靈芝濃縮丸制備工藝研究

葉輝巖 ，馬進(jìn)原 ，毛景華 ，出瑋婧 ，朱 鉉

（1．廈門大學(xué)附屬第一醫(yī)院，福建 廈門 361003；2．廈門大學(xué)藥學(xué)院，福建 廈門 361005；3．武夷山元生泰生物科技有限公司，福建 武夷山 354300）

靈芝是擔(dān)子菌綱多孔菌科（Polyporaceae）靈芝屬（Ganodelma）真菌赤芝 Ganodelma lucidum(Leyss．exFr．)karst和紫芝 Ganodelma sinense zhao，xu et zhang的干燥子實體。赤芝，苦、平、無毒，主治胸中結(jié)、益心氣、補(bǔ)中、增智慧、不忘；紫芝，甘、溫、無毒，好顏色、治虛勞、治痔[1]?，F(xiàn)代藥理研究發(fā)現(xiàn)，靈芝具有調(diào)節(jié)人體神經(jīng)系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)機(jī)能，抗炎抑菌[2]，調(diào)血脂[3]、血糖[4]，調(diào)理肝臟各項機(jī)能[5]，抑制癌癥發(fā)展[6－7]等作用。靈芝所含化學(xué)成分復(fù)雜，以多糖類、三萜類為主要藥效成分[8]。市面上的靈芝制劑多以簡單的口服復(fù)方制劑或藥材粉末膠囊為主，往往靈芝子實體中藥效成分的含量有限，造成患者需要服用大量的藥物才能達(dá)到預(yù)期效果，大大降低了患者用藥的順應(yīng)性，既無法得到突出的藥效，也因為藥物的生物利用度低造成此味貴重藥材的浪費。濃縮丸是在水丸基礎(chǔ)上改進(jìn)而成的現(xiàn)代劑型，系指藥材或部分藥材提取清膏或浸膏，與處方中其余藥材細(xì)粉或適宜的賦形劑制成的丸劑[9]。其在繼承了水丸優(yōu)點的同時，也克服了水丸服用量大的缺點[10]，具有體積小、容易服用、適合機(jī)械化生產(chǎn)、不需要另加輔料等優(yōu)點。本試驗中通過對其處方、制備條件及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究，制備得質(zhì)量穩(wěn)定的靈芝濃縮丸。現(xiàn)報道如下。

1 儀器與試藥

1．1 儀器

AL104型精密分析天平（梅特勒－托利多儀器有限公司）；H－1650型臺式高速離心機(jī)（長沙湘智離心機(jī)儀器有限公司）；DHG－9023A型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱（上海精宏實驗設(shè)備有限公司）；KQ－250E型超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）；ZBS－6G型智能崩解儀（上海優(yōu)普科學(xué)儀器有限公司）；BY300A型小型包衣機(jī)（上海黃海藥檢儀器有限公司）。

1．2 試藥

破壁靈芝孢子粉，靈芝子實體提取物流浸膏，均由武夷山元生泰生物科技有限公司提供。

2 方法與結(jié)果

2．1 制備工藝考察

2．1．1 制備工藝

采用塑制法制備靈芝濃縮丸[11]。將破壁靈芝孢子粉與靈芝子實體提取物[12]按一定比例混勻制軟材。按照一定丸劑質(zhì)量要求（約為每粒0．1 g）將軟材分成相等質(zhì)量的若干小份，成丸。在一定溫度下干燥一段時間并打光，使所得藥丸的崩解時限與水分含量符合2015年版《中國藥典(一部)》的相關(guān)規(guī)定。

2．1．2 破壁靈芝孢子粉與靈芝流浸膏最佳配比選擇

取破壁靈芝孢子粉與靈芝提取物流浸膏。按1∶1，5 ∶9，1 ∶2，7 ∶16，3 ∶7，2 ∶5 比例混勻，制軟材。軟材的性狀與丸粒的性狀見表1?？梢?，當(dāng)藥粉與流浸膏的用量比例為1∶2時，軟材不黏器壁且容易成丸，丸劑表面光滑，無裂痕。故確定藥粉與流浸膏的用量最佳比例為1∶2。

表1 破壁靈芝孢子粉與提取物在不同用量比時軟材性狀與成丸情況比較

2．1．3 干燥時間選擇

按最佳比例(1∶2)制備適量丸粒。將所得丸粒全部置恒溫干燥儀中，60℃干燥。隨機(jī)選取20顆在干燥前精密稱定質(zhì)量，后每隔1 h測定所選取的20顆丸粒的總質(zhì)量。于干燥 3，6，9，12 h 時取的丸粒適量，根據(jù)《中國藥典》規(guī)定方法測定溶散時間與水分含量。

丸粒質(zhì)量考察：每烘干1 h便精密稱定20顆丸粒的總質(zhì)量，并觀察60℃下烘干時間與丸重之間的關(guān)系。結(jié)果見表2和圖1?？梢姡娓傻某跗谕枇５目傎|(zhì)量下降明顯，而當(dāng)烘干至5 h后丸重基本保持不變。

表2 干燥不同時間后丸劑質(zhì)量測定結(jié)果

圖1 靈芝濃縮丸丸粒質(zhì)量與烘干時間的相關(guān)曲線

崩解時間考察：分別取 60℃溫度下干燥 3，6，9，12 h時的丸粒，各1批，每批6顆，按照2010年版《中國藥典(一部)》附錄ⅦA崩解時限檢查法的規(guī)定，置智能崩解儀中，測定靈芝濃縮丸的崩解時間。結(jié)果見表3?？梢?，丸粒的崩解時限與干燥時間之間并無明顯的相關(guān)關(guān)系。干燥時間在3～12 h范圍內(nèi)丸粒的崩解時限均符合藥典規(guī)定(干燥2 h)。

水分含量考察：分別取烘干3，6，9，12 h時的丸粒，各20粒，粉碎至不存在直徑大于3 mm的顆粒后，采用2010年版《中國藥典(一部)》附錄ⅨH水分測定法，測定丸粒中所含的水分。干燥時間為3，6，9，12 h時，丸粒中水分含量分別為 7．667 6% ，6．285 8% ，6．273 1% ，6．395 0%。結(jié)果見圖 2。可見，烘干 6 h后丸粒中的水分含量基本維持不變。制備軟材時，藥粉與流浸膏用量為1∶2時所得的軟材軟硬適中，成丸容易，且丸粒表面光滑無裂痕。結(jié)合實際生產(chǎn)中成本因素的影響及以上試驗所得數(shù)據(jù)，可確定丸劑的最佳烘干時間為5 h。

2．1．4 打光工藝考察[13－14]

表3 干燥不同時間后丸粒的崩解時限測定結(jié)果

按最佳比例(1∶2)與最佳烘干時間(5 h)制備丸粒。待丸粒室溫冷卻后，稱取約為10 g的丸粒，倒入小型包衣鍋中。啟動包衣鍋，調(diào)整速率至40 r／min后，將95%乙醇緩緩倒入包衣鍋中，攪拌使丸粒表面潤濕均勻。待丸粒表面不黏手時，加入0．34%（加入丸粒的總質(zhì)量）的川蠟粉（100目），吸附于丸粒表面，此時，包衣鍋壁有少量余蠟；保持包衣鍋以40 r／min運轉(zhuǎn)30 min后，此時丸粒稍有光亮，表面無剩余蠟粉；再加入0．1%（加入丸粒的總質(zhì)量）川蠟粉，保持包衣鍋繼續(xù)運轉(zhuǎn)30 min。所得丸粒置60℃環(huán)境下干燥1 h，即得。所得丸粒表面光亮，顏色均勻。

圖2 靈芝濃縮丸水分含量與烘干時間的相關(guān)曲線圖

2．2 質(zhì)量檢查[15]

2．2．1 崩解時限

取6粒丸粒，按照2015年版《中國藥典(一部)》附錄ⅦA崩解時限檢查法，置智能崩解儀依法檢測。結(jié)果丸粒崩解時間分別為 24 min，47 min 20 s，83 min 41 s，93 min55 s；2 h內(nèi)溶出不完全，但無硬心，符合藥典要求。

2．2．2 水分含量

取丸粒2～5 g，粉碎，顆粒直徑小于3 mm，按2015年版《中國藥典(二部)》附錄ⅨH水分測定法測定丸粒中所含水分。結(jié)果丸粒的平均水分含量為7．32%，符合藥典規(guī)定（≤9%）。

3 討論

由于小劑量制備（靈芝破壁孢子粉用量約1 g）時水分揮發(fā)較快，與工業(yè)制造環(huán)境相差較大，而大劑量制備（靈芝破壁孢子粉用量約10 g）時水分揮發(fā)較慢，故本試驗中采用大劑量制備以確定最佳藥粉與浸膏用量比例。若是工業(yè)自動制丸，采用1∶2比例制丸。工業(yè)制丸速度較快，環(huán)境密閉，軟材所含溶劑不容易揮發(fā)，可保持一定的濕度而不必?fù)?dān)心軟材過干導(dǎo)致制成丸粒易開裂。故工業(yè)自動制丸宜采用比例1∶2，藥材不容易因為黏度太大而黏附于機(jī)械表面造成藥材的損失，實際的最佳比例還需進(jìn)一步試驗證明。

隨著烘干時間的延長，丸粒中水分含量下降明顯，與丸重和干燥時間的相關(guān)關(guān)系試驗結(jié)果相吻合。干燥12 h后的丸粒的水分含量上升，可能是因為干燥9 h后烘干對丸粒本身的水分含量影響很小，丸粒的水分含量變化不大。但在測量水分含量的過程中可能因為種種原因?qū)е峦枇Ｎ鼭瘢蚴欠Q量不準(zhǔn)確，均可能導(dǎo)致最終測得的水分含量比干燥9 h時的水分含量高。

靈芝濃縮丸的最佳制備工藝為靈芝破壁孢子粉用量與靈芝流浸膏用量比例為1∶2；制成的濕丸置60℃環(huán)境下干燥5 h后取出，室溫環(huán)境下冷卻。丸粒打光后，于60℃環(huán)境下干燥1 h。所得的濃縮丸外表美觀且具有一定的硬度，各項標(biāo)準(zhǔn)均符合2015年版《中國藥典(一部)》的相關(guān)要求。

[1]李時珍．本草綱目(校點本下冊)[M]．北京：人民衛(wèi)生出版社，1982：1711 －1712．

[2]劉 華，唐 瓊．中藥靈芝藥理作用研究[J]．中國醫(yī)藥導(dǎo)報，2009，6(5)：153 － 154．

[3]Rubel R，Dalla Santa HS，F(xiàn)ernandes LC，et al．Hypolipidemic and antioxidant properties of Ganoderma lucidum(Leyss:Fr)Karst used as a dietary supplement[J]．World Journal of Microbiology ＆Biotechnology，2011，27(5)：1083 － 1089．

[4]Li F，Zhang Y，Zhong Z．Antihyperglycemic Effect of Ganoderma Lucidum Polysaccharides on Streptozotocin－Induced Diabetic Mice[J]．International Journal of Molecular Sciences，2011，12(9)：6135．

[5]李 敏，仇雯倩，黃金華．靈芝三萜對小鼠肝損傷的預(yù)防和保護(hù)作用研究[J]．現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志，2009，18(32)：3933－3934．

[6]魏曉霞，李 鵬，許建華，等．靈芝三萜組分GLA體內(nèi)外抗腫瘤作用的研究[J]．福建醫(yī)科大學(xué)學(xué)報，2010，44(6)：417－420．

[7]黃艷娟，肖桂林．靈芝三萜藥理學(xué)作用研究進(jìn)展[J]．中醫(yī)藥導(dǎo)報，2008，14(9)：87 － 88．

[8]李 曄，朱忠敏，姚渭溪，等．靈芝三萜類化合物的研究進(jìn)展[J]．中國中藥雜志，2012，37(2)：165 － 171．

[9]肖紹玲，馬燎原．濃縮六味地黃丸制備工藝的優(yōu)化[J]．中成藥，2009，31(2)：299 － 300．

[10]杜宏偉．中藥濃縮丸與水丸生產(chǎn)過程質(zhì)量影響因素分析[J]．中國藥業(yè)，2011，20(22)：54 － 55．

[11]郭可錦．養(yǎng)壽丹濃縮丸的制備工藝及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究[D]．廣州：廣州中醫(yī)藥大學(xué)，2006．

[12]朱興貴，李 敏，張鄭華，等．泛制法在醫(yī)院濃縮丸制備中的運用經(jīng)驗[J]．海峽藥學(xué)，2015，27(1)：9 －10．

[13]沈烈行，蘇德民．蜜丸“打光”的工藝探討[J]．中藥材，1995，18(6)：283．

[14]朱志軍，蘇曉凱，陳耀升，等．頤正活脈濃縮丸打光工藝優(yōu)選[J]．中國實驗方劑學(xué)雜志，2012，18(14)：47 － 49．

[15]國家藥典委員會．中華人民共和國藥典（四部）[M]．北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2015：附錄11－附錄13．