影響動物疫病實驗室檢測結果準確性的因素

哈力米拉·拜斯汗，李才善，郭慶勇

（1.新疆塔城地區動物疾病控制與診斷中心，塔城 834700；2.新疆農業大學動物醫學學院，烏魯木齊 830052）

0 引言

在動物疫病診斷中，如果僅靠臨床診斷、病理學診斷，很難對相應的致病原作出明確鑒別。實驗室診斷在動物疫病檢驗過程中發揮重要的作用，特別是對混合感染、合并感染嚴重的現狀，通過利用實驗室診斷方法采取各種措施，進一步明確致病原。但在實際動物疫病實驗室檢測時，常會受到內部和外部各種因素的影響，導致最終結果存在一定差異，甚至存在嚴重誤差，影響檢驗結果的準確性。因此，需要充分認識影響動物疫病實驗室檢測結果準確性的各種因素，以采取針對性措施將其解決。

1 人為因素

動物疫病實驗室診斷中，需要高素質的檢測人員參與其中，人的因素是十分重要的影響因素，同時也是不可缺少的因素之一[1]。在實驗室診斷工作開展中，有效降低人為因素造成的影響是提高實驗室檢驗準確性的重要前提。影響最終檢測結果準確性的人為因素主要包括相關檢測人員的科學文化水平、發現問題解決問題的能力、工作的嚴謹程度、實驗操作是否熟練，是否能解決實驗操作中的各種問題等。如在進行常規血清學檢查，如血凝試驗、酶聯免疫吸附試驗時，移液器吹打力度的大小會顯著影響整個樣品的均勻混合程度和酶標反應板清洗的干凈程度。每一個實驗流程的反應時間會對最終的檢測結果數值產生很大影響。此外，在實驗室診斷中，如果不能嚴格按照相關標準進行無菌操作，很容易人為引進其他雜菌或病毒，最終影響檢測結果，不利于及時發現帶病動物[2]。如在進行牛流行性腹瀉毒檢測時，要求對工作環境進行超過30 min的紫外線消毒，確保超凈臺處于正常工作狀態，同時在操作前需要對雙手進行酒精消毒。在進行細菌培養時還應做好培養基的消毒工作，然后將其放置在超凈工作臺上等待使用。實驗中還應確保整個操作環境的無菌和培養液的無菌。

2 儀器設備因素

儀器設備因素主要是指在動物疫病實驗室診斷時，相應設備是否能發揮其應有的檢疫檢驗作用。因為不同設備的生產廠家，不同技術型號和各種參數也存在很大差異，檢測性能和技術參數之間更存在較大差異。在進行病料離心處理過程中，按照離心機的用途不同，主要分為高速離心機、常溫離心機、冷凍離心機和低速離心機，相同的100 μL的移液器，實際值和標準值之間也存在一定誤差，有的還存在很大的偏差。目前我國科技發展水平得到了一定發展，但與西方發達國家相比，還存在一定差異，在儀器設備制造中還存在各種缺陷。有條件的實驗室盡量購進進口儀器，沒有條件的實驗室在儀器建構時，一定要從大生產廠家購置性能好的儀器設備。

3 樣品因素

在進行動物疫病實驗室診斷中，常用到的動物樣品主要包括血液樣品、血清樣品、排泄物樣品、分泌物樣品、臟器組織樣品等。其中血液樣品和血清樣品主要是在進行血清學實驗室應用，血清樣品的溶血情況或溶血程度會直接影響抗體水平的準確度和最終檢測精確度。臟器組織樣品在采集時是否具有典型性和代表性，對最終細菌、病毒、真菌檢測結果也會存在很大影響。因此，在進行樣品采集時，一定要確保樣品采集的典型性、針對性。如在進行牛病毒性腹瀉實驗室診斷時，由于該疾病主要對犢牛造成的危害最為嚴重，而2月齡后的犢牛存活率相對較高，通常表現為體質衰弱、身體脫水，影響正常生長發育，精神狀態正常，飲食無異。通過對病死犢牛進行解剖，可以發現，病變部位主要集中在消化道系統，常發生于胃和小腸。大多數病死牛的胃部被凝乳狀的顆粒物填滿，同時還伴有胃底黏膜充血出血現象。因此，在病料采集過程中，應采集病死牛的病變胃部組織和小腸道內容物，然后帶回實驗室，進行針對性的實驗室診斷。在進行病料采集時，采集方法正確與否也會影響最終的檢測結果。在采集血樣時，通常根據牛的年齡選擇采血部位，體重在50 kg內的犢牛，通常采集前腔靜脈血液。而體重在100 kg以上的中大型牛主要采集耳緣靜脈血液

4 檢測方法因素

在進行動物疫病實驗室檢測中，檢測方式和操作是否規范，也會對最終檢測結果的準確性產生影響。進行動物檢疫的方式多種多樣，研究主要對應用較為常見的幾種方式和手段進行分析。如細菌病毒分離鑒定、補體結合試驗、病毒中和試驗、沉淀試驗、血凝試驗、血凝抑制試驗、酶聯免疫吸附試驗、聚合酶鏈式反應試驗、熒光抗體試驗等。在進行具體實驗室診斷時，不同檢測項目采用的檢測方式、檢測方法也存在很大差異，而檢測遵循的標準和操作規程也不同。即使是相同的檢測項目，使用的檢測手段也存在一定差異。通常使用的檢測方式不同，最終獲得的檢測結果也存在一定差異。如在進行牛口蹄疫檢測時，經常使用到的檢測方式主要包括乳膠凝集試驗和酶聯免疫吸附試驗，而酶聯免疫吸附試驗包括病毒抗體檢測、基因缺失抗體檢測2種方法。在多數情況下，由于核酸檢測具有自身獨特的特征，檢測靈敏度更高，但穩定性較差，所以檢測過程中一定要進行綜合診斷，最終得到合理的診斷結果。

5 環境因素

環境因素主要是指在進行實驗室診斷時所處的溫度、濕度和實驗室環境是否純潔，是否存在致病菌[3]。在進行動物實驗室診斷中，不管是血凝抑制試驗、酶聯免疫吸附試驗，還是其他實驗室診斷過程，都對實驗室的清潔度、溫度、濕度有基本的要求，如果溫度和濕度超過相應規范要求，會對樣品的整體情況產生影響，進而導致樣品和試劑不能發揮應有的作用，不能實現更好的反應，或者在整體反應中速度較為緩慢，時間較長，影響檢測結果的準確性。在整體實驗室診斷過程中，如果環境受到了其他致病原的污染，很容易在檢測過程中引入其他雜菌，最終檢測結果也會受到影響。因此，在進行實驗室診斷時，需要相應的工作人員嚴格控制和檢測環境，確保任何實驗室診斷行為都能在無菌環境下進行，避免引入其他雜菌，保證檢測結果的準確性，為動物疫病檢疫診斷，提供準確、詳實的數據支撐。

6 結束語

在動物疫病實驗室診斷中，影響最終檢測結果的因素多種多樣，需針對存在的問題進行針對性分析，同時找到解決上述問題的多種對策。在實踐中還需要不斷探索和總結，不斷改進動物疫病實驗室檢驗手段、檢驗方法，提高實驗室檢驗人員的工作技能，以促進畜牧業健康可持續發展。

本文根據工程教育專業認證標準、某化工專業培養計劃、結合相關參考文獻，以畢業要求3為例描述了畢業要求達成度的評價過程，重點介紹了定量評價過程，但對教學環節的形成性考核方式，尚需要進一步探討。定性評價部分體系目前還不是很完善，需要通過文獻查閱、調研和專家咨詢建立完整、可行、細化的評價標準和評價過程。