經(jīng)血也能變廢為寶

文/本刊記者 郭瀟雅

近日，中國醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院生殖二科主任譚季春教授告訴《中國醫(yī)院院長》，他們團隊所研發(fā)的自體經(jīng)血干細(xì)胞移植技術(shù)已相對成熟，通過從看似“廢品”的經(jīng)血中提取干細(xì)胞，治療宮腔粘連和薄型子宮內(nèi)膜等疾病，幫助孕婦有效備孕。據(jù)悉，該技術(shù)在全球?qū)偈讋?chuàng)，吸引了國內(nèi)外醫(yī)療同行的廣泛關(guān)注。

給“土地”施“肥料”

自體經(jīng)血干細(xì)胞移植技術(shù)是通過患者排出的月經(jīng)血，從中分離培養(yǎng)出經(jīng)血干細(xì)胞，在鑒定無病原體等污染后，經(jīng)過一段時間的培養(yǎng)擴增，將細(xì)胞移植到患者宮腔內(nèi)，隨后定期監(jiān)測患者子宮內(nèi)膜生長。在內(nèi)膜生長至7毫米以上時，給予患者合房指導(dǎo)或冷凍胚胎解凍復(fù)蘇移植，以達到備孕或妊娠的目的。

譚季春對該技術(shù)有個形象的比喻：女性的子宮內(nèi)膜就如同土地，胚胎就像種子，要在土地上生根發(fā)芽。正常的子宮內(nèi)膜厚度應(yīng)該在7毫米以上，如果土地過于貧瘠，胚胎很難成功種植，患者就無法當(dāng)上媽媽。所以，醫(yī)生從患者自己的月經(jīng)血中提取出干細(xì)胞，經(jīng)過體外培養(yǎng)增殖后，再將足量的經(jīng)血干細(xì)胞移植到子宮內(nèi)膜上。經(jīng)過一段時間的“修復(fù)”，使子宮內(nèi)膜生長、變厚，相當(dāng)于讓土地變得肥沃，種子自然就能生長了。

談起該技術(shù)的研發(fā)背景，譚季春告訴記者，2011年，印度醫(yī)生Nagori等人首次報道了應(yīng)用自體骨髓干細(xì)胞移植技術(shù)，使一例重度宮腔粘連患者內(nèi)膜功能恢復(fù)，最終成功妊娠的案例。隨后Singh等人證實通過自體骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植，顯著促進了6例難治性粘連患者的子宮內(nèi)膜增厚。

但是，自體骨髓干細(xì)胞移植具有一定的限制，因為獲取骨髓干細(xì)胞是有創(chuàng)傷的，患者較為痛苦且易感染，依從性很差。另外，自體骨髓干細(xì)胞移植中細(xì)胞數(shù)量和擴增、分化能力，會基于患者病情和年齡增長呈明顯下降趨勢。因此，譚季春將目光聚焦在自我更新能力超強的經(jīng)血干細(xì)胞。

2012年，譚季春帶領(lǐng)團隊著手開展了經(jīng)血干細(xì)胞分離培養(yǎng)方法的建立，以及治療宮腔粘連和薄型子宮內(nèi)膜的臨床試驗研究。他們首先分離培養(yǎng)出經(jīng)血干細(xì)胞，通過流式細(xì)胞術(shù)鑒定了干細(xì)胞表型，并通過成骨、成軟骨和成脂誘導(dǎo)分化鑒定了細(xì)胞的多潛能性，確定了細(xì)胞的增殖特性和傳代特性，然后逐步摸索出經(jīng)血干細(xì)胞傳代時機和病原檢測方法，解決了細(xì)胞移植后內(nèi)膜監(jiān)測和激素支持等一系列問題。經(jīng)過一年多的研究，譚季春團隊逐步建立了月經(jīng)血的收集、體外分離培養(yǎng)、鑒定及凍存方法，確定了技術(shù)的實施流程，取得了階段性成果。

然而，隨著研究的深入，譚季春團隊經(jīng)常遇到細(xì)胞培養(yǎng)時出現(xiàn)因細(xì)胞過少或細(xì)胞污染培養(yǎng)失敗的問題，譚季春坦言，在這道坎面前，曾多次想過放棄，直到北京大學(xué)博士生李萍萍的加入，才為該研究帶來了新的突破。

盛京醫(yī)院助理研究員李萍萍對記者說，研究團隊通過嚴(yán)格控制月經(jīng)血采集、細(xì)胞分離、培養(yǎng)等每一個細(xì)節(jié)，顯著改善了細(xì)胞培養(yǎng)的成功率以及病原檢測的合格率。針對嘗試過很多治療手段，但仍然長期不孕的難治性患者，團隊成員采用多輪經(jīng)血干細(xì)胞移植治療，最終使子宮內(nèi)膜能夠生長到支持妊娠的厚度（＞7mm），并且及時根據(jù)患者自身狀況，對患者進行輔助生殖助孕或合房指導(dǎo)，以期在內(nèi)膜形態(tài)和厚度最佳時期，實現(xiàn)胚胎的植入。2013年，一位孕婦通過自體經(jīng)血干細(xì)胞移植技術(shù)成功妊娠，譚季春團隊的研究終于獲得了成功。

譚季春教授科研團隊。

自體經(jīng)血干細(xì)胞移植技術(shù)所用儀器。

效果好、前景廣

目前，在應(yīng)用自體經(jīng)血干細(xì)胞臨床研究中，共35例患者參與，最大年齡45歲。其中，22例經(jīng)過治療的備孕患者子宮內(nèi)膜顯著增厚，有4例自然妊娠，均已分娩。研究團隊對18例患者進行了冷凍胚胎解凍移植，其中2例已經(jīng)分娩（1例2次足月分娩）、2例生化妊娠、2例胚胎停育，還有3例正在妊娠中。

35歲的劉女士告訴記者，她2014年結(jié)婚，結(jié)果要了兩年孩子也沒懷上。因為之前做過一次人流，可能是刮宮太狠，傷了子宮內(nèi)膜。宮腔鏡檢查提示宮腔嚴(yán)重粘連，行宮腔粘連手術(shù)。后經(jīng)激素治療半年，宮腔粘連情況未見緩解，子宮內(nèi)膜薄只有3～4mm厚。2016年，快要失去希望的劉女士來到盛京醫(yī)院找譚季春求助，在譚季春團隊的治療下，劉女士先后進行了全麻下行宮腔鏡宮腔粘連松解術(shù)和置環(huán)術(shù)、宮腔鏡下宮腔粘連取環(huán)術(shù)、宮腔鏡下子宮內(nèi)膜活檢術(shù)，并經(jīng)過兩次自體經(jīng)血干細(xì)胞移植術(shù)，最終成功修復(fù)子宮內(nèi)膜，并于2017年12月4日順利產(chǎn)下一名6斤6兩的男嬰。

譚季春表示，自體經(jīng)血干細(xì)胞移植術(shù)具有無創(chuàng)傷、無免疫排斥、無成瘤、無倫理爭議的特點，患者不僅依從性好，而且治療時間短、見效快。特別是經(jīng)過多次細(xì)胞移植后，宮腔內(nèi)膜形態(tài)恢復(fù)較好，這是目前常用的諸如宮內(nèi)置節(jié)育器、Foley氣囊導(dǎo)尿管、羊膜移植等無法具備的優(yōu)勢，因此受到了不少不孕女性的關(guān)注。

李萍萍說，一方面，隨著性觀念的解放，人工流產(chǎn)和妊娠相關(guān)刮宮手術(shù)逐年增多，導(dǎo)致子宮內(nèi)膜基底層損傷的宮腔粘連患者增多，該病可引發(fā)月經(jīng)量少、閉經(jīng)、不孕及反復(fù)流產(chǎn)等一系列并發(fā)癥，依據(jù)診斷標(biāo)準(zhǔn)和地域不同，該病發(fā)生率為6%～30%；另一方面，隨著二胎政策的放開，卵巢早衰成為婦科內(nèi)分泌領(lǐng)域的常見疾病，卵巢早衰不僅影響女性健康，還會帶來一系列心理及社會問題。因此，自體經(jīng)血干細(xì)胞移植術(shù)具有可觀的臨床應(yīng)用前景，為醫(yī)學(xué)研究開拓了新的方向。

譚季春建議，該技術(shù)適宜在輔助生殖中心開展，因為子宮內(nèi)膜損傷的患者大多因不孕癥入院，并且在內(nèi)膜恢復(fù)正常后，可以及時進行助孕治療最終實現(xiàn)妊娠。此外，該技術(shù)的開展還須具備開展相關(guān)臨床研究的審查批件、干細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)場地和批準(zhǔn)文件。

目前，譚季春研究團隊正在開展動物實驗，深入探討經(jīng)血干細(xì)胞治療宮腔粘連的分子機制，從而為推廣該技術(shù)的臨床應(yīng)用奠定理論基礎(chǔ)。同時，積極開展更加嚴(yán)格的隨機對照實驗，并期望在將來展開多中心研究，從而得到更加有力的證據(jù)來證實經(jīng)血干細(xì)胞治療宮腔粘連和薄型子宮內(nèi)膜的療效。