眼底血管造影劑致尿總蛋白定量檢測結(jié)果異常一例報道

邵文琦， 吳 炯， 吳衛(wèi)云， 郭 瑋， 潘柏申

（復旦大學附屬中山醫(yī)院檢驗科，上海 200032）

眼底血管造影術(shù)（fluorescein fundus angiography，F(xiàn)FA）[1]是目前眼科診斷眼底疾病常用的檢查方法之一，對疾病的診療具有重要意義。本研究報道了1例患者在行眼底血管造影術(shù)后尿總蛋白檢測結(jié)果出現(xiàn)明顯異常的情況，并對此進行了原因分析。

1 病例資料

患者女，58歲。因“3個月前無明顯誘因出現(xiàn)視物模糊，無復視，視力下降”來復旦大學附屬中山醫(yī)院就診。曾于9年前當?shù)蒯t(yī)院體檢發(fā)現(xiàn)血糖增高，復診確診為糖尿病。予二甲雙胍1片口服，后未規(guī)律檢測血糖。為完善檢查以便進一步診斷和治療，于2017年1月6日由復旦大學附屬中山醫(yī)院收治。

入院查體：體溫36.5 ℃，心率80次/min，呼吸20次/min，血壓19.95/11.97 kPa。眼壓：右眼2.46 kPa（18.5 mmHg）、左眼2.00 kPa（15.0 mmHg）。血管B超提示雙側(cè)頸動脈粥樣硬化。肌電圖提示右側(cè)正中神經(jīng)、腓總神經(jīng)神經(jīng)傳導速度減慢且波形離散。臨床診斷：2型糖尿病、2型糖尿病周圍血管病變、2型糖尿病周圍神經(jīng)病變、2型糖尿病視網(wǎng)膜病變。

2 結(jié)果

2.1 試劑與儀器

ROCHE MODULAR P800全自動生化分析儀（瑞士羅氏公司），尿液/腦脊液總蛋白檢測試劑盒為原裝配套試劑（反應類型：兩點終點法；反應時間：10 min；讀數(shù)點：16/34；主/副波長：505/700 nm；樣本量：15 μL；試劑量：試劑1為250 μL，試劑2為100 μL）。眼底血管造影劑為熒光素鈉注射液（C20H10Na2O5，美國Alcon公司）。

2.2 實驗室主要檢驗項目及結(jié)果

2017年1月6日主要檢驗項目結(jié)果見表1。

臨床擬對患者進一步行眼底激光治療，因此于2017年1月7日對患者行FFA。檢查顯示：視乳頭陰性，視網(wǎng)膜見散在出血及滲出，累及黃斑，右眼為甚。FFA診斷：雙眼重度非增殖性糖尿病視網(wǎng)膜病變，黃斑水腫。

2017年1月8日復查24 h尿總蛋白定量結(jié)果，與1月6日的檢測結(jié)果相對偏差高達557.89%，24 h尿總蛋白定量結(jié)果相對偏差高達500.00%。見表1。

表1 2017年1月6日及8日主要檢驗項目結(jié)果及相對偏差

2.3 結(jié)果分析

分析2017年1月8日尿總蛋白項目的檢測反應曲線，樣本加入后反應吸光度（A）值即刻達到0.667 9，見圖1。患者樣本性狀呈明顯的熒光黃色，見圖2。

圖1 2017年1月8日患者尿總蛋白的檢測反應曲線

圖2 2017年1月8日患者尿液樣本性狀

尿總蛋白試劑為原裝配套試劑，結(jié)合病史考慮該樣本為眼底熒光造影劑對檢測方法產(chǎn)生干擾，聯(lián)系臨床，1月8日的尿總蛋白和24 h尿總蛋白定量結(jié)果報告為污染。

2.4 復查結(jié)果

2017年1月11日復查24 h尿總蛋白定量結(jié)果，尿總蛋白為0.10 g/L，尿白蛋白為10.0 mg/L，24 h尿總蛋白定量為0.17 g/24 h，24 h尿白蛋白為17.0 mg/24 h，與1月6日檢驗結(jié)果相符。

3 討論

尿液總蛋白的測定有著悠久的歷史[2]，常用于腎病、糖尿病或妊娠高血壓等疾病的診斷和治療監(jiān)測。尿液總蛋白并非定義明確的一種物質(zhì)，而是一類物質(zhì)的統(tǒng)稱，主要包括白蛋白、球蛋白和小分子蛋白。尿液總蛋白的檢測方法主要分為酸沉淀法及染料結(jié)合法2種[3]。這2種方法各有優(yōu)缺點。酸沉淀法使用的酸主要有三氯乙酸[4]和磺基水楊酸，其主要原理是尿液中蛋白質(zhì)與酸反應產(chǎn)生濁度，通過濁度的變化反映蛋白質(zhì)濃度。該方法的主要缺點是酸-蛋白沉淀物不穩(wěn)定，蛋白質(zhì)濃度較高時易產(chǎn)生絮狀凝固，影響濁度檢測。染料結(jié)合法主要包括考馬斯亮藍法及鄰苯三酚紅-鉬酸鹽法，其主要原理是通過染料與氨基酸結(jié)合引起A值的變化來反映蛋白質(zhì)濃度。該方法的主要缺點是檢測用的染料會污染玻璃及塑料制品，易造成生化分析儀的損傷，故自動化儀器檢測尿總蛋白較少采用染料法。酸沉淀法和染料結(jié)合法對尿總蛋白中不同組分的檢測敏感性各不相同，這就造成了不同方法間尿液總蛋白檢測的一致性較差[5]。

本實驗室使用的尿液/腦脊液總蛋白檢測試劑盒采用芐索氯銨[6]作為表面活性劑，在堿性環(huán)境下與蛋白質(zhì)形成穩(wěn)定、均勻的濁度。芐索氯銨與尿液蛋白質(zhì)反應產(chǎn)物的吸收峰在505 nm處。復旦大學附屬中山醫(yī)院使用的眼底血管造影劑為熒光素鈉注射液，其最大吸收波長為493.5 nm，在酸性條件下熒光特性會消失，在堿性條件下又會出現(xiàn)。BLOOM等[7]和KOUMANTAKIS等[8]分別報道了熒光素鈉對檢驗項目的干擾情況，熒光素鈉在堿性環(huán)境下會干擾芐索氯銨方法，造成假陽性結(jié)果。鑒于熒光素鈉一般在行FFA檢查后24～36 h排出體外[9]，故建議此類患者可于FFA檢查36 h后留取尿液標本檢測總蛋白。

藥物干擾是檢驗項目干擾的重要來源[10]。廠商說明書中往往會列舉目前已知的干擾檢測方法的藥物，但如何識別未知藥物的干擾，發(fā)現(xiàn)異常的檢驗報告依然是一線檢驗工作者面臨的重大挑戰(zhàn)。因此，“多次結(jié)果比較”、“不同項目間的邏輯關系”等審核報告的方法往往是識別此類異常報告的主要方法。尿總蛋白及尿白蛋白存在較大的生物變異度，個體內(nèi)變異分別為35.5%和36.0%。若短時間內(nèi)相同項目的結(jié)果超過個體內(nèi)變異，則需警惕異常結(jié)果的出現(xiàn)。本例患者3 d內(nèi)連續(xù)2次尿總蛋白檢測結(jié)果的相對偏差達557.89%，24 h尿總蛋白定量結(jié)果的相對偏差達500.00%，遠超正常的生物學變異，應引起報告審核人員的重視。體內(nèi)總蛋白最主要的組成成分是白蛋白，一般占70%左右。本例患者尿總蛋白濃度急速上升而尿白蛋白水平正常，也應引起報告審核人員的重視。由此可見，從臨床意義接近的不同項目之間的邏輯關系能有效發(fā)現(xiàn)異常檢驗報告。臨床實驗室工作人員應結(jié)合患者病情對檢測結(jié)果進行綜合分析及判斷，以免影響報告的準確性，進而影響下一步的診斷和治療。

[1] TOMIYASU T，HIRAHARA S，NOZAKI M，et al. Evaluation of diabetic retinopathy with ultrawide field fluorescein angiography[J]. Nippon Ganka Gakkai Zasshi，2015，119（11）：807-811.

[2] IWATA J，NISHIKAZE O. New micro-turbidimetric method for determination of protein in cerebrospinal fluid and urine[J]. Clin Chem，1979，25（7）：1317-1319.

[3] HOHNADEL D C，KOLLER A. Method in Clinical Chemistry[M]. St. Louis：C. W. Mosby Co.，1987：35-45.

[4] CHEUNG C K，MAK Y T，SWAMINATHAN R.Automated trichloroacetic acid precipitation method for urine total protein[J]. Ann Clin Biochem，1987，24（Pt 2）：140-144.

[5] TIETZ N W. Fundamentals of clinical chemistry[M].7th ed. Philadelphia，Pa：WB Saunders Co，2014：629.

[6] LUXTON R W，PATEL P，KEIR G，et al. A micromethod for measuring total protein in cerebrospinal fluid by using benzethonium chloride in microtiter plate wells[J]. Clin Chem，1989，35（8）：1731-1734.

[7] BLOOM J N，HERMAN D C，ELIN R J，et al.Intravenous fluorescein interference with clinical laboratory tests[J]. Am J Ophthalmol，1989，108（4）：375-379.

[8] KOUMANTAKIS G，WYNDHAM L. Fluorescein interference with urinary creatinine and protein measurements[J]. Clin Chem，1991，37（10 Pt 1）：1799.

[9] O'GOSHI K，SERUP J. Safety of sodium fluorescein for in vivo study of skin[J]. Skin Res Technol，2006，12（3）：155-161.

[10] KROLL M H，ELIN R J. Interference with clinical laboratory analyses[J]. Clin Chem，1994，40（11 Pt 1）：1996-2005.

上海市臨床檢驗質(zhì)量控制中心完成 2017年第二次臨床檢驗專業(yè)飛行檢查

上海市臨床檢驗質(zhì)量控制中心于2017年11月22至24日開展了2017年第二次飛行檢查。本次飛行檢查共涉及全市16個區(qū)的331家醫(yī)療機構(gòu)的337家臨床實驗室。

337家實驗室中有326家實驗室回報了結(jié)果，11家實驗室未回報結(jié)果。未回報結(jié)果的原因主要是醫(yī)療機構(gòu)整體關閉、檢驗科關閉，檢驗項目外送、醫(yī)療機構(gòu)搬遷停業(yè)以及項目暫停檢測等。

本次飛行檢查共涉及4個計劃，其中HPV DNA高危型檢測(不分型)、HPV基因分型檢測2個計劃各實驗室成績均為合格。全血細胞計數(shù)計劃有3家不合格，實驗室出現(xiàn)不合格的原因主要是使用非配套檢測系統(tǒng)，儀器維護、保養(yǎng)和校準不到位。細菌性陰道病唾液酸酶測定計劃合格率為92.86%，比往年略有上升，出現(xiàn)不合格的原因主要是檢測采用的試劑盒質(zhì)量不佳以及實驗室對此項目重視程度不夠，部分品牌試劑盒合格率偏低，需要進一步關注。

本次飛行檢查同時對第一次飛行檢查出現(xiàn)項目評價為“不合格”的實驗室進行了項目復查，其中有19家醫(yī)院復查不合格。下階段，中心將選派有關專家深入醫(yī)院實驗室進行現(xiàn)場指導，分析查找原因，協(xié)助改進檢驗質(zhì)量。