中性粒細胞體積分布寬度在潰瘍性結腸炎中臨床價值研究

屈 霄，李 凱，邱洪清

（張家港市第一人民醫院消化科，江蘇 蘇州 215600）

潰瘍性結腸炎（ulcerative colitis，UC）是炎癥性腸病兩大主要類型之一，該病特點是治療時間長，容易反復。因此，準確評估患者疾病活動性是指導臨床治療的重要依據。血沉（erythrocyte sedimentation rate，ESR）和C反應蛋白（C-reactive protein，CRP）常常作為炎癥標志物用于判斷和監測UC活動度[1]，但其血清水平與疾病活動度及病情嚴重程度往往存在不相符合。近年來，有研究發現活動期UC血清中中性粒細胞會發生形態學變化。本研究通過檢測潰瘍性結腸炎患者血清中中性粒細胞體積分布寬度（neutrophil volume distribution width，NVDW）值，探討NVDW值對活動期UC的診斷價值，為UC的診斷和疾病活動評估提供新的理論依據。

1 資料與方法

1.1 研究對象 收集本院2015年3月～2016年12月所有診斷為潰瘍性結腸炎的患者病例作為疾病組，共84例，其中男52例，女32例，年齡28～75歲。UC診斷標準參考《炎癥性腸病診斷與治療的共識意見（2012年，廣州）》[2]，排除標準：合并感染和（或）炎癥性疾病患者。選取同期健康體檢人群80例作為對照組，其中男20例，女20例，年齡24～70歲。兩組患者臨床資料比較差異無統計學意義。

1.2 疾病組活動度評分 采用Sutherland疾病活動指數(DAI)評估UC疾病活動度[3]，評估標準如下，①腹瀉：正常，0分；1～2次/d，1分；3～4次/d，2分；超過5次/d，3分。②便血：無，0分；少量，1分；明顯，2分；血便為主，3分。③腸黏膜：正常，0分；輕度易脆，1分；中度易脆，2分；重度易脆伴滲出，3分。④病情評估：正常，0分；輕，1分，中，2分；重，3分。其中0～2分為緩解，3～5分為輕度活動，6～10分為中度活動，11～12分為重度活動。其中緩解期26例，活動期58例，其中輕度14例、中度28例、重度16例。

1.3 方法 研究對象禁食8 h后，用EDTA抗凝真空管采集全及2 ml，運用LH750全自動血細胞分析儀及其配套試劑檢測中性粒細胞平均體積（MNV）、中性粒細胞體積分布寬度（NVDW），用ELISA法檢測血清C-反應蛋白（C-reactive protein，CRP）水平，所有標本于4 h內完成。

1.4 統計學方法 運用SPSSP17.0進行統計學分析，計量資料以表示，采用單因素方差分析進行組間比較。采用ROC曲線計算曲線下面積、敏感性和特異性。

2 結果

2.1 兩組MNV、NVDW及血清中CRP水平比較 疾病組MNV、NVDW及血清中CRP水平高于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05），見表1。

表1 兩組MNV、NVDW、血清CRP比較（Table1 The comparison of MNV,NVDW and CRP between the two groups

表1 兩組MNV、NVDW、血清CRP比較（Table1 The comparison of MNV,NVDW and CRP between the two groups

注：與正常組比較，aP＜0.05

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2.2 各期潰瘍性結腸炎MNV、NVDW、CRP水平 疾病組活動期MNV、NVDW、CRP水平均高于緩解期（P＜0.05），并且其水平隨潰瘍性結腸炎患者病情嚴重程度增加而增高（P＜0.05），見表2。

表2 各期潰瘍性結腸炎MNV、NVDW、CRP水平Table2 The level of MNV,NVDW and CRP in various stages of UC

表2 各期潰瘍性結腸炎MNV、NVDW、CRP水平Table2 The level of MNV,NVDW and CRP in various stages of UC

注：與緩解期比較，bP＜0.05；與輕度比較，cP＜0.05；與中度比較，dP＜0.05

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2.3 MNV、NVDW、CRP血清水平診斷活動期UC的ROC曲線分析 ROC曲線下面積越大，表明其診斷效果越好。約登指數亦稱正確指數，指靈敏度和特異度之和減去1，取最大的約登指數作為最佳的診斷切割點。三者對活動期UC的診斷性能指標見表3、圖1。

表3 MNV、NVDW、CRP對活動期UC的診斷價值比較Table3 The diagnostic value of MNV,NVDW and CRP in active UC

圖 1 MNV、NVDW、CRP的ROC曲線Figure1 ROC curves of MNV,NVDW and CRP

2.4 NVDW對UC輕、中、重度的最佳診斷閾值 為進一步對活動期UC進行病情分度，利用ROC曲線分析并得出MNV在輕、中、重度 UC的參考范圍為 146.7～154.5、154.6～169.1、＞169.2，NVDW的參考范圍，分別為 21.5～27.3、27.4～33.5、＞33.5。

3 討論

潰瘍性結腸炎主要發生于直結腸，病變局限于腸黏膜及黏膜下層，近年來，有研究認為其發病機制與基因易感性人群中體內腸道菌群和腸黏膜免疫應答平衡失調有關[4]。目前UC的主要治療原則為維持和誘導緩解，且因為本病缺乏較為有效、快捷的檢測指標，因此在臨床治療效果的判定方面亦較為麻煩。近年來有許多血清和糞便標志物應用于臨床，如CRP、ESR、核周型抗中性粒細胞胞質抗體、髓過氧化物酶、IL-6等，但由于腸黏膜炎癥的部位不同、疾病病程不同、服用的藥物因素及是否合并腸道感染等均可能影響著這些指標的變化，以致于這些指標不能準確地預測疾病的發展狀態[5]。因此，目前臨床上急需簡便易測可靠的生物學指標，用于潰瘍性結腸炎的診斷和疾病預后的評估。

中性粒細胞在維持腸道穩態過程中發揮重要作用。它們通過清除透過腸黏膜上皮細胞的有害微生物，在腸腔與機體間形成一道至關重要的防御屏障。同時，當腸內發生炎癥時，中性粒細胞能夠募集大量的免疫細胞，并促進活性介質釋放來緩解炎癥，促進黏腸膜愈合。然后，中性粒細胞同樣會促進一些促炎癥因子、蛋白酶、過氧化物的釋放，因此過度的中性粒細胞活化，最終會導致組織損傷[6-7]。有研究報道，UC患者外周循環中存在過度活化的中性粒細胞[8]。在炎癥激活過程中，中性粒細胞除體積增大外，其不穩定性和外形也會發生變化[9]。McCarthy等[10]通過使用定量光學顯微鏡觀察血細胞時發現，與正常人群和緩解期IBD患者比較，活動期IBD患者外周血中有大量極化的中性粒細胞。因此，在潰瘍性結腸炎急性活動期，檢測中性粒細胞體積或可以反映出腸內炎癥水平，有助于評估病情和疾病診斷。

LH750全自動血細胞分析儀是一種特殊結構的流式細胞儀，其可以快速檢測出全血中中性粒細胞的體積（Vole）、傳導性（Conductivity）、光散射（Scatter）的參數，即VCS參數，并得出所有參數平均值如中性粒細胞平均體積（MNV），以及樣本標準差值（Standard Deviation，SD值），也稱中性粒細胞體積分布寬度（NVDW）。NVDW反映了中性粒細胞體積大小的差異性，其值增大說明患者中性粒細胞體積大小不均一程度增加。因此，MNV、NVDW值可以反映中性粒細胞核的形態變化和中性粒細胞反應性改變。有報道[9，11-12]，在細菌感染或敗血癥時，患者中性粒細胞形態學發生改變，而NVDW值變大反映了這一變化，推測NVDW對于炎癥診斷具有一定價值。

通過本次研究我們發現，UC患者MNV、NVDW明顯高于正常組，說明MNV、NVDW對UC診斷具有重要價值。同時MNV、NVDW水平隨UC疾病活動度的增加而上升，提示MNV、NVDW水平可用于判斷UC炎癥的嚴重程度。此外，MNV、NVDW在UC活動期高于緩解期，推測其可以用于評估UC的治療效果。

CRP長期作為活動期UC的輔助診斷、病情判斷、療效評估的重要指標，但其對診斷UC的特異性不強[13]。本研究中，通過ROC曲線可以看出，MNV、NVDW的曲線下面積和約登指數均明顯高于CPR，表明MNV、NVDW在UC診斷中具有較高的敏感性、特異性和準確性，且其診斷價值明顯高于CPR。雖然臨床中CRP對UC活動性起到參考價值，其值越大，提示疾病活動性越大，但其沒有具體的濃度范圍用于評估輕、中、重度UC。本研究利用ROC曲線分析出輕、中、重度UC的MNV、NVDW范圍，有助于為UC疾病病情評估起到一個參考作用。

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