阿司匹林淀粉微球在兔體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)研究

吳 靜

(河南焦作婦幼保健院藥劑科 焦作 454000)

鼻腔給藥是粘膜吸收途徑，給藥比較簡(jiǎn)單方便，能對(duì)首過(guò)作用進(jìn)行有效防止，讓生物利用度有效提高，進(jìn)而讓給藥劑量減少，讓不良反應(yīng)發(fā)生率降低[1]。淀粉微球是一種鼻腔給藥系統(tǒng)，能讓藥物在鼻腔腫的吸收增加。本研究主要分析了探討阿司匹林淀粉微球在兔體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)，進(jìn)而來(lái)淀粉微球作為鼻腔給藥系統(tǒng)的作用和價(jià)值進(jìn)行評(píng)價(jià)，具體如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

(1)動(dòng)物：選擇由武漢大學(xué)醫(yī)學(xué)部動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心所提供的日本長(zhǎng)耳大白兔10只。

(2)試劑：選擇由武漢大學(xué)醫(yī)學(xué)部第一臨床學(xué)院藥學(xué)系所制備的淀粉微球；阿司匹林原料；阿司匹林溶液、阿司匹林腸溶片；中國(guó)藥品生物制品檢定所提供的水楊酸對(duì)照；色譜純選擇甲醇，其他試劑則是分析純。

(3)儀器：選擇Beckman公司所生產(chǎn)的338-HPLC，包括427積分儀、406控制器、166UV檢測(cè)器和110B雙泵；由瑞士梅特勒公司所生產(chǎn)的AG245電子天平；日本奧林巴斯光學(xué)工業(yè)株式會(huì)社生產(chǎn)的光學(xué)顯微鏡；日本KYOWA公司生產(chǎn)的RLM-50冷凍干燥機(jī)；江蘇姜堰市興康儀器廠生產(chǎn)的XK96-A快速混勻器；上海醫(yī)用分析儀器廠生產(chǎn)的TGL-16高速離心機(jī)。

1.2 方法

(1)選擇吸附法來(lái)對(duì)阿司匹林淀粉微球進(jìn)行制備：選擇100mg空白淀粉微球，將其溶于5ml濃度為2%的三乙醇胺水溶液中，將18mg阿司匹林加入其中，進(jìn)行2h的緩慢振蕩，讓阿司匹林能吸附在微球上，對(duì)微球進(jìn)行離心分離；選擇蒸餾水將微球表面的殘留藥液洗干凈，之后進(jìn)行冷凍干燥處理，最后獲得載藥微球。

(2)測(cè)量阿司匹林淀粉微球的粒徑：在生理鹽水中加入濃度為1%的聚山梨酯80，然后將微球分散在其中，混勻后將其滴在載玻片上，選擇具有標(biāo)尺的顯微鏡，在高倍鏡下對(duì)微球球徑進(jìn)行觀察統(tǒng)計(jì)；計(jì)算得到其平均粒徑為(50±6)μm，粒徑分布范圍為33～87μm，主要處于38～57μm之間，滿足鼻腔給藥的實(shí)際要求。對(duì)吸水膨脹微球和干燥微球粒徑進(jìn)行比較，根據(jù)相關(guān)公式來(lái)對(duì)微球吸水膨脹率進(jìn)行計(jì)算，本次計(jì)算公式按照E=(d2-d1)/d1×100%展開(kāi)計(jì)算，求得測(cè)量的微球吸水膨脹率是86.01 %。

(3)選擇10只健康家兔，雄性、雌性各5只，平均體重為(2.68±0.18)kg。按照數(shù)字隨機(jī)方法將10只家兔分成兩組，實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組均為5只。對(duì)照組家兔選擇口服給藥：給藥前應(yīng)進(jìn)行12h禁食，給予腸溶片25mg；實(shí)驗(yàn)組家兔則選擇鼻腔給藥：把阿司匹林淀粉微球經(jīng)過(guò)9號(hào)篩，選擇注射器并配合相應(yīng)的軟管，經(jīng)鼻腔給藥，給藥劑量為5mg/kg。分別在給藥10min、30min、1h、1.5h、2h、3h、4h、6h、8h和10h進(jìn)行采血，對(duì)血液標(biāo)本進(jìn)行離心處理，對(duì)血漿進(jìn)行處理，然后放置在-20℃ 冰箱中進(jìn)行保存?zhèn)溆谩＿x擇反向高效液相色譜法來(lái)對(duì)家兔的血漿水楊酸濃度進(jìn)行測(cè)定，同時(shí)選擇3P87軟件進(jìn)行處理。

(4)測(cè)定血漿中的水楊酸：首先準(zhǔn)確量取血漿樣品0.5ml放置于5ml A具塞離心管中，滴加0.5ml 氫氧化鈉溶液(0.1mol/L)，震蕩，水浴(37℃恒溫)水解5h。取出至室溫后，加入100um磷酸(67 %)，搖勻后加入2.5ml乙酸乙酯，旋渦震蕩10min后離心(3000 r/min)5min。取有機(jī)層0.2ml放置于5ml B管中，水浴(40℃)揮發(fā)氮?dú)狻堅(jiān)儆?0um流動(dòng)相進(jìn)行溶解后，置于旋渦振蕩器混合1min，離心(3000r/min)5min。去上層清液20um進(jìn)行色譜分離測(cè)得，記錄色譜圖，量取水楊酸具體面積。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

將數(shù)據(jù)納入SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件中進(jìn)行分析，計(jì)數(shù)資料比較采用χ2比較，以率(%)表示，若P<0.05則差異顯著，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 色譜圖分析

分析空白血漿和含藥色譜圖發(fā)現(xiàn)，血漿和水楊酸的分離狀況比較理想，保留時(shí)間為11.5min，血漿雜質(zhì)并沒(méi)有影響水楊酸的測(cè)定結(jié)果。

2.2 血藥濃度測(cè)定結(jié)果分析

選擇3P87藥動(dòng)學(xué)程序來(lái)處理經(jīng)時(shí)血藥濃度，滿足一室開(kāi)放模型，對(duì)藥動(dòng)力學(xué)參數(shù)進(jìn)行計(jì)算。鼻腔微球給藥的Tlag、T1/2Ke、Tmax與口服片劑存在顯著差異，P<0.05具備統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，見(jiàn)表1。和口服給藥相比，鼻腔給藥的吸收半衰期更長(zhǎng)，具有較高的相對(duì)生物利用度。

表1 兩種用藥方式下各指標(biāo)對(duì)比

用藥方式Tlag(min)T1/2Ke(min)T1/2Ke(min)Tmax(min)鼻腔微球給藥3．3±1．154．2±4．3147．2±9．5124．8±4．2口服片劑7．8±3．240．2±5．292．4±10．390．0±6．7t13．51415．05423．58427．842P0．0000．0000．0000．000

3 討論

鼻腔給藥系統(tǒng)(NDDS)主要是指在鼻腔內(nèi)通過(guò)鼻粘膜吸收從而發(fā)揮局部治療、全身治療、預(yù)防作用的一類制劑，通常這類制劑用來(lái)治療鼻腔疾病，常見(jiàn)的有感冒、鼻炎等。隨著科技的發(fā)展，鼻腔給藥現(xiàn)在已經(jīng)能夠透過(guò)血腦屏障，用于治療腦部疾病、靶向給藥等方式。鼻腔是被鼻中隔分為左鼻腔和右鼻腔，每個(gè)鼻腔又分為鼻前庭和固有鼻腔，有3個(gè)區(qū)域，分別是：鼻前庭、呼吸區(qū)域、嗅覺(jué)區(qū)。鼻前庭沒(méi)有吸收功能；嗅覺(jué)區(qū)處于上鼻甲，藥物作用后可從此處進(jìn)入腦脊液從而達(dá)到對(duì)中樞神經(jīng)的調(diào)節(jié)作用；呼吸區(qū)占據(jù)了鼻腔最大的部分，黏膜含有毛細(xì)血管，藥物可以從此處進(jìn)入人體循環(huán)系統(tǒng)。當(dāng)前鼻腔給藥有以下優(yōu)勢(shì)：生物利用度很高；無(wú)肝臟首過(guò)效應(yīng)，適合胃腸液與胃腸壁中進(jìn)行代謝的藥物以及首過(guò)效應(yīng)較大的藥物；吸收迅速，起效快；使用起來(lái)非常方便，易于被老人、嬰幼兒接受。

在現(xiàn)代醫(yī)學(xué)技術(shù)快速發(fā)展的過(guò)程中，人們也開(kāi)始更加關(guān)注和重視鼻腔給藥。選擇鼻腔給藥方式能讓藥物對(duì)胃腸道的刺激有效減少，同時(shí)還能有效防止腸道對(duì)藥物的首過(guò)作用；鼻腔黏膜面對(duì)藥物的代謝作用較差，具有較高的通透性[2]。另外部分藥物需要肌肉或者靜脈給藥，而應(yīng)用鼻腔給藥則能讓用藥便利性增加；鼻腔黏膜具有較大的吸收面積，鼻粘膜上皮下層的淋巴毛細(xì)管和毛細(xì)血管非常豐富，讓藥物能及時(shí)進(jìn)入到體循環(huán)，進(jìn)而讓藥物的生物利用度提高[3～5]。當(dāng)前主要有心血管類、甾體激素類、大分子多肽類和抗生素等藥物能夠經(jīng)過(guò)鼻腔直接給藥。根據(jù)鼻腔給藥要求，藥物阿司匹林微球在膨脹后粒徑范圍大約為30～90um之間，其中大多數(shù)微球在40～60um之間，其平均值為49 um，這些粒徑范圍符合鼻腔給藥要求規(guī)定，可以進(jìn)行給藥治療。

和口服給藥相比，阿司匹林微球鼻腔給藥的Tmax更長(zhǎng)，主要是微球能讓藥物滯留在鼻粘膜的時(shí)間延長(zhǎng)，進(jìn)而讓藥物吸收過(guò)程延長(zhǎng)[6～8]。除此之外，鼻腔內(nèi)的水分有限，不能完全膨脹微球，所以微球滯留在鼻腔黏膜上時(shí)，就能對(duì)阿司匹林進(jìn)行緩慢、持續(xù)地釋放，鼻粘膜不斷吸收藥物，讓血壓濃度的持續(xù)時(shí)間有效延長(zhǎng)，最終讓藥物作用時(shí)間延長(zhǎng)，讓生物利用度提高。本次研究中鼻腔微球給藥的Tlag小于口服片劑；T1/2Ka、T1/2Ke、Tmax、F均大于口服片劑，所以可以看出鼻腔給藥的吸收半衰期更長(zhǎng)，具有較高的相對(duì)生物利用度。

總之，鼻腔微球給藥，能讓藥物吸收有效提高，和口服給藥相比，臨床療效更加顯著。本研究結(jié)果能為阿司匹林的鼻腔給藥提供有效證據(jù)，同時(shí)也能為淀粉微球作為鼻腔給藥系統(tǒng)的新劑型提供科學(xué)證據(jù)。

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