音樂療法對(duì)慢性應(yīng)激性高血壓大鼠的預(yù)防作用初探*

孫嘉綠　趙凡　喬田　鄭焱江　王玉芳△

(1.四川大學(xué)華西公共衛(wèi)生學(xué)院；2.四川大學(xué)華西基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與法醫(yī)學(xué)院機(jī)能學(xué)實(shí)驗(yàn)室，四川 成都　610041)

高血壓病是一種常見病和多發(fā)病。據(jù)調(diào)查，目前全球高血壓患者已超過五億[1]。在我國(guó)，高血壓是患病率最高的心血管疾病[2]，近年的流行病學(xué)研究顯示，我國(guó)18歲以上公民的高血壓患病率從2010年的25.2%上升到2014年的27.2%。高血壓不但可以引起嚴(yán)重的心、腦、腎并發(fā)癥，而且也是冠心病、腦卒中等心血管疾病的重要危險(xiǎn)因素[3]。雖然高血壓的發(fā)病機(jī)理目前還不完全清楚，但精神緊張、情緒壓抑、心理矛盾等因素可以導(dǎo)致高血壓病的病理過程已被國(guó)內(nèi)外學(xué)者所公認(rèn)。研究表明[4]，慢性心理應(yīng)激可以誘發(fā)高血壓病的形成與發(fā)展。并且在心血管疾病的死因分析中[5]，精神心理因素(45.7%)超過了生物因素(29.0%)，成為高血壓致死的首位因素。應(yīng)激反應(yīng)主要表現(xiàn)為交感-腎上腺髓質(zhì)軸和下丘腦-垂體-腎上腺(Hypothalamic-pituitary-adrenal axis，HPA)軸興奮為主的一系列神經(jīng)內(nèi)分泌反應(yīng)[6]，即內(nèi)源性應(yīng)激激素如糖皮質(zhì)激素(Glucocorticoids，GC)的升高。有研究顯示，在慢性應(yīng)激的動(dòng)物模型中觀察到其海馬區(qū)糖皮質(zhì)激素受體水平下調(diào)[7]，而外周循環(huán)系統(tǒng)糖皮質(zhì)激素水平的上升[8]，但是否激素變化水平與高血壓發(fā)生發(fā)展有關(guān)還值得進(jìn)一步探討。

音樂療法是一種新興的治療方法，是集音樂、醫(yī)學(xué)和心理學(xué)為一體的交叉治療方式[10]。科學(xué)家對(duì)音樂治療的定義多種多樣，總體而言，音樂治療是運(yùn)用音樂及其要素(包括聲音、旋律與和聲)，旨在改善有健康或教育相關(guān)問題的人們的生理、智力及社會(huì)功能[11]。一定音調(diào)、強(qiáng)度和節(jié)奏的放松音樂[12]可以通過生理、心理兩大途徑達(dá)到穩(wěn)定情緒，減輕焦慮，緩解疼痛的作用。因此，音樂治療作為一種非藥物治療高血壓的方式已經(jīng)得到國(guó)內(nèi)外科學(xué)家的重視[1]，但預(yù)防作用目前還有待探索。本實(shí)驗(yàn)采用動(dòng)物實(shí)驗(yàn)建立慢性應(yīng)激性高血壓模型，探究音樂治療對(duì)慢性應(yīng)激性高血壓的預(yù)防作用，并測(cè)量比較血清中糖皮質(zhì)激素的含量。為音樂治療對(duì)高血壓發(fā)病因素中的慢性應(yīng)激因素的預(yù)防作用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1　材料與方法

1.1　材料

1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組

30只SPF級(jí)6-7周齡的健康Sprague-Dawley(SD)雄性大鼠，體重180 g～220 g，購(gòu)自四川大學(xué)華西動(dòng)物中心；大鼠置于四川大學(xué)華西基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與法醫(yī)學(xué)機(jī)能學(xué)實(shí)驗(yàn)室動(dòng)物房，分籠飼養(yǎng)，每籠5只。飼養(yǎng)條件：室內(nèi)溫度23℃±1℃，相對(duì)濕度50%±5%，自由飲食水，光暗周期為12/12 h。實(shí)驗(yàn)前適應(yīng)性飼養(yǎng)1 w后尾壓法測(cè)量大鼠血壓，選取收縮壓<130 mmHg的大鼠24只，采取隨機(jī)排列表法分為3組(每組8只)：即慢性應(yīng)激組、慢性應(yīng)激+音樂組對(duì)照組(后簡(jiǎn)稱音樂組)和空白對(duì)照組。

1.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器與試劑

足底電擊儀器(SDT-8M跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)視頻分析系統(tǒng)及ST-120動(dòng)物行為學(xué)刺激儀，成都泰盟公司，中國(guó))；成都泰盟公司BP-600A全自動(dòng)大小鼠無創(chuàng)血壓測(cè)量系統(tǒng)；希瑪804聲級(jí)計(jì)；音響兩只；可的松檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫法)購(gòu)自德國(guó)IBL公司(德國(guó)IBL RE52061)。

1.2　方法

1.2.1 慢性應(yīng)激性高血壓大鼠模型建立

將大鼠分別放在ST-120動(dòng)物行為學(xué)刺激儀的分格箱中，用低頻、低壓交流電(220±22 V，50±2 Hz)電擊大鼠足底并結(jié)合100 dB工業(yè)噪音同步刺激。實(shí)驗(yàn)通道數(shù)8道，單位活動(dòng)空間尺寸為155 mm×140 mm×210 mm，電源功耗≤40W，刺激電壓輸出為35 V，刺激脈沖電源強(qiáng)度以不造成損傷，但引起強(qiáng)烈反應(yīng)為準(zhǔn)。上午8∶00～10∶00、下午2∶00～4∶00各刺激一次，共4 w。刺激過程中，噪音源置于電刺激箱之外，不與大鼠產(chǎn)生直接接觸。除施加復(fù)合應(yīng)激源刺激外，應(yīng)激組大鼠與對(duì)照組大鼠的飼養(yǎng)條件和環(huán)境一致，均在正常條件下飼養(yǎng)。

1.2.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組及治療

用隨機(jī)排列表法將24只雄性SD大鼠隨機(jī)分為3組：即慢性應(yīng)激組、慢性應(yīng)激+音樂組(后簡(jiǎn)稱音樂組)和對(duì)照組。慢性應(yīng)激組和音樂組接受足底電擊結(jié)合噪聲的復(fù)合刺激，每日2次，共28 d。音樂組在接受慢性應(yīng)激刺激的同時(shí)每日進(jìn)行音樂干預(yù)(2 h·d-1，65 dB)，此期間對(duì)照組大鼠正常飼養(yǎng)。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后1 w，采用尾壓法測(cè)量三組大鼠的收縮壓，酶聯(lián)免疫法測(cè)量血清中的糖皮質(zhì)激素含量。

1.2.3 放松音樂的選擇和干預(yù)

音樂組大鼠在接受足底電擊與噪音復(fù)合應(yīng)激刺激的同時(shí)，每天于18:00-20:00用立體音響播放放松音樂2 h(聲級(jí)計(jì)測(cè)定音樂強(qiáng)度平均為65 dB[13-14])，持續(xù)4 w。放松音樂選擇一系列中外柔和平緩的純音樂，我國(guó)傳統(tǒng)音樂如《梁山伯與祝英臺(tái)》、《春江花月夜》，國(guó)外班得瑞的純音樂，如《月光水岸》、《安妮的仙境》、《snowdreams》等。為避免環(huán)境內(nèi)無關(guān)聲音影響，播放地點(diǎn)選在比較安靜的實(shí)驗(yàn)室。

1.3　測(cè)定指標(biāo)

1.3.1 血壓測(cè)定

應(yīng)用BP-600A全自動(dòng)大小鼠無創(chuàng)血壓測(cè)量系統(tǒng)測(cè)量大鼠收縮壓。連續(xù)測(cè)3次取均值，每次測(cè)量均在下午電擊后1 h進(jìn)行。正式實(shí)驗(yàn)前對(duì)大鼠進(jìn)行連續(xù)3 d血壓測(cè)定，使其適應(yīng)測(cè)量環(huán)境，并確定收縮壓基線。于慢性應(yīng)激刺激4 w后測(cè)量并記錄處理后大鼠的收縮壓。

1.3.2 血清糖皮質(zhì)激素含量測(cè)定

收集大鼠股動(dòng)脈血4 ml，靜置30 min后，于4℃、3000 rpm離心10 min，分離血清，取血清儲(chǔ)存于-25℃。實(shí)驗(yàn)具體操作參照Elisa試劑盒說明書進(jìn)行。

1.4　統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

2　結(jié)果

2.1　音樂干預(yù)對(duì)慢性應(yīng)激性高血壓大鼠血壓的影響

實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，慢性應(yīng)激組大鼠收縮壓顯著高于對(duì)照組(P<0.01)。音樂組血壓接近正常值(P>0.05)，和慢性應(yīng)激組相比血壓顯著下降(P<0.01)，見表1。

表1　大鼠血壓

注：與對(duì)照組相比，*P<0.05；實(shí)驗(yàn)中大鼠死亡3只。

2.2　音樂療法對(duì)慢性應(yīng)激性高血壓大鼠血清糖皮質(zhì)激素水平的影響

酶聯(lián)免疫法檢測(cè)血清中糖皮質(zhì)激素結(jié)果顯示，慢性應(yīng)激組的血清糖皮質(zhì)激素含量顯著高于空白對(duì)照組(P<0.01)和音樂組(P<0.05)，音樂組的糖皮質(zhì)激素和空白對(duì)照組相比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見表2。

表2　大鼠血清糖皮質(zhì)激素含量

注：與對(duì)照組相比，*P<0.05。

3　討論

近年來，隨著醫(yī)學(xué)模式由單純的生物醫(yī)學(xué)模式向生物-心理-社會(huì)醫(yī)學(xué)模式的轉(zhuǎn)變，社會(huì)心理因素在高血壓等慢性疾病發(fā)病中的作用逐漸受到重視。音樂療法作為治療高血壓的一種非藥物療法，其研究也取得了很大進(jìn)展。張鈺等人研究[1]表明音樂治療可以明顯改善原發(fā)高血壓患者的一般健康狀況(General health，GH)、精力(Vitality，VT)和健康總分。雷小紅等研究[3]表明音樂療法可以改善Ⅰ期高血壓患者生活質(zhì)量，對(duì)血壓控制有重要作用，同時(shí)對(duì)促進(jìn)健康的生活方式也有積極意義。但是已有研究大多集中在對(duì)高血壓的治療上，而在預(yù)防方面的實(shí)驗(yàn)研究很少。同時(shí)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)是探究音樂療法機(jī)制的有效途徑。大量文獻(xiàn)顯示：適宜音樂刺激能夠改善動(dòng)物的不良情緒，提高學(xué)習(xí)和記憶能力，增強(qiáng)免疫功能等，這些與對(duì)人體的作用相似[15]。

本實(shí)驗(yàn)通過構(gòu)建SD大鼠慢性應(yīng)激模型并同時(shí)給予音樂干預(yù)來觀察音樂療法對(duì)高血壓的預(yù)防作用。結(jié)果顯示三組大鼠血壓組間有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，慢性應(yīng)激組大鼠血壓明顯高于音樂組和對(duì)照組，音樂組血壓略高于對(duì)照組，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。說明模型構(gòu)建成功，且音樂療法對(duì)大鼠高血壓發(fā)病中的慢性應(yīng)激因素起到保護(hù)作用，可以有效預(yù)防高血壓的發(fā)生。

研究表明，應(yīng)激能夠激活HPA軸，導(dǎo)致腎上腺皮質(zhì)釋放糖皮質(zhì)激素[16][17]。本實(shí)驗(yàn)通過酶聯(lián)免疫法測(cè)量大鼠血清中糖皮質(zhì)激素含量，對(duì)音樂療法預(yù)防高血壓的機(jī)制進(jìn)行了初步探究。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，慢性應(yīng)激組的血清糖皮質(zhì)激素含量顯著高于空白對(duì)照組和音樂組，初步證實(shí)了音樂療法預(yù)防高血壓的一個(gè)機(jī)制是通過調(diào)節(jié)血清中糖皮質(zhì)激素的含量。研究發(fā)現(xiàn)：音樂療法還可通過神經(jīng)作用、內(nèi)分泌作用、生物心理作用等多種途徑對(duì)血壓進(jìn)行控制[18]。故未來可對(duì)音樂療法預(yù)防高血壓的機(jī)制進(jìn)行進(jìn)一步探究。

隨著現(xiàn)代社會(huì)生活節(jié)奏的加快，精神心理應(yīng)激因素的增多導(dǎo)致高血壓病人數(shù)量逐年上升。流行病學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，職業(yè)應(yīng)激與高血壓的發(fā)病密切相關(guān)[19-21]，緊張的工作環(huán)境和工作內(nèi)容本身所帶來的壓力，就是一種慢性心理應(yīng)激。在臨床病例中，約有三分之一的原發(fā)性高血壓是由于應(yīng)激產(chǎn)生。緊張的工作環(huán)境和工作內(nèi)容本身的壓力，與心血管疾病,尤其是高血壓、冠心病有著密切的關(guān)系[22]。鑒于目前的醫(yī)療手段尚無法將高血壓治愈，且長(zhǎng)期藥物治療有一定的副作用，故對(duì)于整個(gè)社會(huì)和人群，加強(qiáng)高血壓的一級(jí)預(yù)防極為重要。高血壓防治的整合、跨學(xué)科合作及戰(zhàn)線前移是應(yīng)對(duì)高血壓的新挑戰(zhàn)。本研究初步提示音樂療法能夠降低慢性應(yīng)激導(dǎo)致的血壓升高。因此有必要在人群中推廣音樂療法，消除早期慢性應(yīng)激因素對(duì)血壓的不良效應(yīng)，提高對(duì)高血壓疾病的預(yù)防與控制，促進(jìn)人群身心健康。

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