多發性骨髓瘤患者血清HMGB1水平變化及其與β2-MG、LDH的關系

劉艷娟，吳玉輝，郭賀賀，劉奕晨，孫志強

(1貴州醫科大學，貴陽550000；2南方醫科大學深圳醫院)

多發性骨髓瘤(MM)是一種發生于B淋巴細胞的惡性漿細胞疾病，是血液腫瘤中最常見的惡性腫瘤之一，其發病率在惡性血液疾病中約占13%[1]。目前，MM的發病機制尚未清楚，既往研究認為電離輻射、病毒感染、基因遺傳都有可能引發該病。近年研究報道，MM的發生可能與慢性炎癥[2,3]有關。高遷移率族蛋白B1(HMGB1)是一種重要的炎癥細胞因子，在多種惡性腫瘤呈高表達狀態。目前，國內關于HMGB1在MM發病中的作用研究相對較少。本研究通過檢測MM患者血清HMGB1水平，分析其與反映MM疾病進展和腫瘤負荷的β2微球蛋白(β2-MG)、乳酸脫氫酶(LDH)的相關性，了解HMGB1與MM發生發展的關系，旨在為MM的診斷和治療提供新的靶點。

1　資料與方法

1.1　臨床資料

選擇2015年10月～2017年1月我院收治的MM患者65例(觀察組)，男51例、女14例，年齡45～88歲、平均53.1歲。均符合《中國多發性骨髓瘤診治指南》2015年修訂的診斷標準。對33例患者采取BDT方案(硼替佐米+地塞米松+來那度胺)化療，根據中國醫師協會血液分會多發性骨髓瘤工作組制定的療效標準，將33例患者分為完全緩解20例、緩解后復發13例。其余32例為初診未治患者，依據MM DS分期系統，Ⅰ期10例、Ⅱ期6例、Ⅲ期16例。排除嚴重肝功能異常、動脈粥樣硬化等慢性炎癥疾病患者，化療前或化療過程中出現感染者。另選擇性別、年齡匹配的健康體檢者65例(對照組)，男51例、女14例，年齡40～76歲、平均50.2歲。本研究通過醫院醫學倫理委員會批準，所有受試者均簽署知情同意書。

1.2　血清HMGB1檢測

采集受試者清晨空腹外周靜脈血5 mL，置于促凝管中，室溫放置2 h后離心，吸上清液，-80 ℃保存。采用ELISA法檢測血清HMGB1水平，嚴格按照ELISA試劑盒操作說明書進行。

1.3　血清β2-MG、LDH檢測

采集患者清晨空腹外周靜脈血5 mL，離心取血清，采用ELISA法檢測β2-MG、LDH水平，按照ELISA試劑盒操作說明書進行。

1.4　統計學方法

2　結果

2.1　兩組血清HMGB1水平比較

觀察組和對照組的血清HMGB1水平分別為(339.582±225.018)、(50.437±45.935)pg/mL，觀察組高于對照組(P<0.01)。

2.2　不同預后MM患者血清HMGB1、β2-MG、LDH水平比較

初診未治者血清HMGB1、β2-MG、LDH水平均高于完全緩解者(P均<0.01)。緩解后復發者血清HMGB1、β2-MG水平高于未治者，LDH低于未治者，但差異無統計學意義(P均>0.05)。緩解后復發者血清HMGB1、β2-MG、LDH水平均高于完全緩解者(P均<0.01)。見表1。

表1　　　　不同預后MM患者血清HMGB1、β2-MG、LDH水平比較

注：與完全緩解比較，*P<0.01；與緩解后復發比較，△P<0.01。

2.3　初診未治不同分期患者血清HMGB1、β2-MG、LDH水平比較

Ⅱ期患者血清HMGB1、β2-MG、LDH水平高于Ⅰ期，Ⅲ期患者血清HMGB1、β2-MG、LDH水平高于Ⅱ期(P均<0.01)。見表2。

表2　　　　初診未治不同分期患者血清HMGB1、β2-MG、LDH水平比較

注：與Ⅱ期比較，*P<0.01。

2.4　MM患者血清HMGB1水平與β2-MG、LDH水平的相關性

Pearson相關性分析顯示，MM患者血清HMGB1水平與β2-MG、LDH水平均呈正相關(r=0.949，P=0.002；r=0.879，P=0.003)。

3　討論

MM的發病原因和發病機制目前尚不明確。人類HMGB1基因位于13q12染色體上，包括5個外顯子和4個內含子[4]。從結構上來說，HMGB1分為3個功能區，即HMGB1 A盒、HMGB1 B盒和酸性C末端[5]。A盒和B盒的主要作用是與DNA非特異性結合，B盒是引起炎癥反應的功能結構區，酸性C末端主要參與調節HMGB1與DNA結合的親和力。正常情況下，HMGB1主要存在于內質網和高爾基體中，與DNA相結合，維持核小體結構的穩定并參與基因的重組、復制等，釋放至細胞外的HMGB1可通過多種途徑介導機體的炎癥反應、免疫反應、組織再生及腫瘤細胞轉移等。

研究顯示，HMGB1在白血病中呈高表達狀態。付娟等[6]檢測了40例初診未治白血病患者(白血病組)、50例良性血液病患者(良性血液病組)及50例健康志愿者(對照組)血漿HMGB1水平，發現白血病組化療前HMGB1水平高于化療后及良性血液病組、對照組。Jia等[7]比較36例慢性淋巴細胞白血病(CLL)患者(未治22例、經治14例)和14例年齡相仿的健康對照組血漿HMGB1水平,發現未治療過的和復發患者同健康對照組相比較，其血漿HMGB1水平明顯增高。Yang等[8]發現，HMGB1在各種白血病中過度表達。本研究結果顯示，MM患者血清HMGB1水平高于健康對照者，且隨著MM分期升高，HMGB1水平升高。提示血清HMGB1水平與MM病情有關，可能是MM發生發展的一個影響因素。

HMGB1參與惡性腫瘤發生發展的通路主要有以下3種[9，10]：①JAK/STAT信號通路：JAK/STAT信號通路在腫瘤疾病的進展過程中起重要作用。STAT在多種惡性腫瘤中的表達水平較正常組織中明顯升高。此外，有試驗證實激活JAK/STAT途徑可活化STAT，進而促進腫瘤細胞的增殖、轉移等。而HMGB1可能影響STAT信號通路，與腫瘤的發生存在一定的關系。②RAGE通路：RAGE作為HMGB1的主要受體，與HMGB1具有高度親和力。有報道指出，HMGB1和RAGE在腫瘤的侵襲過程中起協同作用。釋放到細胞外的HMGB1可以結合細胞表面的RAGE，上調RAGE，最終促進腫瘤的細胞的生長和轉移。③Toll樣受體(TLR)：除RAGE外，TLR2和TLR4亦可作為HMGB1的受體，并能與其相互作用誘導細胞活化，與腫瘤的發生發展密切相關。另有研究報道，HMGB1可增加化療耐藥性，在治療上使用HMGB1中和抗體可增加惡性血液病對化療藥物的敏感性[11]。

β2-MG是相對分子質量較低的蛋白，生理代謝過程活躍的腫瘤細胞可分泌大量β2-MG[12]。MM患者血清β2-MG表達水平明顯增高的作用機制主要為[13]：①骨髓瘤細胞可大量分泌和合成β2-MG；②骨髓瘤細胞壞死后可大量釋放β2-MG；③骨髓瘤細胞引起腎功能損害，使腎小球濾過率下降，血清β2-MG表達水平明顯升高。血清β2-MG升高常常提示疾病進展。LDH是機體糖酵解過程中重要的代謝酶，當患有腫瘤時，LDH可自細胞內大量釋放至血液中[13]。對于MM患者，血清LDH表達水平可明顯升高，與MM預后密切相關,對MM的臨床診斷、治療效果和預后評估具有重要意義[14]。本研究結果顯示，Ⅱ期患者外周血中β2-MG和LDH較Ⅰ期升高，Ⅲ期患者較Ⅱ期升高，且HMGB1水平與β2-MG、LDH水平均呈正相關。說明HMGB1在一定程度上可以反映疾病的嚴重程度及預后。

綜上所述，MM患者血清HMGB1升高可能影響MM的發生發展，還可反映疾病的嚴重程度。

參考文獻：

[1] Palumbo A, Cerrato C. Diagnosis and therapy of multiple myeloma[J]. Korean J Intern Med, 2013,28(3):263-273.

[2] Ugur M, Baygutalp NK, Melikoglu MA, et al. Elevated serum interleukin-23levels inankylosingspondylitis patients and the relationship with disease activity[J]. Nagoya J Med Sci, 2015,77(4):621-627.

[3] Martin JC, Baeten DL, Josien R. Emerging role of IL-17 and Th17 cells in systemic lupus erythematosus[J]. Clin Immunol, 2014,154(1):1-12.

[4] 趙國軍,于鴻,黃俊星.高遷移率族蛋白B1在食管鱗癌的研究進展[J].現代腫瘤醫學,2014,22(10):2484-2487.

[5] Hn YH, Yang L, Zhang CG. HMGB1-a as potential target fortherapy of hematological malignancies[J]. J Exp Hematol, 2014,22(2):560-564.

[6] 付娟,馬慶,張旭華.HMGB-1在白血病患者血漿中的表達及臨床意義[J].山東醫藥,2012,52(11):55-56.

[7] Jia L, Clear A, Liu FT, et al. Extracellular HMGB1 promotes differentiation of nurse-like cells in chronic lymphocytic leukemia[J]. Blood, 2014,123(11):1709-1719.

[8] Yang L, Yu Y, Kang R, et al. Up-regulated autophagy by endogenous high mobility group box-1 promotes chemoresistance in leukemia cells[J]. Leuk Lymphoma, 2011,53(2):315-322.

[9] 周霞,凌斌,孫潔,等.HMGB1-RAGE/TLRs-NF-κB信號通路與膿毒癥關系的研究進展[J].山東醫藥,2016,56(37):101-103.

[10] 張明峰,周守勤,白連祥,等.HMGB與JAK2/STATE1信號通路在大鼠滑膜組織增殖中的相關性研究[J].河北醫科大學學報,2011,32(7):750-754.

[11] Liu L, Yang M, Kang R, et al. HMGB1-induced autophagy promotes chemotherapy resistance in leukemia cells[J]. Leukemia, 2011,25(1):23-31.

[12] 吳燕明,丁剛,丁厚明.多發性骨髓瘤血清β2微球蛋白檢測的臨床意義[J].安徽醫學,2007,28(6):528-529.

[13] 劉傳才,陳文習.血清β2微球蛋白、乳酸脫氫酶在多發性骨髓瘤診治中的臨床意義[J].醫學綜述,2014,20(15):2849-2850.

[14] Bouafia F, Drai J, Bienvenu J, et al. Profiles and prognostic values of serum LDH isoenzymes in patients with haematopoieticmalignancies[J]. Bull Cancer, 2004,91(7/8):229-240.