茶樹菇ASW05菌種生物學特性的研究

吳亞召 ，杜芳 ，2，張文雋 ，雷萍

（1.陜西省微生物研究所，陜西西安 710043；2.農業生物技術國家重點實驗室，中國農業大學生物學院，北京 100193）

茶樹菇（Agrocybe aegerita）隸屬擔子菌亞門（Basidiomycotina）、層菌綱 （Hymenomycetes）、傘菌目（Agaricales）、 糞 銹 傘 科 （Bolbitiaceae）、 田 頭 菇 屬（Agrocybe），又名茶薪菇、油茶菇[1]。春秋季野生于楊樹、油茶等闊葉樹的枯死或枯干部分。其肉質脆嫩，味道鮮美香濃，口感佳，營養價值極高[2,3]。干菇的蛋白質含量為27.5%，總糖為54.4%，含人體所需的18種氨基酸，尤其是人體不能合成的8種氨基酸，還含有豐富的B族維生素和多種礦物質元素與抗癌多糖。長期食用具有補腎、潤肺、醒腦、抗衰老和降低膽固醇等功能，是一種營養價值、藥用價值較高的珍稀食用菌[4,5]。本文對陜西省微生物研究所采集分離的茶樹菇ASW05菌種的生物學特性進行了系統的研究，為該菌種的人工栽培與加工提供依據。

1 材料與方法

1.1 供試菌株

茶樹菇ASW05菌種來自于陜西省微生物研究所微生物資源中心第三研究室。

1.2 培養基

1.2.1 母種培養基

采用綜合PDA培養基。

1.2.2 碳源測定基礎培養基

蛋白胨0.5%、KH2PO40.1%、MgSO40.05%、維生素B110mg/L、瓊脂2%，pH自然。用蒸餾水配制。

1.2.3 氮源測定基礎培養基

葡萄糖2%、KH2PO40.1%、MgSO40.05%、維生素B110mg/L、瓊脂2%，pH自然。用蒸餾水配制。

1.2.4 栽培料培養基

蘋果木屑30%、棉籽殼57%、麩皮12%、白砂糖1%、石灰1%。

1.3 方法

1.3.1 溫度對菌絲生長的影響

以綜合PDA培養基為基礎培養基，在5～35℃范圍內設7個處理，接入茶樹菇ASW05菌種后，培養7d，以平板培養基上菌落直徑為菌絲生長量的指標。試驗重復5次，取其菌落直徑的平均值，比較菌絲生長情況，選擇出菌絲最適生長溫度。

1.3.2 pH值對菌絲生長的影響

以綜合PDA培養基為基礎培養基，用0.1mol/LHCl或0.1mol/LNaOH將培養基分別調節到7個不同pH值，接入茶樹菇ASW05菌種后，于25℃下恒溫培養7d，以平板培養基上菌落直徑作為菌絲生長量的指標。試驗重復5次，取其菌落直徑的平均值，比較菌絲生長情況，選擇菌絲最適pH值。

1.3.3 培養基含水量對菌絲生長的影響

取烘干的栽培料（原料均在60℃下烘干至恒重），分別按培養基含水量 50%、55%、60%、65%、70%、75%配料，裝入12cm×22cm耐高溫聚乙烯塑料袋。每袋裝入培養基干料150g，每組由10個菌袋組成，將茶樹菇ASW05菌種接入制備好的菌袋中，于25℃下恒溫培養，進行菌絲生長情況測定。試驗重復5次，以菌絲在10個菌袋中平均生長速度作為菌絲生長量指標，選擇菌絲最適培養基含水量。

1.3.4 碳源對菌絲生長的影響

碳源測定基礎培養基7份，分別添加2%葡萄糖、2%玉米粉、2%淀粉、2%蔗糖、2%甘露糖、2%麥芽糖、2%乳糖。每個培養皿內分別加入20mL培養基，每組由5個平板組成，將茶樹菇ASW05菌種接入制備好的平板中，于25℃下恒溫培養7d，以平板培養基上菌落直徑作為菌絲生長量的指標。試驗重復5次，取其菌落直徑的平均值，比較菌絲生長情況，選擇菌絲的最適碳源。

1.3.5 氮源對菌絲生長的影響

碳源測定基礎培養基6份，分別添加0.5%蛋白胨、0.5%酵母粉、0.5%牛肉膏、0.5%麩皮、0.5%NH4NO3、0.5%(NH4)2SO4。每個培養皿內分別加入20mL培養基，每組由5個平板組成，將茶樹菇ASW05菌種接入制備好的平板中，于25℃下恒溫培養7d，以平板培養基上菌落直徑作為菌絲生長量的指標。試驗重復5次，取其菌落直徑的平均值，比較菌絲生長情況，選擇菌絲的最適氮源。

2 結果與分析

2.1 不同溫度對茶樹菇ASW05菌絲生長的影響

表1顯示了不同溫度對茶樹菇ASW05菌絲生長的影響。從表1中的數據可以看出，茶樹菇ASW05菌絲體的生長速度對溫度變化比較敏感，菌絲生長速度隨著溫度的升高而加快，在25℃時達到最大，然后又逐漸降低；溫度為25℃時，菌落直徑最大，為6.26cm；30℃時，菌落直徑次之，為6.24cm，兩者之間差異不顯著，但與其他試驗組數據成極顯著差異。溫度為5℃時，菌落直徑最小，為0cm。因此，茶樹菇ASW05菌絲在10～35℃下均能生長，適宜生長溫度為25～30℃，在5℃下基本不生長，在25℃生長速度最快。

表1 不同溫度對茶樹菇ASW05菌絲生長的影響Table 1 Effects of different temperature on the growth of mycelia of Agrocybe aegiritASW05

2.2 不同pH值對茶樹菇ASW05菌絲生長的影響

表2 不同pH值對茶樹菇ASW05菌絲生長的影響Table 2 Effect of pH value on the growth of mycelia of Agrocybe aegiritASW05

茶樹菇ASW05菌絲體在不同的pH值下生長情況試驗結果如表2所示。從表2中的數據可以看出，隨著pH值的升高，茶樹菇ASW05菌落直徑先增大后減少，當pH值為6.5時，達到最大，為6.40cm，與其他試驗組呈現極顯著差異；當pH值為6.0時，菌落直徑次之，為6.28cm，與其他試驗組也呈現極顯著差異；當pH為4.0時，菌落直徑最小，為0cm。菌絲體在pH值5.0～7.0內均能生長，適宜生長的pH值范圍為6.0～6.5，在pH為4時基本不生長。

2.3 培養基不同含水量對茶樹菇ASW05菌絲生長的影響

茶樹菇ASW05菌絲體在不同含水量條件下生長情況試驗結果見表3，以菌絲滿袋時間作為測定指標。

表3 不同含水量對茶樹菇ASW05菌絲生長的影響Table 3 Effect of different water content on the growth of mycelia of Agrocybe aegirit ASW05

從表3中的數據可以看出，茶樹菇ASW05菌絲體生長的含水量范圍為55%～75%，含水量為50%時幾乎不生長。適宜的含水量為60%～65%，在含水量65%時菌絲的生長速度最快，為25d，與其他試驗組呈現極顯著差異。

2.4 不同碳源對茶樹菇ASW05菌絲生長的影響

表4 不同碳源對茶樹菇ASW05菌絲生長的影響Table 4 Effect of different carbon sources on the growth of mycelia of Agrocybe aegirit ASW05

在不同的碳源培養基條件下茶樹菇ASW05菌絲體生長情況試驗結果如表4所示。從表4中的數據可以看出，茶樹菇ASW05菌絲體在供試的6種碳源上均能生長，生長最慢的是乳糖，為1.20cm；而生長最快的是葡萄糖和玉米粉，分別為6.36cm、6.34cm，兩組菌落直徑與其他試驗組的呈現極顯著差異；且菌絲濃密健壯，生長勢旺盛。其次是白砂糖，為5.62cm，與其他試驗組的呈現極顯著差異。因此，茶樹菇ASW05菌絲體生長的最適碳源是葡萄糖和玉米粉。

2.5 不同氮源對茶樹菇ASW05菌絲生長的影響

表5 不同氮源對茶樹菇ASW05菌絲生長的影響Table 5 Effect of different nitrogen sources on the growth of mycelia of Agrocybe aegirit ASW05

茶樹菇ASW05菌絲體在不同氮源培養基生長情況試驗結果如表5所示。從表5中的數據可以看出，茶樹菇ASW05菌絲體在以蛋白胨為氮源的培養基上菌絲生長最快，菌落直徑為6.21cm，與其他試驗組的呈現極顯著差異；其次是酵母粉和牛肉膏，且菌絲濃密，生長勢旺盛。因此，茶樹菇ASW05菌絲體生長的最適氮源是蛋白胨。

3 小結

本研究結果表明，茶樹菇ASW05菌絲生長的溫度范圍為10～35℃，以25℃最適；在pH4.5～7.0范圍內均能生長，以6.5最適；培養基含水量55%～75%時菌絲均能生長，最適含水量為60%～65%；最適碳源是葡萄糖和玉米粉，最適氮源是蛋白胨。本項研究的數據為茶樹菇ASW05菌種生產和栽培工藝的確定提供了科學的依據。在對茶樹菇ASW05的營養條件進行探索時發現，在缺少碳、氮源時，菌絲的生長情況較差，尤其是缺少氮源時菌絲不萌發，碳源乳糖對茶樹菇ASW05菌絲有抑制作用。

參考文獻：

[1] 黃年來.中國食用菌百科[M].北京:中國農業出版社,1993.

[2] 卯曉嵐.中國大型真菌[M].鄭州:河南科學技術出版社,2000.

[3] 王麗英,王文治.茶樹菇對不同碳氮營養源的利用[J].天津農業科技,2006,12(1):50-51.

[4] 鄭毅,余望,施巧琴,等.茶薪菇人工栽培及營養成分分析[J].中國食用菌,1999,18(5):13-14.

[5] 陳躬國,林原,鄭英姿,等.茶樹菇周年生長栽培技術[J].中國食用菌,2012,31(3):56-57.