劉 鵬, 練 鋒, 倪 晨, 孫建明
(1.上海中醫藥大學附屬第七人民醫院男性病科,上海 200137;2. 上海中醫藥大學附屬第七人民醫院超聲診斷科,上海 200137)
臨床上不育患者最基本的檢查就是精液分析及精子形態學分析,以評估患者自發性受孕情況[1]及精子受精能力[2]。一般情況下,精液質量異常患者經全面檢查可找到問題根本,但臨床上尚有一部分原因不明的精液質量異常情況,這種不明原因的精液質量異常稱為特發性精液質量異常[3]。特發性少、弱、畸形精子癥約占不育男性的 30%[4],也是目前男科領域人們十分關注的熱點之一[3]。本研究對特發性少弱畸形精子癥患者精子形態學相關參數進行了分析。
113例特發性少弱畸形精子癥患者(觀察組)及39例特發性少弱精子癥患者(對照組)為2015年10月—2016年9月在上海中醫藥大學附屬第七人民醫院生殖門診就診的患者,年齡21~45歲。夫妻未采取避孕措施、正常性生活1年以上,已排除女方不孕因素。患者無泌尿生殖道感染,無外傷及手術史,超聲檢查未發現精索靜脈、睪丸、附睪、精囊明顯異常,無家族遺傳病史,無肝、腎等臟器嚴重疾病及精神疾病,精液細菌、支原體、衣原體、淋病奈瑟菌培養陰性,血清及精漿抗精子抗體陰性,血清性激素水平正常。少弱畸形精子癥及少弱精子癥的判斷根據《WHO人類精液檢查與處理實驗室手冊(第5版)》(簡稱WHO手冊5版)[5]中的標準:少弱畸形精子癥患者的精子濃度<15×106/mL,前向(progressive,PR)運動精子百分率<32%,正常形態精子<4.0%;少弱精子癥患者的精子濃度<15×106/mL,PR<32%。
1.2.1 精液及形態學分析 禁欲4~7 d,自慰法收集精液于清潔無菌試管內,于37 ℃液化待檢。按WHO手冊5版要求,利用清華同方計算機輔助精子分析系統及形態學分析軟件分析精液質量和精子形態(Diff-Quik染色法)。檢測精子頭部、頸部和中段、尾部異常百分率,過量殘留胞漿(excess residual cytoplasm,ERC)百分率,多重異常指數(multiple anomalies index,MAI),畸形精子指數(teratozoospermia index,TZI)和精子畸形指數(sperm deformity index,SDI)。
1.2.2 精漿指標分析 用卓越310型全自動生化分析儀(科華公司)檢測精漿α-葡糖苷酶活性(速率法)和鋅含量[1-(2-吡啶偶氮)-2-萘酚法],試劑盒均由南京欣迪公司提供。嚴格依照實驗室標準化操作程序文件操作,且每批檢測均設有室內質控品監測,以確保結果可靠。參考區間:精漿α-葡糖苷酶活性為109.63~570.76 U/L,精漿鋅含量為1.09~4.86 mmol/L。
采用SPSS 18.0軟件進行統計分析。數據呈偏態分布,以中位數(四分位數)[M(P25,P75)]表示,組間比較采用秩和檢驗。以P<0.05為差異有統計學意義。
觀察組與對照組比較,精漿α-葡糖苷酶活性、精子頭部異常百分率差異有統計學意義(Z值分別為-3.691、-3.772,P<0.01),其余各指標比較差異均無統計學意義(Z值分別為-1.358、-0.011、-0.082、-1.892、-0.375、-1.855、-0.253,P>0.05)。見表1。
MAI、TZI、SDI與精子頸部和中段、尾部異常百分率及ERC百分率呈正相關(P<0.01),而與精子頭部異常百分率和正常形態精子百分率無明顯相關性(P>0.05)。見表2。

表1 觀察組和對照組精液相關參數比較 [M(P25,P75)]

表2 特發性少弱畸形精子癥患者精子形態學參數的相關性分析 (r值)
精子形態學分析在精液檢查中必不可少,臨床上高畸形精子率可導致體內受精率降低和體外受精失敗[5]。因此,對精子形態學的研究越來越引起人們的重視。本研究結果顯示,觀察組精漿α-葡糖苷酶活性明顯低于對照組,且精子頭部異常百分率明顯高于對照組。有研究表明,精漿α-葡糖苷酶活性與精子形態有關[6-9],本研究結果與其一致,其機制目前尚不明確,但也有研究表明二者之間并無相關性[10]。本研究結果顯示觀察組與對照組患者精漿鋅含量差異無統計學意義(P>0.05),但觀察組相對偏低,精漿鋅含量是否影響精子形態報道不一[12-14],本研究與一些研究結果[14]一致,可能與研究樣本量少有關。另有研究顯示,特發性少弱畸形精子癥患者的精子頭部畸形率明顯高于特發性少弱精子癥患者,精子頸部和中段、尾部異常及ERC差異不明顯,說明大多數特發性少弱畸形精子癥患者的精子形態異常主要由頭部異常引起[11],與精子發生過程密切相關,精子發生過程中頂體會發生一系列變化,而頂體占精子細胞核前2/3,頂體異常即導致頭部畸形。雖特發性少弱畸形精子癥患者MAI、TZI、SDI與特發性少弱精子癥患者差異無統計學意義(P>0.05),但前者TZI和SDI均比后者大,說明前者體內生育力和體外受精能力稍低于后者。另外,特發性少弱畸形精子癥患者及特發性少弱精子癥患者SDI均>1.60,提示體外受精失敗有閾值[15],對體外受精-胚胎移植受精失敗有預測價值[16]。
本研究結果還顯示,觀察組患者MAI、TZI、SDI均與精子頸部和中段、尾部異常百分率及ERC百分率呈正相關,與精子頭部異常百分率和正常形態精子百分率無明顯相關性,同時,MAI、TZI、SDI均>1.60,提示自發性受孕及精子受精能力較低,說明觀察組患者的精子頸部和中段異常、尾部異常、ERC過多與體內外受精能力低也密切相關,并不是只有精子頭部異常與受精能力有關。特發性少弱精子癥的治療原則是應先藥物治療,改善精液質量及精子形態,無效時才可考慮輔助生殖技術治療[3]。
綜上所述,精子發生過程復雜,特發性少弱畸形精子癥病因不明,精子形態畸形可能與附性腺分泌功能有關,而且精子頭部、頸部和中段、尾部異常及ERC都可能是導致體內生育能力下降和體外受精失敗的原因。
[1] JEDRZEJCZAK P, TASZAREK-HAUKE G,HAUKE J, et al. Prediction of spontaneous conception based on semen parameters[J]. Int J Androl, 2008,31(5):499-507.
[2] FRANKEN D R, OEHNINGER S. Semen analysis and sperm function testing[J]. Asian J Androl,2012,14(1):6-13.
[3] 陸金春,黃宇烽. 特發性精液質量異常的診斷與治療[J]. 中華男科學雜志,2012,18(1):3-10.
[4] CAVALLINI G. Male idiopathic oligoasthenoteratozoospermia[J]. Asian J Androl, 2006,8(2):143-157.
[5] 徐潘,陳盛鐿,謝作剛. 畸形精子癥研究進展[J].浙江中西醫結合雜志,2014,24(5):474-476.
[6] MOUSTAFA M H, SHARMA R K, THORNTON J, et al. Relationship between ROS production,apoptosis and DNA denaturation in spermatozoa from patients examined for infertility[J]. Hum Reprod,2004,19(1):129-138.
[7] CAYLI S, SAKKAS D, VIGUE L, et al. Cellular maturity and apoptosis in human sperm:creatine kinase, caspase-3 and Bcl-XL levels in mature and diminished maturity sperm[J]. Mol Hum Reprod,2004,10(5):365-372.
[8] VIVAS-ACEVEDO G, LOZANO-HERNANDEZ R, CAMEJO M I. Markers of accessory sex glands function in men with varicocele: relationship with seminal parameters[J]. Can J Urol, 2011,18(5):5884-5889.
[9] 張紅燁,陸金春,盧坤剛,等. 精漿α葡糖苷酶全自動檢測方法的建立及評價[J]. 中華男科學雜志,2014,20(10):886-889.
[10] 劉睿智,王忠山,韓淑梅,等. 不育患者精漿α-1,4糖苷酶活性與精液參數的關系[J]. 生殖醫學雜志,2003,12(4):226-229.
[11] 王成榮,卞廷松. 特發性畸形精子癥相關基因研究進展[J]. 現代中西醫結合雜志,2014,23(10):1139-1140.
[12] FUSE H, KAZAMA T, OHTA S, et al.Relationship between zinc concentrations in seminal plasma and various sperm parameters[J]. Int Urol Nephrol, 2009,31(3):401-408.
[13] LIN Y C. Seminal plasma zinc levels and sperm motion characteristics in infertile samples[J]. Chang Gung Med J, 2000,23(5):260-266.
[14] 尹彪,劉紅杰,趙明,等. 精漿中鋅、果糖和肉堿含量與精液參數的關系[J]. 中華男科學雜志,2013,19(11):1051-1053.
[15] 朱躍. 不同密度梯度離心處理后精子形態的變化[J].中國優生與遺傳雜志,2012,20(5):120-121.
[16] 江偉杰,金帆,周黎明. 優選后精子畸形指數、頂體異常率、DNA碎片指數預測IVF受精失敗的價值[J]. 中華男科學雜志,2016,22(2):147-152.