見表4。

由以上數據可知，該生產工藝適合于該產品其他廠家原料用于制劑生產，且研究表明該工藝下，即使產品的水分高于進口注冊標準規(guī)定的2%達到4%時，產品穩(wěn)定性沒有發(fā)生明顯的變化。

3 討 論

3.1 注射用替加環(huán)素在生產過程中，如果采用普通工藝，必須嚴格控制產品的水分，保證留樣過程中始終小于2%，方可保證產品質量。

3.2 采用pH反調工藝，可提高產品的穩(wěn)定性，可大大降低產品差向異構體的產生，保證產品的差向異構體有效期內小于1%。

3.3 采用pH反調工藝，大大提高了注射用替加環(huán)素的生產可控性，在產品的水分達到4.0%以內，產品穩(wěn)定性良好。

參考文獻

[1] Wyeth Pharmaceutics Tygacil (Tigecycline) for Injection [package insert] [M].Philadelphia, PA: Wyeth Pharmaceuticals Inc,2005.

[2] Athwan ID.Tigecycline clinical evidence and formulary positioning[J].Int J Antimicrob Agents,2005,25(3):185-192.

[3] Zhanel GG,Homenuik K,Nicholk,et al.Eglycy lcyclines a comparative review with the tetracyclines[J].Drugs,2004,64(1):63-88.