潘晶晶 福州大北農生物技術有限公司 福州 350014
在生物制品檢定過程中實驗動物的使用是必不可少的,其中豚鼠對多種藥物、多種病原菌或病毒均極為敏感,又因其特殊的生物學特性和生理解剖特點等多方面的優點,被廣泛應用于研發新的生物醫藥、鑒定生物制品質量及藥理學等方面的研究。但豚鼠的生存能力不強,對外界飼養環境較為敏感,極易受環境中各種要素改變的影響,作為實驗動物的使用單位,我們在生物制品檢定過程中所用的豚鼠多為從外單位購買。因此,不可避免存在運輸應激、外界環境因素的突然改變等多方面的應激,從而導致豚鼠表現出各種應激反應如拒食、免疫力降低等,影響其正常的生活,從而造成試驗結果不準確。為了讓購買來的豚鼠能在試驗中提供準確的數據,應對豚鼠的飼養管理進行科學完善的規范,現結合使用單位的角度對其科學飼養管理進行概述、總結。
1.1 合格的來源 合格來源的實驗動物是獲得準確檢定數據的基礎,試驗用動物必須嚴格按各種制品規程規定的標準選用,不符合標準的動物絕不用于制品檢驗或試驗。根據試驗要求所引進的實驗動物,必須按規定級別向具有實驗動物生產許可證的單位購買,并要求供應商開具實驗動物質量合格證。引進的實驗動物要有詳細記錄,至少包括動物來源、飼養條件、動物的健康情況等方面內容。
1.2 減少運輸應激 在運輸過程中擁擠、長途顛簸,都必然引起豚鼠的生理應激、心理應激、氣候應激、饑渴應激等,若運輸條件惡劣會進一步導致患病、衰弱甚至死亡等,因此,為減少這方面的應激,首先運輸車輛應能滿足運輸動物的基本福利要求,運輸籠具的大小和形狀應適于豚鼠的生物特性,材質應符合動物的健康和福利要求,并符合運輸規范和要求,若運輸時間超過6 h,應配備符合要求的飼料和飲水設備[1]。最好選擇從有專門實驗動物運輸車輛的單位購買,可有效減少運輸途中的應激。
1.3 觀察與隔離 新購入的豚鼠首先要進行初步觀察,如性別、日齡、體重等多方面的指標是否符合試驗要求,精神情況、皮毛、天然孔、排泄物及行為等方面狀況做好詳細記錄,不符合要求的豚鼠不能接收;其次,由于豚鼠在運輸、更換飼料、生存條件驟變等方面均會引起較大的應激反應,從而引發各種疾病,因此,在購入豚鼠后要設立一定的檢疫觀察周期,一般為1周左右,加強飼養管理,待豚鼠適應新環境、狀態趨于穩定后才能進行相關的檢驗或試驗。在條件允許的情況下,飼喂改良飼料(補充適量粗纖維)和飲用抗應激配方水(補充充足的維生素和電解質),有利于豚鼠對新環境的適應和營養的需求[2]。
2.1 飼養環境設施的要求 豚鼠天生體溫調節能力不強,消化系統、呼吸系統發育不完善,抗病能力較差,易感多種病原菌。因此,飼養環境對其正常的生活影響較大,對各環境要素尤其是溫度、濕度及空氣質量等較為敏感,在豚鼠飼養過程中應嚴格控制設施內各項指標的變化。設施應安裝空調和排風設施,溫度最好控制在18~22℃,如果溫度低于15℃或高于25℃都會造成疾病發生率上升,相對濕度控制在40%~70%,最大日溫差不宜超過4℃,噪音要控制在60分貝以下。最小換氣次數控制在8次/h以上,氨濃度過高易使豚鼠患肺炎,因此,要保證有足夠的新鮮空氣[1-6]。
2.2 飼料和飲水 作為實驗豚鼠的使用單位,必須從有相應級別資質的單位購買飼料,所購買飼料應符合實驗豚鼠的生長階段營養所需。由于豚鼠自身體內不能合成維生素C,因此,在飼料中一定要特別注意維生素C的補給,否則極易導致出現壞血癥。可將維生素C直接按需求添加入飼料或溶在水中,也可適當給予新鮮蔬菜,一般豚鼠維生素C需要量為每日1 mg/100g體重,特殊階段如生長、妊娠、泌乳期間和受到應激時,實際需要量每日為15~25 mg/100g。豚鼠對變質飼料特別敏感,常因此減食或廢食,可引起中毒甚或致死,一定要注意飼料的來源和衛生質量。日常的飼喂應定時定量,每天更換新鮮飲水,如果是自動飲水裝置,應經常檢查吸水管是否存在堵塞和漏水的情況。
2.3 嚴格遵守各項規章制度 建立完善的衛生消毒制度是做好飼養管理的基礎,對實驗豚鼠的環境設施、籠具設備、用具、飼料、飲水、墊料及其他輔料等應建立嚴格的清洗、消毒制度[7]。每日對豚鼠舍進行清掃消毒、清洗食糟,若有剩余飼料應棄去,重新加料,每批次試驗結束應及時對豚鼠舍進行清場消毒,人員進出動物實驗室應嚴格按照進出更衣消毒程序執行,飼養人員和技術人員均應經過上崗培訓,能夠在實際操作過程中按照實驗動物的飼養管理制度、衛生防疫制度和標準操作規程等各項規章制度嚴格執行。
3.1 防止交叉感染 作為實驗動物的使用單位,實驗動物設施內會存在多種實驗動物的情況,應注意各類實驗動物應分室飼養管理,應按試驗的性質在各規定的動物房內進行,不得混淆。不同動物的試驗、同種動物的不同制品試驗、同種制品的不同批次試驗要分別進行,防止交叉感染、影響結果判定。各個實驗動物室內嚴禁飼養與試驗無關的動物。
3.2 實驗動物福利 實驗動物是生命科學研究和生物醫藥產業重要的材料,而實驗動物福利不僅是保障其健康和快樂生活,更是為了獲得準確、可靠、可重復研究結果的重要保證[8]。試驗人員應遵循動物試驗的“3R原則”,在飼養過程中保證豚鼠有足夠的活動空間、舒適的生活環境,針對豚鼠對聲音敏感的特性,還應創造一個相對安靜的環境,避免過大的噪音給豚鼠造成恐慌。在試驗過程中應遵循“溫和保定,善良撫慰,減少痛苦和應激反應”的原則,盡可能減少對豚鼠的傷害和疼痛,保護實驗動物的福利。
豚鼠在日常使用過程中,由于其生理狀況容易受到飼養環境中多種因素的影響,運輸、飼料和飼養環境的更換等情況均會造成豚鼠機體抵抗力下降、衰弱、死亡等,同時還可能誘發各種隱性疾病,作為豚鼠的使用單位最重要的就是要盡量減少應激造成的影響。首先在購入豚鼠后要酌情延長檢疫觀察的周期,若有應激反應強烈的豚鼠,應挑出單獨隔離飼養,并加強飼養管理,增加維生素C的補給量,待豚鼠適應新環境、各項生理指標趨于穩定后才能進行相關試驗;部分應激反應嚴重且隔離飼養后未見改善的豚鼠可棄去,不建議治療,因為藥物的使用會造成生物制品檢定結果的不準確;為保證試驗數據的準確性,應嚴格遵守所制定的各項標準操作規程,對豚鼠影響比較大的因素如溫度、濕度、噪音等都必須進行嚴格的控制,從而為豚鼠創造一個穩定舒適的環境,為各項試驗的順利開展奠定基礎。