氣相色譜內標法測定白酒中甲醇含量的確認及應用

狄紅梅，李艷敏，張立嚴

（北京順鑫農業股份有限公司牛欄山酒廠，北京 101301）

甲醇是白酒在發酵過程中產生的，為原料和輔料中果膠質內甲基酯分解而成。白酒中的甲醇一方面可以結合有機酸生成酯類，形成不同的酒香，另一方面甲醇自身具有較高的毒性，它在人體內積蓄，即使少量的甲醇也可以引起慢性中毒、頭痛惡心、視力模糊，5～10 mL即可造成失明，對神經系統尤其是視神經損害嚴重。我國是酒類消費大國，特別是白酒消費量居世界之首，因此嚴格控制白酒中甲醇的含量，保護人民群眾的生命安全是一項十分重要的工作。所以，甲醇含量是酒類產品衛生監督檢測的主要指標之一。因此國家對甲醇的含量做出了嚴格的規定，為了保證食品安全，必須建立精確有效的甲醇含量測定方法。GB 5009.266—2016《食品安全國家標準食品中甲醇的測定》，甲醇的檢測方法為氣相色譜毛細管柱內標法[1-4]，本實驗采用的是氣相色譜內標法測定甲醇的含量,測得甲醇的結果準確，穩定性好，同時能夠快速分離白酒中的其他不同風味成分，最終獲得一種簡單、快捷，同時具有較高的靈敏度和較好分離效果的新的檢測方法。

1 材料與方法

1.1 材料、儀器和試劑

樣品：酒廠生產的成品酒酒樣1#。

試劑：甲醇（99.5%），叔戊醇（99.5%），無水乙醇（99.9%），超純水。

儀器設備：Agilent7890B氣相色譜儀（配備7693液體自動進樣器）；FID檢測器；色譜柱，CPWax 57 CB 20～200℃（225℃），50 m×250 μm×0.2 μm；萬分之一電子天平。

1.2 實驗方法

1.2.1 儀器參數條件

程序升溫條件：初溫40℃，保持1 min，以4.0℃/min升到130℃，以20℃/min升到200℃，保持5 min。

優化后升溫條件：初溫35℃，保持3 min，以1.0℃/min升到50℃，以20℃/min升到200℃，保持5 min。

檢測器溫度：250℃。進樣口溫度：250℃。

載氣流量：1.0 mL/min。進樣量：1.0 μL。分流比：20∶1。

1.2.2 實驗試劑配制

乙醇溶液（40%vol）：量取400 mL乙醇，用超純水定容至1000 mL，混勻。

甲醇儲備液配制：準確稱取甲醇（99.50%）0.4992 g，用40%vol乙醇溶液定容至100 mL容量瓶中，搖勻備用。

叔戊醇（內標）溶液的配制：準確稱取叔戊醇（99.50%）1.9993 g，用40%vol乙醇定容至100 mL容量瓶中，搖勻備用。

1.2.3 標準曲線的制作

1.2.3.1 國標中甲醇的標準曲線配制步驟

分別吸取0.5 mL、1.0 mL、2.0 mL、4.0 mL、5.0 mL甲醇儲備液于5個25 mL容量瓶中，用40%vol乙醇定容至刻度，搖勻備用，各級別濃度見表1。

表1 甲醇的各級別濃度 (mg/L)

然后從5個不同濃度的容量瓶中各吸出10 mL樣液，再加入0.1 mL叔戊醇內標溶液，各樣品加入的內標濃度為198.93 mg/L，搖勻后進樣分析。

1.2.3.2 優化程序升溫條件測定甲醇含量的標準曲線

配制包括甲醇在內的12種風味物質混標，從現有的混標儲備液中吸出10 mL，1∶2梯度稀釋，共計8個濃度級別，最后加入濃度為198.93 mg/L的叔戊醇內標0.1 mL進樣分析并繪制標準曲線，各級別濃度見表2。

表2 混標中甲醇的各級別濃度 (mg/L)

本標準曲線是以甲醇的濃度為橫坐標，峰面積為縱坐標繪制的，得到甲醇的相關系數r為0.99997，單位是mg/L，見圖1。

2 結果與分析

甲醇回收率樣品的制備。

酒樣濃度：酒廠成品酒樣1#連續進樣6次，測定甲醇的含量為酒樣濃度。

加標酒樣濃度：從甲醇儲備液中吸取0.5 mL用本廠成品酒樣1#定容至50 mL，搖勻，吸出5 mL加30 μL內標連續進樣6次。

表3 國標方法測得甲醇含量的精密度與回收率

表4 優化程序升溫條件甲醇的精密度與回收率

圖1 12種混標中甲醇的標準曲線圖

精密度：根據GB 5009.266—2016《食品安全國家標準食品中甲醇的測定》中的要求，在重復性測定條件下獲得的兩次獨立測定結果的絕對差值不超過其算數平均值的10%。

2.1 國標方法測得的甲醇含量精密度與回收率

根據國標中的程序升溫條件測得的甲醇含量以及加標回收的情況見表3。

2.2 優化程序升溫條件甲醇的精密度與回收率

根據實際生產情況和檢測要求，優化程序升溫條件測得的甲醇含量見表4。

3 結果與討論

對于白酒中甲醇含量檢測方法的研究對比，按照GB 5009.266—2016《食品安全國家標準食品中甲醇的測定》中所要求的儀器設備條件、標準溶液的配制等進行的實驗，測得的成品酒樣1#的甲醇含量的平均值為50.8 mg/L，含量的精密度為5.57%，回收率為99.28%，回收率的精密度為0.74%。但根據實際生產需求，運用國標中的程序升溫條件不能將白酒中其他香味成分很好地分離，所以需要改變柱箱的升溫程序，來確保每個組分都能完全分離。配制包括甲醇在內的風味物質混標，程序升溫條件為初溫35℃，保持3 min，以1.0℃/min升到50℃，以20℃/min升到200℃，保持5 min的條件下進樣分析，制作標準曲線。用該方法測成品酒樣1#的甲醇含量為51.9 mg/L，含量的精密度為2.72%，回收率為100.08%，回收率的精密度為2.42%。從以上實驗結果可以看出，兩種方法測得的成品酒樣1#的甲醇含量分別為50.8 mg/L和51.9 mg/L，精密度為2.12%，符合精密度要求。

根據實際生產情況和檢測需要，改變程序升溫條件運用氣相色譜內標法測定甲醇的含量與國標中測定甲醇含量的方法所檢測出的甲醇含量的精密度為2.12%，能夠滿足國標中的精密度要求，所以運用優化升溫條件的方法測定白酒中甲醇含量的方法重現性好，回收率好，精密度高，操作簡單，靈敏度高，能夠提高工作效率，對我廠甲醇的檢測和白酒產品質量的控制提供技術指導，對維護白酒安全具有一定的促進作用。

[1]國家衛生和計劃生育委員會,國家食品藥品監督管理總局.食品安全國家標準食品中甲醇的測定：GB 5009.266—2016[S].北京：中國標準出版社,2017.

[2]李燕,張燕,張書文.氣相色譜法同時測定白酒中的特征香氣成分[J].化學分析計量,2008,17(6)：59-61.

[3]仲靖雨,陳智生.毛細管柱色譜法同時測定白酒中的醇、酯[J].化學分析計量,2008,17(3)：42-44.

[4]李永生,齊嬌娜,高秀峰.酒中甲醇測定方法的研究進展[J].釀酒科技,2006(1)：84-89.