金標法與酶聯免疫法在抗-HIV測定中的應用

于福榮

（遼陽市第五人民醫院檢驗科，遼寧 遼陽 111000）

艾滋病作為一種綜合征，主要是因為機體感染人類免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus，HIV）后引發的免疫缺陷，進而導致相關感染，甚至會引發死亡[1]。現階段，全球有大于二百多個國家與地區已經有艾滋病的報道，此病已經成為世界性的醫學難題與政治性問題[2]。因為艾滋病的廣泛流行性與病情的嚴重性，致使患病后的病死率比較高。所以，倘若可及時、有效的診斷艾滋病，對攜帶HIV患者及時篩選，針對艾滋病的轉播和發展具有控制效果[3]。為了探究在抗-HIV測定中采用金標法與酶聯免疫法的應用效果，本研究選取于本院2014年4月至2016年10月收治的980例患者，選取患者的血液樣本都在其空腹的狀態才采集5 mL的血液樣本，采血過程中都嚴格按照無菌標準實施操作，分別采用金標法與酶聯免疫法予以檢測，并對不同方法的檢測結果予以分析，報道如下。

表1 分析不同檢測方法對血樣抗-HIV的檢測結果

1 資料與方法

1.1 一般資料：納入于本院2014年4月至2016年10月收治的980例患者，其中有男性患者710例，所占比例72.45%，女性患者270例，所占比例27.55%，最小年齡20歲，最大年齡54歲，平均年齡（32.45±18.12）歲。選取患者的血液樣本都在其空腹的狀態才采集5 mL的血液樣本，血樣檢測前全部血樣都沒有被污染，也未出現溶血情況；采血過程中都嚴格按照無菌標準實施操作。

1.2 方法

1.2.1 金標法：利用金標法試劑加入25 μL血清后再加入緩沖液一滴，放置20 min，利用肉眼觀察，倘若試紙上產生兩條紅線，可把此次血樣檢測確定是陽性，如果產生一條紅線，則把此次血樣檢測確定是陰性，并對產生紅線時間準確記錄。

1.2.2 酶聯免疫法：采用酶聯免疫試劑與配套儀器，根據說明書標準開展操作，檢測結果采用酶標儀予以判定，檢測標準a值：檢測波長與參考波長分別為450 nm、630 nm，在a值超過1時，表示血樣檢測為陽性，反之，a值＜1時，表示血樣檢測為陰性。

不同檢測方法中初次檢驗確定為陽性的血樣，需要再次檢查，實施確認試驗，把確認試驗確定是陽性血樣送到疾病控制中心實施免疫印跡檢測；酶聯免疫對血樣檢測的過程中，所有試驗儀器與操作過程等都需要根據相關標準實施操作，且由相同的檢測人員在相同檢測室內對所有血樣進行檢測。

1.3 統計學分析：通過SPSS19.0軟件分析計數資料，其用百分率%表示，檢查選擇χ2，P＜0.05，為有統計學意義。

2 結 果

見表1。金標法與酶聯免疫法確診血樣陽性率分別為1.12%、0.31%，免疫印跡確診陽性例數為10例，全部血樣中的陽性血樣所占比例為1.02%（10/980），金標法的假陽性率為0.10%（1/980）、0.71%（7/980），兩種檢測方法假陽性率的對比差異有統計學意義（χ2=4.5184，P＜0.05）。

3 討 論

艾滋病主要是因為感染HIV導致的一種嚴重的傳染病，癥狀表現為持續發熱與盜汗等，在中青年人群中十分常見，主要傳播途徑為性接觸、血液以及母嬰[4]。因此，對潛伏于人體的艾滋病毒及時檢測，對于艾滋病的傳播與發展的控制具有積極影響[5]。目前，臨床對艾滋病常用的診斷方法為抗體檢測。在人體感染HIV時，機體會快速出現免疫反應與抵抗性抗體，這些抗體對病毒的入侵、寄生蟲的入侵以及病原體的入侵等具有控制效果[6]。

金標法是一種較為先進的體外診斷手段，其具有較高的靈敏性與特異性，操作簡便、快捷，檢測準確率較高[7]。其只根據特制的檢驗盒于較短時間內就可以獲得檢測結果，主要操作步驟為抽血以后滴在試紙上，放置20 min后對此試紙是否有顏色變化予以認真觀察，倘若存在顏色變化，初步檢測為陽性。此種檢測方法在醫院或多數患者均較適用，具有操作方便、快捷的特點，檢測結果快速、準確。酶聯法就是按照酶免疫測定原理改良的新型技術，其主要分為雙抗原夾心法、間接法以及抗體競爭法三類[8]。現階段，國內與國外通常采用第3代雙抗原夾心法試劑。主要檢測流程為：將加入酶反應的底物后，底物受到酶催化轉變為有色產物，產物和標本中受檢物質的量具有密切聯系，因此，可以按照顏色反應深淺予以刊物定性或定量分析。因為酶催化頻率相對較高，因此，可使反應效果顯著放大，進而促使檢測方法的敏感度明顯提高[9]。

本研究選取患者的血液樣本都在其空腹的狀態才采集5 mL的血液樣本，采血過程中都嚴格按照無菌標準實施操作，分別采用金標法與酶聯免疫法予以檢測，并對不同方法的檢測結果予以分析，結果顯示：金標法與酶聯免疫法確診血樣陽性率分別為1.12%、0.31%，免疫印跡確診陽性例數為10例，全部血樣中的陽性血樣所占比例為1.02%，金標法的假陽性率為0.10%、0.71%，兩種檢測方法假陽性率的對比差異有統計學意義（χ2=4.5184，P＜0.05），說明金標法應用于HIV抗體檢測具有較高的靈敏度，酶聯免疫法的特異度較高。不同血液中的HIV抗體檢測手段，在檢測原理至操作過程中存在一定的不同，金標法的反應速度較快，不需要采用特殊的儀器與花費大量時間獲得檢測結果。針對病情緊急者，倘若利用酶聯免疫法檢測血液，會對患者的病情造成延誤，倘若在檢測血液前沒有確診，且在臨床主治醫師不知情的情況下，手術治療會使艾滋病的傳播風險明顯增加，因此，利用金標法能夠將急診中遇到的此種情況有效解決，使治療醫師對患者的病情充分掌握。但是酶聯免疫對艾滋病患者的監測精準度高于金標法，誤差比較小，雖然操作相對較復雜，在非緊急情況下比較適用[10]。

總而言之，金標法與酶聯免疫法在抗-HIV測定中都有一定效果，因此在具體檢測過程中，應該按照實際情況合理的選擇檢測方法。

[1] 宋麗娟,侯志敏,張巧云.用于無償獻血初篩的最佳HBsAg/TP聯合檢測金標試紙條的篩選及意義[J].寧夏醫學雜志,2017,39(6):532-534.

[2] 陳娜云,姚仁南,馬繼慧.核酸擴增及微流芯片法檢測HCV-Ab臨界值附近標本的結果探討[J].中華全科醫學,2016,14(4):639-642.

[3] 張克傳.金標法、間接血凝法與酶聯免疫法檢測弓形蟲IgG抗體的對比研究[J].中國社區醫師,2017,33(1):5-5.

[4] 何英愛,姚葉林.ELISA法和GIGA法測定乙型肝炎病毒血清標志物的比較研究[J].中國當代醫藥,2017,24(9):135-137.

[5] 孟憲婷.酶聯免疫法篩查HIV抗體的艾滋病診斷研究[J].大家健康旬刊,2017,11(1):53-53.

[6] 陸衛英.金標法與酶聯免疫法測定抗-HIV的效果研究[J].醫學美學美容旬刊,2015,24(6):711-711.

[7] 魏學鋒.酶聯免疫吸附法檢測乙型肝炎病毒表面抗原假陽性的影響因素分析[J].中國醫藥指南,2016,14(23):113-114.

[8] 李紅.金標法與酶聯免疫法測定抗-HIV的效果分析[J].中國冶金工業醫學雜志,2017,34(4):487-488.

[9] 陳同慶.36854例普通住院患者梅毒血清學抗體陽性率及其分布狀況調查[J].標記免疫分析與臨床,2015,22(4):306-309.

[10] 邢朝富,劉艷芳,朱小進.血漿D-二聚體在上消化道出血中的研究分析[J].中國醫藥指南,2016,14(3):136-137.