液液萃取-氣相色譜-質譜聯用快速檢測白酒中多種農藥殘留

王春利，籍 芳，孫玉慧，王英姿，李天寶，劉 煒

（江門出入境檢驗檢疫局，廣東 江門 529000）

隨著我國經濟的快速發展和人民生活水平的不斷提高，白酒產量和產業規模增長迅猛。中國產業信息網發布的《2015—2022年中國白酒產業全景調研及投資前景評估報告》中顯示：2014年我國白酒行業總產量達到125.71億升，總資產達到5202.49億元，銷售收入為5258.89億元[1]。白酒是以麥黍、高粱、玉米、紅薯、米糠等糧食或其他果品發酵、曲釀、蒸餾而制成的蒸餾酒，酒精含量較高。由于糧食種植過程需要噴施除草劑、殺蟲劑、殺菌劑、生長素等藥物，加之土壤、水源也可能遭受農藥污染，造成農藥殘留在糧食中。雖然發酵作用可降解部分農藥，但是白酒中的乙醇等有機物對特定的農藥具有很好的溶解性，導致酒中農藥殘留，威脅消費者的身體健康和生命安全[2-3]。因此，建立白酒中農藥殘留的檢測方法十分必要。

目前，國內外有關白酒中農藥殘留的研究報道不多，王蓉[2，4]報道了有機氯農藥和有機磷農藥殘留的氣相色譜-質譜和液相色譜-質譜方法，李俊等[5]報道了10種擬除蟲菊酯類農藥殘留檢測的氣相色譜-質譜方法，王麗娟等[6]報道了黃酒和白酒中20種磺酰脲類除草劑檢測的液相色譜-質譜方法。酒中農藥殘留檢測的前處理方法主要有液液萃取法（Liquid-Liquid Extraction,LLE）[7-9]、固相萃取法（Solid Phase Extraction,SPE）[10-11]、固相微萃取法（Solid-phase Micro extraction,SPME）[12-14]、分散固相萃取法（Dispersive Solid-phase Extraction,d-SPE）[15-16]和液液萃取結合固相萃取法[17]等。本研究建立的方法簡便、快捷、準確，可以用于白酒中10種農藥殘留的同時測定。

1 材料與方法

1.1材料、儀器及試劑

酒樣：市售白酒產品。

儀器設備：氣相色譜-質譜聯用儀(GC-MS)，配備負化學源（NCI），附帶化學工作站軟件，Thermo ISQ,美國；TP-214型分析天平，美國DENVER；Thermo移液槍（200～1000 μL）；BUCHI R-210旋轉蒸發儀，瑞士；QT-1漩渦混合器，上海琪特。

試劑：乙酸乙酯、正己烷、乙腈、丙酮和二氯甲烷（色譜純），德國Merk公司；農藥標準品，Sigma公司和農業部環境保護科研檢測所。

標準溶液：10種農藥用正己烷配制成標準儲備液，根據檢測需要用正己烷將標準儲備液稀釋成相應濃度的標準工作液。

1.2 實驗方法

1.2.1 氣相色譜-質譜條件

色譜柱型號：HP-5柱，規格：30 m×0.32 mm×0.25 μm；載氣：高純氦氣，純度≥99.999%，流速：1.2 mL/min（恒流模式）；柱溫：40℃保持1 min，然后以30℃/min升溫至130℃，再以5℃/min升溫至250℃，保持10 min，再以10℃/min升溫至300℃，保持5 min。進樣量：1 μL；進樣方式：不分流進樣；溶劑延遲時間：5 min；進樣口溫度：250℃；離子源溫度：200℃；接口溫度：280℃；反應氣：甲烷氣；離子檢測模式：選擇離子監測（SIM）。

1.2.2 樣品前處理方法

準確量取10 mL待測樣品，38℃下真空濃縮至體積不變后，加入2 mL正己烷，漩渦振蕩60 s，靜置分層后，吸取上層有機相用0.22 μm有機濾膜過濾，濾液上機檢測。

1.2.3 添加回收

取10種農藥的混合標準溶液（0.1 mg/L、1.0 mg/L和10 mg/L）1.0 mL添加于10 mL白酒中，混合均勻后，按照1.2.2中的步驟進行處理，分別相當于0.01 mg/L、0.1 mg/L和1.0 mg/L的添加水平。

1.2.4 檢測

采用SIM模式分析白酒樣本和10種農藥的基質匹配混合標準溶液（0.01 mg/L、0.1 mg/L、1.0 mg/L、5.0 mg/L和10.0 mg/L），建立各化合物的標準工作曲線。每種農藥選擇2～3個離子掃描，通過保留時間和定性離子豐度比對目標農藥進行定性，外標法定量。

2 結果與討論

2.1 分離效果的優化

將單一農藥標準溶液按照1.2.1的色譜條件進行質譜的全掃描，每個化合物分別選擇1個定量離子和2～4個定性離子。定量離子的m/z值大于150 u且豐度最大，定性離子m/z豐度強度次之。然后進行選擇離子檢測(SIM)掃描，確保所檢測的化合物離子之間不存在干擾。10種農藥的保留時間、定量離子和定性離子見表1。圖1為1.0 mg/L的10種農藥混合標準溶液的選擇離子質譜圖。其中，硫丹和氯丹均有2個同分異構體。

由圖1可知，10種農藥中除了甲基毒死蜱和艾氏劑，反式氯丹和α-硫丹外，其余農藥色譜峰無重疊，分離較好。對17 min處做265、293、329離子提取，艾試劑實現了較好的分離，結果見圖2。

對20.4 min處做375、377和374、404、408、410離子提取，反式氯丹和α-硫丹實現了較好的分離，結果見圖3和圖4。

2.2 精密度、準確度以及靈敏度實驗分析

在SIM模式下，考察10種農藥殘留檢測方法的準確度、精密度以及靈敏度。以3倍信噪比作為檢出限的確定標準，以10倍信噪比作為定量限的確定標準。靈敏度以方法的最低檢測濃度LOQ來表示，準確度以方法添加回收率表示，精密度以相對標準偏差表示，結果見表2。

表1 10種農藥的保留時間和質譜參數

圖1 10種農藥混合標準溶液的選擇離子質譜圖(1.0 mg/L)

圖2 艾試劑準溶液的選擇離子質譜圖

圖3 反式氯丹準溶液的選擇離子質譜圖

圖4 α-硫丹準溶液的選擇離子質譜圖

由表2可知，該方法在0.01～10.0 mg/L范圍內線性關系良好，相關系數大于0.998。LOD在0.001～0.15 mg/L之間，LOQ在0.004～0.047 mg/L之間。由表3可知，該方法在0.01～1.0 mg/L添加水平范圍內，平均加標回收率在85.65%～111.28%之間，相對標準偏差均小于10%。該方法的準確度、精密度以及靈敏度符合要求。

2.3 提取溶劑的選擇

選用農藥殘留檢測中常用的提取溶劑乙酸乙酯、正己烷、丙酮、二氯甲烷、乙腈進行提取效果對比。結果發現，乙酸乙酯做提取溶劑時10種農藥的響應明顯，但回收率大多超過120%。丙酮作為提取溶劑時，基質共提物較多，雜質干擾明顯。乙腈與水互溶，難以分離。正己烷和二氯甲烷在回收率和基質共提物方面表現均較好，但是考慮二氯甲烷毒性較大和其廢液較難處理等原因，本實驗采用正己烷作為提取溶劑。

表2 10種農藥標準的回歸方程、線性范圍、相關系數和檢出限

表3 10種農藥標準的回收率(n=3)

3 結論

目前，我國尚未制定白酒中農藥殘留的分析方法及殘留限量的相關標準。國標《GB 2757—2012蒸餾酒及其配制酒》《GB/T 10346—2006白酒檢驗規則和標志、包裝、運輸、貯存》和《GB 2763—2016食品中農藥最大殘留限量》等標準中都沒有規定白酒中農藥殘留的檢測方法和限量，這不利于白酒中農藥殘留的檢測及監管。本研究所建立的方法，操作簡便，靈敏度高，可用于白酒中農藥殘留的檢測及其風險評估。

[1]2015—2022年中國白酒產業全景調研及投資前景評估報告[R/OL].[2017-06-10].http://www.chyxx.com/research/201509/343997.html.

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[4]王蓉,付大友,李艷清,等.液相色譜-電噴霧質譜法測定白酒中5種有機磷農藥殘留[J].釀酒科技,2008(6)：98-100.

[5]李俊,王震,龐宏宇,等.白酒中多種擬除蟲菊酯類農藥殘留檢測方法[J].釀酒科技,2013(11)：103-105.

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