類固醇生成因子1及細胞角蛋白8在垂體腺瘤中的表達及意義

吳會芳　王俊寬　常　佳　顧　斌　馮怡錕　楊婉菁　張　巖　胡桂明　陳　琛　任景麗

1)鄭州大學第二附屬醫院病理科，河南 鄭州 450014　2)鄭州大學第一附屬醫院神經外科，河南 鄭州 450052

垂體腺瘤是鞍區最常見的腫瘤[1-2]，因壓迫視神經、激素分泌的增多或減少引起視野缺損或內分泌紊亂等多種癥狀[3]。部分腫瘤呈侵襲性生長，甚至出現遠處轉移(垂體癌)[4-6]。正常垂體中，類固醇生成因子1(steroidogenic factor-1，SF1)可以促進垂體促性腺激素細胞的分化，在垂體促性激素細胞胞核中高表達[7]。我們通過免疫組織化學方法，研究SF1和細胞角蛋白8(cytokeratin8，CK8)在垂體腺瘤中的表達，探討其在垂體腺瘤分類及預后中的意義。

1　資料及方法

1.1病例收集2016—2017年在鄭州大學第二附屬醫院神經外科接受手術治療的垂體腺瘤49例，其中促性腺激素細胞腺瘤(圖1)20例，非促性腺激素細胞腺瘤11例(生長激素細胞腺瘤3例，泌乳激素細胞腺瘤7例，促腎上腺皮質激素細胞腺瘤1例)，無激素分泌的腺瘤18例。男21例，女28例；中位年齡52歲。

1.2常規處理手術切除的組織標本，經10%福爾馬林固定、石蠟包埋后切片，切片厚度3 μm。

1.3免疫組織化學染色單克隆鼠抗人抗體SF1(克隆號OT110E2，中衫金橋生物技術有限公司，即用型)。單克隆鼠抗人細胞角蛋白8(克隆號TS1，基因科技上海有限公司，1：200)。EnVision二步法染色，以緩沖液代替一抗作陰性對照。免疫組織化學結果判讀標準[8]：將染色強度分為陰性(0)、低至中等(1)、強(2)；將陽性腫瘤細胞百分比計為0(0%)、0.1(1%～9%)、0.5(10%～49%)和1(50%或以上)。根據兩者相乘的結果將染色進行半定量分析(histochemistry score，H-score)，分為陰性(0，圖2～3)、低表達(0.1～0.5，圖4～5)、高表達(1～3，圖6～7)3組。正常垂體作陽性對照，腫瘤間質血管內皮細胞作內部陰性對照。SF1核著色[9]，CK8胞漿著色(彌漫、點狀、核旁、環狀等)[10]，低表達及高表達均為免疫染色陽性。

圖1　促性腺激素細胞腺瘤(HE染色，×200倍) 圖2　促性腺激素細胞腺瘤SF1陰性(免疫組織化學染色 EnVision二步法，×200倍)

圖3　促性腺激素細胞腺瘤CK8陰性(免疫組織化學染色 EnVision二步法，×200倍) 圖4　促性腺激素細胞腺瘤SF1低表達(免疫組織化學染色 EnVision二步法，×200倍)

圖5　促性腺激素細胞腺瘤CK8低表達(免疫組織化學染色 EnVision二步法，×200倍) 圖6　促性腺激素細胞腺瘤SF1高表達(免疫組織化學染色 EnVision二步法，×200倍)

1.4統計學方法采用SPSS 17.0 統計學軟件進行分析，計數資料組間比較用χ2檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2　結果

SF1在促性腺激素細胞腺瘤中的陽性率(90%，18/20)明顯高于其他類型垂體腺瘤(0)，差異有統計學意義(P<0.01)；SF1在FSH/LH高表達、低表達病例中，均以高表達為主(64%，7/11；67%，6/9)，差異無統計學意義(P>0.05)；49例垂體腺瘤中，6例出現SF1胞漿棕黃色顆粒狀著色(3例生長激素細胞腺瘤，2例無激素分泌的腺瘤，1例促性腺激素細胞腺瘤)，見表1、圖8；CK8在SF1陽性的垂體腺瘤中的高表達率(21%，5/24)明顯低于SF1陰性的垂體腺瘤(92%，23/25)，差異有統計學意義(P<0.01)，見表2。

圖7　促性腺激素細胞腺瘤CK8高表達(免疫組織化學染色 EnVision二步法，×200倍) 圖8　生長激素細胞腺瘤SF1胞漿表達(免疫組織化學染色 EnVision二步法，×200倍)

項目n低表達高表達胞漿表達促性腺激素細胞腺瘤(FSH/LH高表達)112(18)7(64)1(9)促性腺激素細胞腺瘤(FSH/LH低表達)93(33)6(67)0非促性腺激素細胞腺瘤　PRL腺瘤7000　GH腺瘤3003(100)　ACTH腺瘤1000無激素分泌腺瘤1804(22)2(11)合計495176

表2　CK8在垂體腺瘤中的表達　[n(%)]

3　討論

SF1是由NR5A1基因編碼生成，其對性腺發育及類固醇的生成有重要的調節作用[11-12]，表達在垂體促性腺激素細胞、腎上腺皮質、性腺、脾臟、腹內側下丘腦等部位[13-14]。2017版WHO內分泌腫瘤分類中，對激素(FSH、LH、α-SU、PRL、GH、TSH、ACTH)的免疫組化檢測成為垂體腺瘤分類的基礎，但FSH/LH的免疫組化經常出現局灶或弱表達[4]，使促性腺激素細胞腺瘤的病理診斷出現一定困難。

我們的研究顯示，SF1的表達不受FSH/LH表達強弱，甚至不表達的影響，在促性腺激素細胞腺瘤中有極高的敏感性和特異性。有研究顯示，無激素分泌的腺瘤占垂體腺瘤的25.6%[15]，將SF1用于分類后，可以將FSH、LH弱表達，甚至是不表達的無激素分泌腺瘤進一步分類，為垂體腺瘤的臨床管理提供更確切的依據。

近年研究顯示，CK8在不同的垂體腺瘤中有不同的表達模式[16-17]。本研究顯示，CK8在大部分SF1陽性的腺瘤中為陰性或低表達，而在SF1陰性的腺瘤中為高表達，提示CK8陰性或低表達是促性腺激素細胞腺瘤的分子特征之一，可輔助用于垂體腺瘤的分類。

垂體腺瘤的分類、腫瘤細胞的增生活性與預后有一定的相關性[18-19]，但至今仍無可靠指標預測垂體腺瘤的生物學特性[20-21]，只能在垂體腺瘤出現轉移后才能確診為垂體癌[4，22-23]，延遲了患者的早期治療。有研究顯示，增加SF1劑量可以引起腎上腺皮質細胞增殖和腫瘤[24]，其表達與腎上腺皮質癌的預后呈負相關[8，25-26]。本研究發現，SF1的表達程度與FSH/LH的表達與否及表達程度無相關性。有研究顯示，NR5A1基因突變可以導致SF1的表達部位由胞核轉為胞漿[27]。本研究中出現6例胞漿著色，特別是3例生長激素細胞腺瘤，全部出現胞漿著色。總之，SF1和CK8的免疫組化檢測對垂體促性腺激素細胞腺瘤有較高的診斷價值，而SF1與垂體腺瘤預后間的關系及SF1胞漿表達的意義有待進一步研究。

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