關于細菌培養法和PCR檢測法在淋病奈瑟菌檢測中的效果

陸 波

（遼寧省鐵嶺市中心醫院檢驗科，遼寧 鐵嶺112000）

淋病是臨床治療中一種常見性傳播疾病，淋病奈瑟菌（NG）也可稱為淋球菌，其為淋病的一種病原體，可導致生殖道發生感染，引發淋菌性宮頸炎、淋菌性尿道炎等，逆行感染還可引發前列腺炎、膀胱炎等，可導致患者不孕不育[1]。目前，臨床上應用于NG檢測的方法表現出多樣化，當各種方法應用效果存在差異性，探討NG有效檢測方式具有重要臨床意義。本次研究主要對比分析PCR檢測法、細菌培養法在NG檢測中的應用效果，報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料：隨機選取88例于2015年2月至2016年5月期間在我院接受診治的疑似淋病患者作為對象。患者性別：男性為49例，女性為39例；年齡：最小為22歲，最大為60歲，平均（28.7±2.7）歲。

1.2 方法：①生殖道分泌物采集：患者為男性時，使用棉拭子放置于患者尿道1～3 cm位置，輕輕將棉拭子轉幾周，將生殖道分泌物或者前列腺液蘸取，然后取出棉拭子，放入無菌試管內，立即將試管送至檢驗科進行NG檢測。患者為女性時，使用棉拭子收集患者宮頸黏液和陰道分泌物，將棉拭子放入無菌試管中后立即送至檢驗科進行NG檢測。②NG檢測：應用細菌培養法實施NG檢測時，標本以及標準對照菌株接種至溫度為37 ℃孵箱中的T-M培養基上實施菌株培養、培養時間為24～48 h，然后對細菌的生長情況進行觀察。培養完成之后使用半自動細菌鑒定儀對標本菌株實施鑒定。鑒定方法及操作均嚴格按照說明進行，可疑的菌落需實施生化鑒定。應用PCR檢測法實施NG檢測時，所選用的實驗試劑為潮州凱普生物化學有限公司提供的pcr+膜雜交法，相關操作均嚴格按照試劑說明書實施。利用聚合酶鏈反應對采集到的標本中的少量DNA片段實施擴增操作，完成擴增，得到獲得較長DNA片段之后，應用凝膠電泳法實施檢測，對色帶的變化情況進行仔細觀察，對檢測所得結果進行判定。檢測過程中，工作人員嚴格按照PCR檢測法具體操作要求實施病菌檢測。

1.3 觀察內容及效果評價：計算患者NG的陽性檢出率，并通過對比檢出率對不同檢測方式的應用效果進行評價。

1.4 統計學方法：研究數據的統計學分析均使用SPSS20.0統計軟件包進行。計數資料以百分率表示，行χ2檢驗，計量資料以（±s）表示，行t檢驗。差異對比有統計學意義均以P＜0.05表示。

2 結 果

88例患者接受細菌培養法對淋病奈瑟菌進行檢測后，有39例患者的檢測結果表現為陽性。接受PCR檢測法對淋病奈瑟菌進行檢測后，共有67例檢測結果呈陽性。在陽性檢出率比較上，PCR檢測法明顯高于細菌培養法，差異對比存在顯著性（P＜0.05），見表1。

表1 2種檢測方法陽性檢出情況

3 討 論

淋病為一種常見性傳播疾病，對患者身心健康均造成嚴重影響。淋病奈瑟菌為淋病的病原體。淋病奈瑟菌通常均是寄存在患者生殖及泌尿系統中[2]。在機體免疫力處于較差狀態時，病菌便會直接侵入患者血流，在經過血液循環使得循環機體部位出現化膿性炎癥。在全球范圍內，淋病均為一種流行極為廣泛的性病，表現出極強的傳染性，其臨床主要表現為發病急促。目前，在淋病的臨床診斷過程中主要選用實驗室檢查方法進行診斷鑒別。諸多醫療機構在婚檢、淋病初診過程中均應用分泌物直接涂片方式進行診斷[3]。但是該種方法誤診、漏診率較高，陽性檢出率相對降低。因此，須加強對淋病奈瑟菌有效檢測方法進行深入研究，為淋病早期診斷準確率的提高提供更多可靠參考依據。

細菌培養法為臨床菌落檢測過程中應用較為普遍的一種方法，其也是世界衛生組織推薦使用的檢測淋病奈瑟菌的一種標準檢測法。但是諸多應用結果均表明，該種方法在檢測淋病奈瑟菌的實際應用過出中還存在一定局限性，應用細菌培養法實施檢測時，檢測結果極易受到多種因素影響，陽性檢出率相對較低。影響檢測結果的因素主要為菌株存活環境、檢測者的操作技術、檢測操作時間、所用試劑質量、患者在接受檢測前使用過抗生素等。因此，細菌培養法應用于淋病奈瑟菌檢測時，存在諸多限制。

PCR檢測法又可稱為聚合酶鏈反應檢測法，其為通過體外酶合成特異性DNA片段的方式來實現對目的DNA片段進行檢測的一種方法。諸多實際應用結果顯示，在淋病奈瑟菌檢測中應用PCR檢測法具有針對性強、靈敏度高、特異性強、操作簡單、檢測快捷等特點[4]。該種檢測方法與細菌培養法相互比較，其對檢測采集過程、保存環境的要求相對較低，同時，在細菌已死亡的情況下也能夠進行有效檢測。此外，以為該種檢測方法在實際應用過程中，其是在菌株基因級別上實施檢測的，因此，其能夠有效克服檢測標本過少問題。在本次研究中，分別應用PCR檢測法和細菌培養法對88份標本進行檢測后，檢測結果顯示，PCR檢測法的陽性檢出率明顯高于細菌培養法，差異對比存在顯著性，有統計學意義。謝國勇[5]等研究結果顯示，于其他檢測方法比較，將PCR檢測法應用于淋病奈瑟菌檢測具有更強的特異性，靈敏度更高，可有效降低漏診率，對臨床診斷準確率的提高具有重要意義。有研究者認為，當淋病患者處于急性期時，其膿性的分泌物會明顯增多，癥狀表現得更為明顯。在這種情況下，應該先實施Gram染色，且在2 h之內將結果匯報給臨床。若是能夠找到NG，而且其數量較多時，應該同時實施細菌分離試驗、藥敏試驗，在24 h內讀取藥敏結果，在使用系統實施細菌鑒定。通過這樣的方式能夠有效提高早期診斷準確率，使患者能夠盡早接受針對性治療，減少患者治療費用，降低患者經濟負擔。綜上所述，細菌培養法、PCR檢測法均為檢測的淋病奈瑟菌的有效方式，但PCR檢測法的陽性檢出率更高，特異性更強，應用效果更為顯著。

[1] 趙燦.細菌培養法聯合檢測流行性腦膜炎奈瑟氏菌的臨床研究[J].系統醫學,2016,1(1):397-398.

[2] 馬萍,聶慶東,殷敏.3種方法檢測淋病奈瑟菌的比較分析及意義[J].中國醫藥科學,2012,2(9):508-509.

[3] 趙曉蘭,馮琳.四種方法檢測淋病奈瑟球菌的臨床應用對比研究[J].中國性科學,2015,24(7):301-302.

[4] 鄧鵬程,鄺滿元,王岐本,等.環介導等溫擴增法與臨床常規方法檢測淋球菌效果比較[J].現代醫藥衛生,2015,30(7):375-376.

[5] 謝國勇,余進勝.淋病奈瑟氏菌3種檢測方法的結果對照思路[J].當代醫學,2014,20(17):114-115.