白芷配方顆粒的提取工藝研究

張立新 孫永娟

摘 要：本實(shí)驗(yàn)以歐前胡素為指標(biāo)對(duì)白芷配方顆粒提取工藝進(jìn)行研究。白芷配方顆粒最佳提取工藝為加入10倍量70%乙醇，回流提取60分鐘，連續(xù)提取3次。本工藝穩(wěn)定、可行、收率高。

關(guān)鍵詞：白芷配方顆粒；提取；工藝

白芷始載于東漢《神農(nóng)本草經(jīng)》，名白，芳香，列為中品。白芷性溫，味辛，氣芳香，微苦，具有祛風(fēng)濕、活血排膿、生肌止痛的功效。《日華子本草》記載：“治目赤胬肉，及補(bǔ)胎漏滑落，破宿血，補(bǔ)新血，乳癰、發(fā)背、瘰疬、腸風(fēng)、痔瘺，排膿，瘡痍、疥癬，止痛生肌，去面皯疵瘢。”白芷常用于頭痛、腸風(fēng)痔漏、牙痛、鼻淵、癰疽瘡瘍、皮膚瘙癢等。白芷含有異歐前胡素（isoimperatorin）、歐前胡素（imperatorin）、當(dāng)歸素、壬烯醇、白當(dāng)歸醚、佛手柑內(nèi)酯（bergapten）、十一炭烯-4、欖香烯、十六烷酸、珊瑚菜素（phellopterin）、氧化前胡素（oxypeucedanin）等成分。白芷具有解熱、解痙、降壓、興奮運(yùn)動(dòng)和呼吸中樞、抗癌、鎮(zhèn)痛、平喘、抗輻射、抗菌、抑制脂肪細(xì)胞合成、光敏性等方面的藥理作用[1-5]。本實(shí)驗(yàn)以歐前胡素為指標(biāo)對(duì)白芷配方顆粒提取工藝進(jìn)行研究。

1 儀器與試藥

KQ250DE超聲波清洗器超聲波檢測(cè)儀器（煙臺(tái)鑫康商貿(mào)有限公司）；LC-310液相色譜系統(tǒng)（江蘇天瑞儀器股份有限公司）；WP-UP-1820“沃特浦”普通型實(shí)驗(yàn)室超純水器（四川沃特爾水處理設(shè)備有限公司）；PHS-550智能型臺(tái)式酸度計(jì)（杭州陸恒生物科技有限公司）；SP-1900雙光束紫外可見分光光度計(jì)（上海光譜儀器有限公司）；分析天平（上海滬粵明科學(xué)儀器有限公司）。歐前胡素對(duì)照品（中國(guó)藥品生物制品檢定所提供）。乙腈（東莞市喬科化學(xué)有限公司）；甲醇（東莞市喬科化學(xué)有限公司）；乙醇（天津市康科德科技有限公司）。

2 方法與結(jié)果

2.1 單因素考察

2.1.1 提取次數(shù)

分別取藥材，粉碎為20目，精密稱定，至于圓底燒瓶?jī)?nèi)，分別提取四次，第一次加10倍70%乙醇，浸泡2小時(shí)，回流提取90分鐘，過濾，減壓濃縮；第二次加10倍70%乙醇，浸泡2小時(shí)，回流提取90分鐘，連續(xù)提取兩次，過濾，合并濾液，減壓濃縮；第三次加10倍70%乙醇，浸泡2小時(shí)，回流提取90分鐘，連續(xù)提取三次，過濾，合并濾液，減壓濃縮。第四次加10倍70%乙醇，浸泡2小時(shí)，回流提取90分鐘，連續(xù)提取四次，過濾，合并濾液，減壓濃縮。采用高效液相測(cè)定濃縮膏中歐前胡素含量并計(jì)算歐前胡素收率。

2.1.2 藥材粉碎目數(shù)

分別取藥材，分別粉碎為10目、20目、40目，精密稱定，至于圓底燒瓶?jī)?nèi)，分別加10倍70%乙醇，浸泡2小時(shí)，回流提取90分鐘，連續(xù)煎煮三次，過濾，合并濾液，減壓濃縮。采用高效液相測(cè)定濃縮膏中歐前胡素含量并計(jì)算歐前胡素收率。

2.1.3 加醇倍數(shù)

分別取藥材，粉碎為20目，精密稱定，至于圓底燒瓶?jī)?nèi)，分別提取四次，第一次加14倍70%乙醇，浸泡2小時(shí)，回流提取90分鐘，連續(xù)三次，第二次加12倍70%乙醇，浸泡2小時(shí)，回流提取90分鐘，連續(xù)三次，第三次加10倍70%乙醇，浸泡2小時(shí)，回流提取90分鐘，連續(xù)三次，第四次加8倍70%乙醇，浸泡2小時(shí)，回流提取90分鐘，連續(xù)三次，分別過濾，合并濾液，減壓濃縮。采用高效液相測(cè)定濃縮膏中歐前胡素含量并計(jì)算歐前胡素收率。

2.1.4 提取時(shí)間

分別取藥材，粉碎為20目，精密稱定，至于圓底燒瓶?jī)?nèi)，分別提取三次，第一次加10倍70%乙醇，浸泡2小時(shí)，回流提取60分鐘，連續(xù)三次，第二次加10倍70%乙醇，浸泡2小時(shí)，回流提取90分鐘，連續(xù)三次，第三次加10倍70%乙醇，浸泡2小時(shí)，回流提取120分鐘，連續(xù)三次，分別過濾，合并濾液，減壓濃縮。采用高效液相測(cè)定濃縮膏中歐前胡素含量并計(jì)算歐前胡素收率。

2.2 正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，粉碎目數(shù)對(duì)歐前胡素收率影響不大，提取次數(shù)、加醇倍數(shù)和提取時(shí)間對(duì)歐前胡素收率影響較大。連續(xù)提取3次和連續(xù)提取4次無明顯差異。選擇提取次數(shù)、加醇倍數(shù)和提取時(shí)間作為考察因素，采用正交試驗(yàn)法對(duì)影響提取效率的其它工藝條件進(jìn)行優(yōu)選。采用3個(gè)考察水平，用L9（34）正交表進(jìn)行試驗(yàn)，因素水平表見表1。

3 含量測(cè)定

3.1 色譜條件：依據(jù)查閱文獻(xiàn)及考查的結(jié)果，確定色譜條件如下[5]。色譜柱為安捷倫Cl8規(guī)格為（4.6mm×250mm，5μm）；流動(dòng)相以甲醇：水（55：45）；檢測(cè)波長(zhǎng)為300nm；流速1.0mL·min-1；柱溫：35℃。理論板數(shù)按歐前胡素峰計(jì)算應(yīng)不得低于3000。

3.2 供試品溶液的制備

取提取膏適量，精密量取，置5mL量瓶中，加50%乙醇適量，超聲處理十分鐘，放置至室溫，加50%乙醇稀釋至刻度，搖勻，用微孔濾膜（0.45μm）濾過，即得。

3.3 對(duì)照品溶液的制備

分別精密稱取歐前胡素對(duì)照品2.5mg，置250mL容量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得。

3.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備

將濃度為5μg/ml，10μg/ml，15μg/ml，20μg/ml，25μg/ml，30μg/ml，35μg/ml的對(duì)照品溶液分別吸取20μL注入HPLC，以進(jìn)樣量（μg）為橫坐標(biāo)，峰面積積分值A(chǔ)為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。試驗(yàn)表明，歐前胡素對(duì)照品在5～35μg/ml范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

3.5 回收率試驗(yàn)

取已知含量的同一批供試品各6份，分別精密添加一定量的歐前胡素對(duì)照品，測(cè)定含量，計(jì)算回收率。平均回收率為97.3%，RSD為0.82%。

4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

按照L9（34）正交設(shè)計(jì)表?xiàng)l件進(jìn)行試驗(yàn)，得到最佳提取工藝為加入10倍量70%乙醇，回流提取60分鐘，連續(xù)提取3次。本工藝穩(wěn)定、可行、收率高。

參考文獻(xiàn)

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[2]尉小慧，張樹軍，夏廣新，付收，王偉，沈敬山，嵇汝運(yùn).蛇床子和白芷中香豆素類化合物抑制磷酸二酯酶5活性的研究[J].中國(guó)藥學(xué)雜志，2006（02）.

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[5]劉忠和，李佳，吳基良.杭白芷香豆素對(duì)巴比妥類藥物催眠作用的影響及其機(jī)制研究[J].武漢大學(xué)學(xué)報(bào)（醫(yī)學(xué)版），2006（01）.