中草藥在肉雞傳染性法氏囊病防治中的應(yīng)用研究

黃亞?wèn)| 黃妍 賈猛 薄洪峰

摘要 [目的]探索復(fù)方中草藥防治肉雞傳染性法氏囊病（IBD）的效果。[方法]選取500只肉雞進(jìn)行預(yù)防和治療試驗(yàn)，對(duì)20只肉雞進(jìn)行攻毒預(yù)試驗(yàn)，對(duì)240只健康肉雞進(jìn)行中草藥預(yù)防試驗(yàn)，并對(duì)240只確診患傳染性法氏囊病的肉雞進(jìn)行中草藥治療試驗(yàn)。[結(jié)果]中草藥預(yù)防試驗(yàn)結(jié)果表明，給肉雞灌服中草藥制劑后肉雞IBD的發(fā)病率降至2.5%;中草藥治療試驗(yàn)結(jié)果表明，給確診患IBD的肉雞灌服中草藥制劑后，治愈率達(dá)97.5%。[結(jié)論]由黃芪、黃連、甘草、白術(shù)和板藍(lán)根組成的復(fù)方中草藥制劑對(duì)肉雞傳染性法氏囊病有顯著的預(yù)防與治療效果，為其臨床應(yīng)用提供了依據(jù)。

關(guān)鍵詞 中草藥;肉雞;傳染性法氏囊病（IBD）;防治;治愈率

中圖分類號(hào) S859.79文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A文章編號(hào) 0517-6611（2018）34-0060-02

傳染性法氏囊病（IBD）是一種由傳染性法氏囊病病毒（IBDV）引起的急性、高度接觸性傳染病，多發(fā)生于第3～8周齡，主要侵害雞法氏囊及B淋巴細(xì)胞等，影響B(tài)淋巴細(xì)胞經(jīng)過(guò)血液和淋巴循環(huán)到外周淋巴器官參與體液免疫，同時(shí)影響外周淋巴器官捕捉和合成某些抗體[1]。IBD嚴(yán)重影響雞免疫器官和免疫活性細(xì)胞，導(dǎo)致雞體對(duì)其他疫苗的免疫應(yīng)答功能下降，出現(xiàn)免疫抑制反應(yīng)，致使肉雞發(fā)病率和死亡率提升[2]，制約了養(yǎng)雞業(yè)的發(fā)展。中草藥具有天然性和多功能性，且毒副作用小，無(wú)抗藥性[3]，用其防治雞傳染性法氏囊病操作簡(jiǎn)單，療效確切，安全可靠，價(jià)廉易得，具有廣闊的應(yīng)用前景。筆者選取500只肉雞進(jìn)行中草藥預(yù)防和治療試驗(yàn)，研究復(fù)方中草藥對(duì)肉雞傳染性法氏囊病的防治效果。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 試驗(yàn)動(dòng)物。500只（公母各半）1日齡健康、未經(jīng)任何免疫的白羽肉雞，由淮安宇禾養(yǎng)殖有限公司提供。

1.1.2 中藥材。黃芪、黃連、甘草、白術(shù)、板藍(lán)根，購(gòu)自亳州中藥材市場(chǎng)，符合2015年版《中華人民共和國(guó)藥典》藥材和飲片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。

1.1.3 主要設(shè)備。中藥粉碎機(jī)（型號(hào)為DH-500Y2）和高壓分離煎藥機(jī)（型號(hào)為DH20）由徐州漁米電子科技有限公司提供;中藥過(guò)濾機(jī)（型號(hào)為HTDS），購(gòu)自廣東恒田過(guò)濾設(shè)備有限公司;中藥提取設(shè)備（型號(hào)為TQ12），由溫州市東亞制藥裝備有限公司提供;電熱恒溫水浴鍋（型號(hào)為HWS-12）和電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱（型號(hào)為DHG-9640A）購(gòu)自上海合恒儀器設(shè)備有限公司。

1.2 方法

1.2.1 中草藥制劑的制備。中草藥共5 kg，其中黃芪占18.86%，黃連占28.30%，甘草占18.86%，白術(shù)占15.09%，板藍(lán)根占18.86%。將上述藥材洗凈、干燥，加入藥材質(zhì)量4倍的60 ℃左右的水浸泡30 min后，加熱至100 ℃煮10 min，再文火加熱30 min，過(guò)濾去渣后制成1 200 mL復(fù)方中草藥制劑，經(jīng)100 ℃水浴殺菌10 min后快速冷卻，密閉保存。

1.2.2 IBDV懸液的制備。選取經(jīng)確診典型的IBD病死雞的法氏囊，經(jīng)無(wú)菌生理鹽水沖洗后稱取2 kg并剪碎，按1∶3的量加入無(wú)菌生理鹽水，然后進(jìn)行勻漿處理，于4 ℃條件下放置1 min，經(jīng)離心分離后提取上清液，加入青霉素和鏈霉素各3 000 IU/mL于上清液中，置于-30? ℃冰箱中冷凍保存，得到IBDV懸液。

1.2.3 攻毒預(yù)試驗(yàn)。選取20只健康肉雞作為攻毒試驗(yàn)對(duì)象，用制備的IBDV懸液進(jìn)行攻毒，每只雞采用滴眼、刷肛法進(jìn)行攻毒，劑量為0.5 mL/羽。攻毒后24～48 h，試驗(yàn)雞均表現(xiàn)出傳染性法氏囊病的典型癥狀;60～72 h出現(xiàn)死亡，解剖死亡肉雞確認(rèn)IBDV攻毒有效。

1.2.4 預(yù)防試驗(yàn)。

將240只1日齡雛雞隔離飼養(yǎng)觀察14 d后，隨機(jī)分成6組，每組40只。4個(gè)試驗(yàn)組為預(yù)防組，2個(gè)試驗(yàn)組為對(duì)照組。試驗(yàn)過(guò)程為10 d（16～25日齡）。

15日齡試驗(yàn)雞血清IBD抗體陽(yáng)性率為0。對(duì)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組雛雞逐只灌服中草藥制劑，Ⅰ 組劑量為0.5 mL/只，Ⅱ 組劑量為1.0 mL/只，Ⅲ 組劑量為2.0 mL/只，Ⅳ組劑量為4.0 mL/只，Ⅴ、Ⅵ 組為對(duì)照組。統(tǒng)計(jì)試驗(yàn)期內(nèi)各組雛雞的發(fā)病率。

1.2.5 治療試驗(yàn)

1.2.5.1 血清學(xué)檢查。試驗(yàn)雞于14日齡采血，分離血清后進(jìn)行瓊脂擴(kuò)散（AGP）試驗(yàn)，檢測(cè)其血清IBD抗體，確認(rèn)試驗(yàn)對(duì)象呈陰性。

1.2.5.2 攻毒。于14日齡將制備的IBDV懸液采用滴眼、刷肛法對(duì)Ⅰ～Ⅳ組試驗(yàn)雞進(jìn)行攻毒，攻毒劑量為0.5 mL/只。攻毒后24～48 h試驗(yàn)雞均出現(xiàn)典型的IBD癥狀;攻毒后60～72 h出現(xiàn)死亡。通過(guò)對(duì)解剖死亡雞的觀察發(fā)現(xiàn)雞的胸肌、腿肌均有血斑，法氏囊和腎臟腫大，觸之堅(jiān)硬，腎臟有尿酸沉積[4]，表現(xiàn)為典型的IBD癥狀，攻毒有效率為100%。

1.2.5.3 給藥。將制得的復(fù)方中草藥制劑對(duì)已攻毒的Ⅰ～Ⅳ組肉雞逐只進(jìn)行灌服，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ灌服劑量分別為2.0、4.0、6.0 mL/只，Ⅳ組灌服劑量為8.0 mL/只;Ⅴ組為攻毒對(duì)照組，只攻毒不給藥;Ⅵ組為空白對(duì)照組，既未攻毒，也不給藥。治療試驗(yàn)從16日齡開(kāi)始，試驗(yàn)期為10 d。統(tǒng)計(jì)各組累計(jì)治愈量和治愈率。

1.2.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析。采用Excel軟件和SPSS 21.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 預(yù)防試驗(yàn)結(jié)果

由表1可知，在預(yù)防試驗(yàn)中，Ⅰ～Ⅵ組發(fā)病雞的癥狀基本一致，為典型的IBD病變，血清檢查結(jié)果呈陽(yáng)性;對(duì)照組雛雞發(fā)病率明顯高于試驗(yàn)組;Ⅵ組因未服用中草藥制劑，發(fā)病率高且病情最嚴(yán)重，試驗(yàn)期內(nèi)7只雛雞發(fā)病，發(fā)病率高達(dá)17.5%。Ⅳ組雛雞發(fā)病癥狀最輕且發(fā)病率最低，試驗(yàn)期內(nèi)僅有1只雛雞發(fā)病，發(fā)病率為2.5%，將制得的復(fù)方中草藥制劑按4.0 mL/只服用，預(yù)防效果最好，表明中草藥制劑對(duì)雛雞IBD有明顯的預(yù)防效果。

2.2 治療試驗(yàn)結(jié)果

由表2可知，隨著復(fù)方中草藥制劑用量的增加，Ⅰ～Ⅳ組病雞的治療效果愈加明顯，Ⅲ、Ⅳ組治療效果比較接近，Ⅳ組治療效果最好，治愈率達(dá)97.5%。用于治療肉雞IBD的復(fù)方中草藥制劑的最適用量為6～8 mL/只。這說(shuō)明治療效果與給藥劑量和給藥時(shí)間有關(guān)，連續(xù)服用5～7 d治愈效果最好。

3 結(jié)論

（1）黃芪、黃連、甘草、白術(shù)、板藍(lán)根制成的中草藥制劑具有清熱解毒、涼血消腫的功效。黃芪能增強(qiáng)機(jī)體免疫功能，有益于改善IBD導(dǎo)致的免疫抑制反應(yīng);黃連、板藍(lán)根能清熱燥濕，瀉火解毒，有利于消除IBD致病因子;白術(shù)能健脾益氣，燥濕利水，消除水腫，有利于緩解IBD腹瀉癥狀，促進(jìn)腎臟尿酸鹽的排出;黃芪、板藍(lán)根能抑制病毒酶活性，抑制DNA和RNA復(fù)制，從而殺滅病毒，顯著提高白細(xì)胞誘生干擾素的功能，使白細(xì)胞和多核細(xì)胞明顯增加，調(diào)節(jié)機(jī)體免疫力，促使抗體形成[5]，進(jìn)而提高肉雞抗應(yīng)激、抗病能力;甘草能補(bǔ)脾益氣，調(diào)和諸藥[6]。

（2）治療肉雞IBD的最佳中草藥組方為黃芪18.86%、黃連28.30%、甘草18.86%、白術(shù)15.09%、板藍(lán)根18.86%，對(duì)IBD病毒和病原微生物都有較強(qiáng)的抑制和殺滅作用，能控制或防治傳染性法氏囊病的傳播及細(xì)菌性繼發(fā)癥的發(fā)生，大大降低該病造成的經(jīng)濟(jì)損失[7]。

（3）利用天然中草藥預(yù)防肉雞疫病，能有效提高肉雞的

生產(chǎn)性能，改善雞肉的品質(zhì)和風(fēng)味，且不存在藥物殘留，不易產(chǎn)生耐藥性。

（4）各種中草藥的具體藥理及作用機(jī)制有待進(jìn)一步研究，這將有助于中草藥飼料添加劑的進(jìn)一步開(kāi)發(fā)和利用[8]。

（5）利用中草藥制劑防治肉雞傳染性法氏囊病，采用灌服途徑給藥，勞動(dòng)強(qiáng)度較大。若將提取液按一定的比例添加到水中，通過(guò)雞自由飲水進(jìn)行給藥，具有同樣效果。連續(xù)給藥7 d左右，即可治愈。在養(yǎng)殖過(guò)程中，應(yīng)及時(shí)做好預(yù)防和治療工作。

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