肺肉瘤樣癌高表達PD?L1、RAB1A及其臨床意義

張子涵 張中冕 李靜 胡超帆 陳天東

1鄭州大學第二附屬醫院腫瘤科（河南 450014）；2鄭州大學第一附屬醫院病理科（河南 450014）

肺肉瘤樣癌（pulmonary sarcomatoid carcinoma，PSC）是一組分化極差，含有肉瘤或肉瘤樣分化的非小細胞肺癌（NSCLCs），占所有肺癌的0.1%～0.4%［1-2］。PD?L1和PD?1是一對免疫抑制性因子，PD1/PD?L1通路的激活可使腫瘤細胞逃避機體免疫監視和殺傷，目前針對PD?1/PD?L1的免疫檢查點抑制劑在肺癌治療中顯示出了令人矚目的成就［3］。RAB1A屬于小分子三磷酸鳥苷（GTP）結合蛋白，研究發現RablA在舌癌、結直腸癌和肝癌組織中呈高表達，且能夠調控腫瘤細胞的生物學行為［4?6］，然而目前有關RablA 與肺癌的關系少見報道。由于肺肉瘤樣癌較罕見，國內外研究尚不充分［7］，對放化療不敏感，預后差，故肺肉瘤樣癌的治療已成為亟待解決的問題，結合目前以PD?1抑制劑為主［2］的免疫治療彰顯巨大的療效，欲通過免疫組化檢測PD?L1對比普通肺癌，探討肺肉瘤樣癌是否可采取免疫治療受益，同時對新興指標RAB1A做進一步探討。

1 資料與方法

1.1 一般資料選取鄭州大學第一附屬醫院病理科2012年1月1日至2016年9月1日手術切除或穿刺活檢的蠟塊標本，經3名有經驗的病理醫師確診。肺肉瘤樣癌40例，肺鱗癌18例，肺腺癌23例，以肺鱗癌和腺癌為對照組。所有標本病理確診前均未接受抗腫瘤治療，且有完整的病例資料。

1.2 檢測試劑及方法鼠抗人PD?L1單克隆抗體（17A10101）購自北京中杉金橋生物技術開發有限公司，兔抗人RAB1A單克隆抗體（11671?1?AP）購自武漢三鷹生物技術有限公司，SP免疫組化試劑盒（鼠/兔GK500511A）購自基因科技上海股份有限公司。實驗過程嚴格按說明書進行。PD?L1的判定標準為陽性細胞占比≥10%為陽性，＜10%為陰性。參照文獻［8］根據染色強度評分判定RAB1A為高表達和低表達，以陽性細胞百分比（1～100）乘以染色強度評分（0～3）得到最終分數（0～300分），以170作為截點判定RAB1A高表達和低表達。

1.3 統計學方法先行不同類型患者的PD?L1、RAB1A表達情況差異性比較分析，然后對肺肉瘤樣癌的患者進行隨訪，分析患者的預后情況及影響因素。采用SPSS 18.0軟件進行統計分析。計量資料采用表示，計量資料采用獨立樣本t檢驗；計數資料采用頻數或率的形式表示，比較采用Pearson卡方檢驗。患者預后影響因素分析采用Cox回歸進行單因素和多因素分析，采用Kaplan?Meier法繪制生存曲線。顯著性水準α=0.05。

2 結果

2.1 不同類型組織中PD?L1、RAB1A表達情況肺肉瘤樣癌組織和肺鱗癌、腺癌組織中的PD?L1陽性表達均定位于胞膜（圖1），RAB1A高表達定位于胞質（圖2）；肺肉瘤樣癌、疾病對照兩組之間PD?L1陽性率、RAB1A高表達率差異有統計學意義（P＜0.05）。見表1。

2.2 肺肉瘤樣癌患者中不同臨床特征對PD?L1、RAB1A表達影響比較不同PD?L1、RAB1A表達情況的年齡和Ki?67情況及不同性別、吸煙史、腫塊部位、分期的PD?L1、RAB1A表達情況，結果顯示差異均無統計學意義（P＞0.05）。見表2。

圖1 PD?L1陽性表達在肺肉瘤樣癌組織及疾病對照組Fig.1 Positive expression of PD?L1 in PSC and disease control group

圖2 RAB1A高表達在肺肉瘤樣癌組織及疾病對照組Fig.2 High expression of RAB1A in PSC and disease control group

表1 不同類型組織中PD?L1、RAB1A表達情況比較Tab.1 The expression of PD?L1 and RAB1A in different types of tissues 例（%）

表2 不同臨床特征對PD?L1、RAB1A表達影響Tab.2 Effect of different clinical features on PD?L1 and RAB1A expression例（%）

2.3 肺肉瘤樣癌患者預后影響因素的單因素分析不同臨床特征和PD?L1、RAB1A表達對預后的影響分析如表3所示，分析結果顯示，對于預后PFS，年齡、分期、RAB1A（P＜ 0.05）為影響預后PFS的影響因素。對于預后OS，分析結果顯示年齡、分期、PD?L1和RAB1A（P＜ 0.05）為預后OS的影響因素，見表3。

2.4 肺肉瘤樣癌患者預后影響因素的多因素分析根據單因素分析結果，將有意義的因素進一步多因素Cox回歸，分析結果顯示，對于預后PFS，年齡、RAB1A（P＜0.05）為肺肉瘤樣癌患者預后PFS的獨立影響因素，不同RAB1A表達情況的預后PFS生存曲線如圖3所示；對于預后OS，年齡和PD?L1（P＜0.05）為肺肉瘤樣癌患者OS的獨立影響因素，不同PD?L1表達情況的預后OS生存曲線如圖4所示。

表3 肺肉瘤樣癌患者預后影響因素的單因素分析Tab.3 Univariate analysis of prognostic factors in patients with pulmonary sarcomatoid carcinoma

表4 肺肉瘤樣癌患者預后影響因素的多因素分析Tab.4 Multivariate analysis of prognostic factors in patients with lung sarcomatoid carcinoma

3 討論

最近研究［11-12］表明PD?1抑制劑無論在一線、二線及以后的NSCLC治療中均顯示出了超過化療的療效。用免疫組織化學法檢測［3］高表達PD?L1的NSCLC患者，PD?1/PD?L1定向治療有較好的應答效應［9］。本研究顯示，肺肉瘤樣癌組織中PD?L1的陽性表達率（67.50%）顯著高于疾病對照（肺鱗癌、腺癌）組織（P＜0.05），這與之前法國的一項研究相符［10］。進一步多因素分析結果示，PD?L1（P=0.006）為肺肉瘤樣癌患者OS的獨立影響因素，這表明PD?L1的表達是肺肉瘤樣癌預后不良的預測指標。Poplar研究提示在晚期NSCLC患者中，隨著PD?L1表達水平的升高，使用Nivolumab治療的客觀緩解率、無進展生存期和總生存期也顯著提高［13］；目前關于肺肉瘤樣癌患者使用PD?1抑制劑療效的研究較少，本研究對比肺鱗癌、腺癌，提示肺肉瘤樣癌中高表達PD?L1，結合Poplar研究，提示或許肺肉瘤樣癌使用PD?1抑制劑獲益更大，這為肺肉瘤樣癌［4］的治療提供了新的思路，但缺乏具體直接實驗數據支持，仍需大樣本前瞻性研究進一步證實。

圖3 不同RAB1A表達情況的無進展生存曲線Fig.3 Progression?free survival curves for different RAB1A expression

圖4 不同PD?L1表達情況的總生存曲線Fig.4 Overall survival curves for different PD?L1 expression

RAB1A是GTPases的Ras超家族成員之一，能調控腫瘤細胞的生物學行為［4］。本研究顯示，RAB1A在肺肉瘤樣癌的高表達（70.00%）高于疾病對照組（P＜0.05）。而WANG等［8］的一項研究提示RAB1A的表達與肺癌組織學類型無關，與本研究結果不同，考慮WANG等的研究未納入肺肉瘤樣癌做對比，也可能受腫瘤異質性、樣本量差異等因素影響。本研究首次在肺肉瘤樣癌中研究RAB1A的表達，進一步多因素分析結果示，RAB1A（P=0.016）為肺肉瘤樣癌患者預后PFS的獨立影響因素，這表明RAB1A的高表達是肺肉瘤樣癌預后不良的預測指標。既往研究提示在結腸癌［5］、肝癌、三陰性乳腺癌中高表達的RAB1A可特異性地激活mTORC1，通過活化mTOR通路促進腫瘤的增殖、侵襲和進展，表明Rab1A可能是個性化治療的一個有價值的治療目標［14-15］。但RAB1A作用于肺癌發生發展的機制目前仍不明確，仍需要更進一步的深入研究。

綜上所述，肺肉瘤樣癌中高表達PD?L1、RAB1A作為影響肺肉瘤樣癌患者生存的獨立影響因素，均可促進腫瘤進展，二者的表達在肺肉瘤樣癌的預后預測方面具有重要意義，或許提示肺肉瘤樣癌患者是免疫治療的潛在受益人群。

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