乳腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者癌組織lncRNA HOTAIR、lncRNA MALAT1表達(dá)變化及意義

劉峰，陳凱，王斌

(天津市北辰醫(yī)院，天津300400)

近年來(lái)研究顯示，長(zhǎng)鏈非編碼RNA(lncRNA)在劑量補(bǔ)償效應(yīng)、表觀遺傳調(diào)控、細(xì)胞周期調(diào)控、細(xì)胞分化、細(xì)胞凋亡及腫瘤發(fā)生、發(fā)展調(diào)控等方面發(fā)揮重要作用[1]。隨著高通量轉(zhuǎn)錄組測(cè)序技術(shù)的不斷發(fā)展，越來(lái)越多的lncRNA被陸續(xù)發(fā)現(xiàn)，但目前大部分lncRNA的確切生物學(xué)功能及作用機(jī)制并不清楚[2]。lncRNA HOTAIR、lncRNA Gas5、lncRNA h19、lncRNA MALAT1、lncRNA MEG3是新近發(fā)現(xiàn)的與惡性腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移相關(guān)的lncRNA[3～7]，本研究探討其對(duì)乳腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的預(yù)測(cè)價(jià)值。

1　臨床資料

1.1基本資料選擇2015年2月～2016年11月天津市北辰醫(yī)院收治的60例乳腺癌患者，均為女性，年齡36～7(52.2±12.6)歲，病程(1.2±0.3)個(gè)月；術(shù)前病理穿刺，病理學(xué)或細(xì)胞學(xué)檢查確診為乳腺癌。均行乳腺癌切除手術(shù)，術(shù)前未進(jìn)行新輔助放化療、放療或免疫治療；術(shù)后病理檢查根據(jù)WHO制定乳腺癌分期標(biāo)準(zhǔn)：Ⅰ期30例，Ⅱ期21例，Ⅲ期9例。排除標(biāo)準(zhǔn)：①年齡<18歲；②合并其他惡性腫瘤；③孕產(chǎn)婦；④HIV陽(yáng)性。術(shù)中留取手術(shù)切除的原發(fā)腫瘤組織和配對(duì)區(qū)域淋巴結(jié)組織各60例份，在液氮中速凍，將組織置于-80 ℃冰箱保存。淋巴結(jié)組織行病理檢查顯示淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移30例份，將其配對(duì)原發(fā)腫瘤組織作為轉(zhuǎn)移組；未發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移30例份，將其配對(duì)原發(fā)腫瘤組織作為非轉(zhuǎn)移組。本研究通過醫(yī)院倫理委員會(huì)審核，患者及家屬均簽署知情同意書。

表1　兩組lncRNA HOTAIR、lncRNA Gas5、lncRNA h19、lncRNA MALAT1、lncRNA MEG3相對(duì)表達(dá)量比較

注：與非轉(zhuǎn)移組比較，*P<0.01。

圖1　　　　轉(zhuǎn)移組lncRNA HOTAIR與lncRNA MALAT1表達(dá)相關(guān)性散點(diǎn)圖

1.3lncRNA HOTAIR、lncRNA MALAT1對(duì)乳腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的診斷效能繪制lncRNA HOTAIR、lncRNA MALAT1診斷乳腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的受試者工作特征(ROC)曲線，根據(jù)貝葉斯定量計(jì)算其診斷乳腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的敏感性、特異性、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值、陰性預(yù)測(cè)值、截?cái)嘀怠⒃\斷優(yōu)勢(shì)比(DOR)及曲線下面積(AUC)。結(jié)果顯示lncRNA HOTAIR、lncRNA MALAT1診斷乳腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的截?cái)嘀捣謩e為2.88、2.06，此時(shí)lncRNA HOTAIR診斷乳腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的敏感性、特異性、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值、DOR及AUC均高于lncRNA MALAT1。見表2。

表2　lncRNA HOTAIR、lncRNA MALAT1對(duì)乳腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的診斷效能

2　討論

lncRNA具有類型多、數(shù)量多、作用機(jī)制多等特點(diǎn)[7,8]。近年來(lái)研究顯示，與未轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)組織比較，乳腺癌轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)組織中l(wèi)ncRNA HOTAIR表達(dá)明顯升高；進(jìn)一步的生物學(xué)研究采用siRNA技術(shù)下調(diào)乳腺癌細(xì)胞lncRNA HOTAIR表達(dá)，結(jié)果顯示乳腺癌細(xì)胞的遷移及侵襲能力明顯減低；該研究認(rèn)為lncRNA HOTAIR參與了乳腺癌的侵襲與轉(zhuǎn)移，可作為抑制乳腺癌轉(zhuǎn)移的分子靶點(diǎn)[9]。但目前大部分研究都集中在其分子機(jī)制上，且研究對(duì)象多為細(xì)胞系，應(yīng)用分子生物學(xué)技術(shù)探討lncRNA如何調(diào)控細(xì)胞增殖及侵襲轉(zhuǎn)移，在臨床患者中的相關(guān)研究較少。

研究發(fā)現(xiàn)，lncRNA HOTAIR、lncRNA Gas5、lncRNA h19、lncRNA MALAT1、lncRNA MEG3 在多種腫瘤如肺癌、乳腺癌、腸癌、頭頸部鱗癌組織中表達(dá)升高，且在轉(zhuǎn)移病灶中的表達(dá)水平明顯高于未轉(zhuǎn)移病灶，提示上述lncRNA可能參與了上述腫瘤的轉(zhuǎn)移過程[10～16]。本研究結(jié)果顯示，轉(zhuǎn)移組lncRNA HOTAIR、lncRNA MALAT1相對(duì)表達(dá)量均明顯高于對(duì)照組，且轉(zhuǎn)移組lncRNA HOTAIR與lncRNA MALAT1相對(duì)表達(dá)量呈正相關(guān)，兩組lncRNA Gas5、lncRNA h19、lncRNA MEG3相對(duì)表達(dá)量比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；提示lncRNA HOTAIR與lncRNA MALT1可能共同參與了乳腺癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移過程。本研究還發(fā)現(xiàn)，lncRNA HOTAIR、lncRNA MALAT1診斷乳腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移截?cái)嘀捣謩e為2.88、2.06時(shí)，lncRNA HOTAIR診斷乳腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的敏感性、特異性、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值、DOR及AUC均高于lncRNA MALAT1；提示lncRNA HOTAIR、lncRNA MALAT1可作為預(yù)測(cè)乳腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的腫瘤標(biāo)志物；但lncRNA HOTAIR的診斷效能高于lncRNA MALAT1。

綜上所述，乳腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者癌組織lncRNA HOTAIR、lncRNA MALAT1表達(dá)均升高，癌組織lncRNA HOTAIR檢測(cè)對(duì)乳腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的診斷價(jià)值高于lncRNA MALAT1。但本研究納入患者例數(shù)較少，且患者均來(lái)自同一個(gè)醫(yī)療單位，可能存在研究對(duì)象的選擇性偏倚。未來(lái)可擴(kuò)大樣本量并進(jìn)行多中心臨床研究，進(jìn)一步明確lncRNA HOTAIR、lncRNA MALAT1作為乳腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移預(yù)測(cè)標(biāo)志物的可行性。

參考文獻(xiàn)：

[1] Sorensen KP, Thomassen M, Tan Q, et al. Long non-coding RNA HOTAIR is an independent prognostic marker of metastasis in estrogen receptor-positive primary breast cancer[J]. Breast Cancer Res Treat, 2013,142(3):529-536.

[2] Ye N, Wang B, Quan ZF, et al. Functional roles of long non-coding RNA in human breast cancer[J]. Asian Pac J Cancer Prev, 2014,15(15):5993-5997.

[3] Vennin C, Spruyt N, Robin YM, et al. The long non-coding RNA 91H increases aggressive phenotype of breast cancer cells and up-regulates H19/IGF2 expression through epigenetic modifications[J]. Cancer Lett, 2017(385):198-206.

[4] Meseure D, Vacher S, Lallemand F, et al. Prognostic value of a newly identified MALAT1 alternatively spliced transcript in breast cancer[J]. Br J Cancer, 2016,114(12):1395-1404.

[5] Zhang CY, Yu MS, Li X, et al. Overexpression of long non-coding RNA MEG3 suppresses breast cancer cell proliferation, invasion, and angiogenesis through AKT pathway[J]. Tumour Biol, 2017,39(6):1010428317701311.

[6] 吳立春,谷仕艷,代黃梅,等.長(zhǎng)鏈非編碼RNA-ROR在乳腺癌患者血清、癌組織中的表達(dá)變化及其臨床意義[J].山東醫(yī)藥,2017,57(32):78-80.

[7] Ding X, Zhu L, Ji T, et al. Long intergenic non-coding RNAs (LincRNAs) identified by RNA-seq in breast cancer[J]. PLoS One, 2014,9(8):e103270.

[8] Askarian-Amiri ME, Seyfoddin V, Smart CE, et al. Emerging role of long non-coding RNA SOX2OT in SOX2 regulation in breast cancer[J]. PLoS One, 2014,9(7):e102140.

[9] Deng J, Yang M, Jiang R, et al. Long Non-Coding RNA HOTAIR regulates the proliferation, self-renewal capacity, tumor formation and migration of the cancer stem-like cell (CSC) subpopulation enriched from breast cancer cells[J]. PLoS One, 2017,12(1):e0170860.

[10] Siegel R, Naishadham D, Jemal A. Cancer statistics, 2012[J]. CA Cancer J Clin, 2012,62(1):10-29.

[11] 陳可欣,何敏,董淑芬,等.天津市女性乳腺癌發(fā)病率死亡率和生存率分析[J].中華腫瘤雜志,2002,24(6):573-575.

[12] 楊鳳娟,牛瑩瑩,陳王洋,等.1992-2007年哈爾濱市南崗區(qū)乳腺癌發(fā)病率和死亡率分析[J].實(shí)用腫瘤學(xué)雜志,2011,25(3):257-260.

[13] Becorpi A, Sisti G, Sorbi F, et al. Management options of breast cancer related osteoporosis[J]. Clin Cases Miner Bone Metab, 2014,11(2):110-113.

[14] Salgado R, Denkert C, Demaria S, et al. The evaluation of tumor-infiltrating lymphocytes (TILs) in breast cancer: recommendations by an International TILs Working Group 2014[J]. Ann Oncol, 2015,26(2):259-271.

[15] Zhang Z, Ni C, Chen W, et al. Expression of CXCR4 and breast cancer prognosis: a systematic review and meta-analysis[J]. BMC Cancer, 2014(14):49.

[16] Ribelles N, Santonja A, Pajares B, et al. The seed and soil hypothesis revisited: current state of knowledge of inherited genes on prognosis in breast cancer[J]. Cancer Treat Rev, 2014,40(2):293-299.