超聲微血管成像檢測子癇前期患者胎盤組織微血管密度的臨床意義

陳麗娜，李寧寧，王淑霞，焦榮紅，唐增軍，王莉

(河北省人民醫院，石家莊050000)

子癇前期(PE)的臨床特征主要為孕20周后出現的高血壓和蛋白尿[1]，該病對孕產婦及胎兒的健康可造成嚴重威脅，可累及全身多個系統的疾病，是引起圍產期母嬰發病甚至死亡的重要原因。PE的基本病理生理改變為全身小血管痙攣，內皮損傷及局部缺血。患者子宮胎盤螺旋小動脈的直徑較正常孕婦明顯減小，且伴有內皮損害及胎盤血管急性動脈粥樣硬化樣改變，導致子宮胎盤血流灌注減少，胎盤功能下降，胎兒生長受限，胎兒窘迫[2]。通過無創的超聲技術早期發現胎盤微循環的改變，預測母兒不良結局并指導治療具有重要臨床意義。超聲微血管成像(SMI)可以計算胎盤微血管密度(MVD)，但其為間接檢查，所測得的SMI-MVD是否能準確反映PE孕婦胎盤微循環情況尚不明確。免疫組化染色檢測胎盤組織MVD(SP-MVD)是觀察孕婦胎盤微循環情況的金標準。本研究檢測了PE孕婦胎盤組織SMI和MVD，并分析其相關性，旨在觀察通過SMI檢測SMI-MVD觀察PE孕婦胎盤微循環情況的可行性。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇2016年3月～2017年6月河北省人民醫院收治的PE孕婦45例為PE組，納入標準：①符合2015年中華醫學會婦產科學分會妊娠期高血壓疾病學組發布的《妊娠期高血壓疾病診治指南》中PE的診斷標準；②單胎；③孕周29～37周；④年齡20～41歲；⑤無原發性高血壓、糖尿病、心臟病、腎病等并發癥及合并癥。入組患者年齡(30.84±4.45)歲，孕周(34.23±1.92)周。另選同期收治的先兆早產孕婦45例為對照組，符合上述納入標準的②～⑤條。入組患者年齡(29.44±4.76)歲，孕周(34.99±1.30)周。兩組孕婦的年齡、孕周相比P均>0.05。另收集兩組孕婦分娩新生兒出生體質量數據。本研究已獲醫院醫學倫理委員會批準，兩組孕婦均知情同意并簽署知情同意書。

1.2 胎盤SMI-MVD檢測 采用胎盤SMI檢測分娩前胎盤SMI-MVD。使用日本東芝公司生產的Aplio 500彩色超聲診斷儀，隨機配備SMI軟件，頻率4～9MHz，選取彩色量程范圍1.3～2.3 cm/s。檢查時機器調節參數均相同，且均采取盲法由具有5年以上超聲醫師資格的同一位超聲科醫師進行檢查，囑檢查者仰臥位，選取大小合適的取樣框，以清晰顯示胎盤微血管為準，彩色增益調整至小血管可以清晰的被檢測到的圖片留存。結果使用盲法，由兩位資深的超聲科醫生獨立觀察所拍攝圖像，計數超聲微血管密度(單位面積內血管條數，單位為n/cm2)，取均值。

1.3 胎盤SP-MVD檢測 兩組孕婦胎盤娩出后采用免疫組化二步法行CD34染色檢測SP-MVD[3]。胎盤娩出后，立即于胎盤母體面正中無鈣化處切取全層胎盤組織約2 cm×2 cm×2 cm，10%多聚甲醛液固定，包埋成蠟塊，層厚4 μm切片，采用免疫組化二步法行CD34染色，CD34兔抗人單克隆抗體購自Abcam公司，按照試劑盒說明書指導步驟進行操作。染色完成后顯微鏡下觀察，血管內皮細胞質被染成棕黃色。先在(×100)視野下觀察CD34染色陽性的血管，確定組織內微血管密集區，然后在(×200)視野下選擇5個不重復視野進行計數，計算微血管的平均值即微血管密度(MVD)[4]。著色清晰且與背景顏色明顯有差異的單個著色的內皮細胞、成群血管內皮細胞簇、管腔直徑≤100 μm的血管都計為一個微血管，是否有血管腔不作為計數微血管的必要條件，分支血管結構只要不相連也視為一個微血管。

1.4 統計學方法 采用SPSS 17.0 統計軟件。數據進行正態性檢驗和方差齊性分析后，兩組樣本符合正態分布且方差齊則采用成組t檢驗，否則采用非參數檢驗(秩和檢驗)。雙變量相關性分析采用Spearman法。P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組SMI-MVD、SP-MVD、新生兒出生體質量比較 PE組、對照組孕婦胎盤SMI-MVD分別為(0.37±0.12)、(0.45±0.11)n/cm2，SP-MVD分別為(104.13±10.008)、(116.44±8.013)條/HP，新生兒出生體質量分別為(1 991.44±504.28)、(2 525.56±377.46)g。兩組SMI-MVD、SP-MVD、新生兒出生體質量相比，P均<0.05。

2.2 PE組孕婦SMI-MVD與SP-MVD、SMI-MVD與新生兒體質量、SP-MVD與新生兒體質量的相關性 Spearman分析結果顯示PE組孕婦SMI-MVD與SP-MVD呈正相關性(r=0.244，P<0.05)，SMI-MVD與新生兒體質量呈正相關性(r=0.350，P<0.05)，SP-MVD與新生兒體質量呈正相關性(r=0.454，P<0.05)。

3 討論

PE是妊娠期特有的疾病，在全球范圍內該病發病率約為5%～10%[5]。可導致孕產婦心、腦、腎臟等重要臟器嚴重受損甚至死亡，圍生兒早產、生長受限、胎死宮內等不良結局。該病的病理生理改變為全身小血管痙攣、微循環障礙、臟器血液灌注減少[2]。而胎盤循環障礙，炎癥因子釋放是產生母兒并發癥的主要發病機制。目前臨床上常用的檢測胎盤血流血管的彩色多普勒技術，對胎盤的低速血流不敏感，無法準確檢測胎盤微循環狀態。SMI技術是一種在彩色多普勒的基礎上發展起來的高靈敏度、高時間分辨率的顯示彩色血流的新技術，能夠智能分析雜亂的運動信號，應用新的自適應性算法來鑒別并移除組織運動，可以探測到普通超聲探測不到的更加低速的血流信號，通過智能化測量和計算將組織運動的噪聲和真正的血流信息區分開，用獨特的信號處理技術顯示低速血流的信息，真實反映微細血流循環的灌注情況[6]，可以清楚的顯示出微細血流的動態變化情況，且運動偽像較少[7]。

SMI能夠探測到常規多普勒超聲探測不到的更加低速的血流信號[8]，如Wu等[9]使用超聲微血管成像顯示了肝臟中局灶性結節性增生的情況；Ma等[10]報道超聲微血管成像可檢測到比彩色多普勒成像更多的血流；Park等[11]在乳腺癌患者中用超聲微血管成像觀察到更多的微血管。本研究結果顯示PE組孕婦胎盤SMI-MVD明顯低于對照組，說明了PE孕婦胎盤微血管數量減少，存在胎盤微循環障礙。微血管標志物CD34可標記血管內皮，從而顯示血管。SP-MVD是評價微血管的分布情況的金標準[12]。本研究結果顯示PE組孕婦胎盤MVD明顯低于對照組，提示PE孕婦胎盤血管密度降低，與文獻[13]報道一致。 Coelho等[14]認為胎盤血管內皮損傷和微血管減少是PE兩個較為重要的病理學特征。PE患者胎盤微血管減少，血流灌注不足，可能導致胎盤缺血、缺氧，從而引起炎癥因子釋放，導致發病。本研究結果顯示PE孕婦SMI測得的胎盤SMI-MVD與SP-MVD有明顯相關性，說明SMI可較為真實地反映胎盤微循環狀態。

PE孕婦存在胎盤微循環障礙，導致胎兒生長受限、出生低體質量和其他并發癥[15]。本研究PE組新生兒出生體質量明顯低于對照組，并與SMI、MVD存在正相關關系，說明PE孕婦胎盤微血管密度減小與新生兒出生體質量之間存在聯系。而通過無創、簡便的超聲微血管成像技術檢測活體胎盤SMI可以了解胎盤微循環情況，對新生兒出生體質量有預測價值。

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