4例布魯菌感染病例分析

馬淑青， 袁曉明

（1．大連醫科大學附屬威海市立醫院中心實驗室，山東 威海 264200；2.山東省榮成市虎山畜牧獸醫站，山東 榮成 264300）

布魯菌病是由布魯菌引起的一種重要的動物源性人獸共患病。我國西北部牧區為布魯菌病高發區。但隨著國家畜牧業及旅游業的發展，來自疫區的染病牲畜的病原菌極可能經消化道、皮膚黏膜、呼吸道等途徑侵入人體而引起感染或發病。當前布魯菌病在城市的流行出現了新特點，即多發、分散的點狀流行。臨床癥狀主要是反復不規則發熱、盜汗、乏力、 關節痛等[1]。臨床癥狀與普通的感冒相似，易引起臨床誤診，也因此易被人們忽視，使該病未能得到及時診治。2016年1—11月在大連醫科大學附屬威海市立醫院確診了4例布魯菌病病例。

1 病例介紹

2016年1—11月在大連醫科大學附屬威海市立醫院就診的4例虎紅平板血清凝集試驗陽性患者血培養顯示布魯菌陽性。按照《布氏桿菌病診斷標準》（WS269-2007），根據流行病學接觸史、臨床特點及實驗室陽性結果臨床診斷為布魯菌病。4例患者的臨床特征見表1。

表1 4例布魯菌病患者的臨床資料

2 實驗室檢測

2.1 一般實驗室檢測

4例患者白細胞計數為（1.90～6.95）×109/L，中性粒細胞比例為37.80%～78.70%，降鈣素原為（0.08～2.30）ng/mL，C反應蛋白為7.54～21.70 mg/ L，肝、腎功能正常，紅細胞沉降率比正常人略高。見表2。

2.2 病原學檢測

2.2.1 血清凝集試驗 采集血液樣本進行虎紅平板血清凝集試驗和試管法血清凝集試驗（試劑及儀器均由北京威瑞谷生物有限公司提供），按照產品說明書進行操作。

表2 4例布魯菌病患者實驗室的檢測結果

2.2.2 血培養 采集患者靜脈血置血培養瓶（雙側雙瓶）中送檢，經Bact/Alert120血培養儀培養。當培養瓶陽性報警后，用注射器抽取瓶內培養物進行革蘭染色和柯氏染色，鏡檢并轉種血瓊脂平板，置36 ℃、5% CO2溫箱中培養24～48 h，進行革蘭染色、鏡檢及初步生化鑒定。采用Vitek 2 Compact微生物鑒定儀及其配套的GN鑒定卡和快速尿素酶試驗進行菌種鑒定。以上試劑及儀器均由法國生物梅里埃公司提供。

血培養報陽時間為2.5～4 d，只有需氧瓶報警。報陽生長曲線特點：48 h左右出現較短的生長期且很緩慢，生長期對應的中軸較短，穩定期很短。取血培養陽性的培養物涂片、革蘭染色并接種到BAP和麥康凱培養基，置36 ℃5%CO2溫箱中培養，24 h形成很細小的菌落，幾乎看不到，48 h后形成灰白色、圓形、邊緣整齊的細小菌落，麥康凱培養基上不生長（圖1）。革蘭染色鏡檢可見細小的革蘭陰性短球桿菌，兩端鈍圓，像平鋪的細沙（圖2）。柯氏染色布魯菌被染成紅色，其他桿菌被染成了藍色（圖3）。4株細菌經Vitek 2 Compact微生物鑒定儀初步鑒定為馬耳他布魯菌且15 min內尿素酶試驗呈陽性（圖4）。

據血清凝集試驗陽性、血培養的菌落特點、革蘭染色特點及初步生化鑒定結果，判定病原菌為布魯菌，結果已經得到威海市疾病預防控制中心確證。

圖1 布魯菌48 h在BAP上的菌落

圖2 布魯菌革蘭染色形態

圖3 布魯菌柯氏染色形態

圖4 布魯菌15 min尿素酶陽性

3 討論

臨床診斷布魯菌病主要依賴于患者病史、接觸史、體征等流行病學特征，微生物培養結果及血清免疫學試驗[2]。全面詢問病史是診斷布魯菌病的重要途徑，其中牲畜（牛、羊、豬）接觸史和多汗、乏力、關節痛、波浪熱為布魯菌病的主要特征[3]。但近年來散在的布魯菌病患者臨床表現多種多樣，常不具備典型特征，發熱、盜汗、乏力、關節痛等癥狀都不明顯。在本研究的4例布魯菌病患者中工人3例、農民1例，臨床癥狀就是普通I型流行性感冒癥狀，生活環境及居住衛生條件較好，2例近期有飲鮮羊奶史，2例無明顯的牛、羊等接觸史。其中1例還伴有血小板減少，曾被臨床懷疑布尼亞病毒感染。使用頭孢等多種抗菌藥物治療后效果不明顯。反應患者細菌感染的指標如白細胞計數、中性粒細胞比例、C反應蛋白及降鈣素原均不高或輕度升高，這更容易使臨床誤診為病毒感染或其他感染。最后實驗室血培養顯示布魯菌陽性而明確診斷，給予四環素和利福平治療后患者體溫恢復正常。因此對發熱的患者重視血培養及實驗室人員對布魯菌血培養特點熟練掌握，對幫助臨床早期診斷至關重要。布魯菌的生長曲線不同于葡萄球菌、大腸埃希菌、非發酵菌、真菌。非發酵菌及真菌的生長曲線雖然生長期平緩，穩定期也很短，但陽性報警時間平均為18.8 h[3]。葡萄球菌、大腸埃希菌生長期一般很陡，平均報警時間一般不會超過24 h[4]。大連醫科大學附屬威海市立醫院分離的4例布魯菌的生長曲線與非發酵菌相似，陽性報警時間為2.5～4 d，平均3.25 d，生長期平緩[5]。本研究與郭素芳等[6]報道的布魯菌生長曲線及報陽時間相符。因此當微生物實驗人員看到這樣的生長曲線時，應高度懷疑布魯菌，接下來的任何操作須注意生物安全。不建議做該菌的藥物敏感性試驗，大多數的布魯菌治療失敗的原因不是細菌耐藥[7]。

布魯菌侵襲力較強，可以通過黏膜、 完整皮膚、 呼吸道和消化道感染人類。因此，應提高對布魯菌及其流行病學的認識。氣溶膠是實驗室獲得性感染的主要原因，國內外文獻有實驗室暴發感染的報道[8-10]。因此對實驗人員，一定要做好生物安全的防護工作，防止交叉感染。

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