病理診斷中免疫組化技術(shù)的應(yīng)用

胡詠

摘要免疫組織化學(xué)是臨床病理診斷中一種重要的手段，在腫瘤分類(lèi)、診斷、預(yù)后判斷等方面具有十分重要的應(yīng)用價(jià)值，在臨床得到廣泛應(yīng)用。但免疫組化技術(shù)在病理診斷中也存在一定局限性。本文探討病理診斷中免疫組化技術(shù)的應(yīng)用，希望能夠?yàn)楹侠響?yīng)用提供指導(dǎo)。

關(guān)鍵詞病理診斷；免疫組化技術(shù)；應(yīng)用

免疫組化技術(shù)近年來(lái)由于具有準(zhǔn)確、快速等諸多優(yōu)點(diǎn)而在臨床病理診斷中得到了越來(lái)越廣泛的應(yīng)用，并且已經(jīng)成為病理診斷中不可或缺的重要手段。這項(xiàng)技術(shù)在腫瘤診斷及鑒別診斷、預(yù)后判斷等方面均具有顯著的應(yīng)用價(jià)值，但是也存在假陽(yáng)性、假陰性等一定的局限性，因此加強(qiáng)病理診斷中免疫組化技術(shù)的應(yīng)用研究具有十分重要的現(xiàn)實(shí)意義和作用。

病理診斷中免疫組化技術(shù)的應(yīng)用

腫瘤性質(zhì)的判斷：對(duì)B淋巴細(xì)胞增生的單克隆或多克隆性采用免疫球蛋白（Ig）的輕鏈抗體進(jìn)行檢測(cè)能夠區(qū)別腫瘤是屬于反應(yīng)性增生還是腫瘤性增生。如果患者的腫塊性質(zhì)為濾泡反應(yīng)性增生，則細(xì)胞凋亡蛋白（bcl-21不會(huì)表達(dá)在濾泡反應(yīng)中心的細(xì)胞中，而是呈現(xiàn)為bcl-2陰性；但是如果患者的腫塊性質(zhì)為濾泡性淋巴瘤，那么9/10以上的患者腫瘤性濾泡細(xì)胞中存在bel-2高表達(dá)的情況，并且bcl-2呈現(xiàn)為陽(yáng)性；腫瘤細(xì)胞增生的程度能夠通過(guò)周期素（cyclin）、增殖細(xì)胞核抗原（PCNA）、核抗原（Ki-67）等來(lái)進(jìn)行有效評(píng)價(jià)，從而能夠?qū)υ錾?xì)胞的良惡性進(jìn)行準(zhǔn)確的判斷。

腫瘤分期的確定：腫瘤分期與患者是否出現(xiàn)血管侵襲、有無(wú)淋巴管以及是否浸潤(rùn)等有著密切的關(guān)系，因此腫瘤分期的確定對(duì)于患者的治療以及預(yù)后效果的判斷均具有十分重要的作用。采用免疫組化技術(shù)能夠通過(guò)Ⅳ型膠原以及層粘連蛋白的單克隆抗體來(lái)對(duì)基膜的主要成分進(jìn)行清晰的顯示，從而能夠?qū)υ话┖徒?rùn)癌進(jìn)行準(zhǔn)確的區(qū)分，如果出現(xiàn)上皮性癌未突破基膜則可以判定為原位癌，如果突破基膜的情況則可以判定患者為浸潤(rùn)癌；除此之外，標(biāo)記物第8因子相關(guān)蛋白、Anti-HAP40抗體、D2-40等能夠?qū)ρ芎土馨凸軆?nèi)皮細(xì)胞進(jìn)行清晰的顯示，從而能夠使腫瘤對(duì)血管或淋巴管的浸潤(rùn)清晰地顯示。由此可見(jiàn)，免疫組化技術(shù)無(wú)論是對(duì)有無(wú)血管或淋巴管浸潤(rùn)的鑒別還是腫瘤的良惡性鑒別均能夠提供重要的科學(xué)依據(jù)。

細(xì)胞屬性的判定：細(xì)胞的屬性通過(guò)免疫組化技術(shù)能夠利用具有標(biāo)記出細(xì)胞內(nèi)相應(yīng)的抗原成分作用的特定抗體來(lái)進(jìn)行判定，從而能夠?qū)δ[瘤的來(lái)源進(jìn)行準(zhǔn)確判斷。例如，上皮性標(biāo)記細(xì)胞角蛋白（CK）如果為陽(yáng)性，則可以判定患者的腫瘤屬性為上皮源性腫瘤；甲狀腺髓樣癌特有的標(biāo)記為降鈣素多克隆抗體；甲狀腺濾泡性癌則可以通過(guò)甲狀腺球蛋白（Tg）陽(yáng)性來(lái)進(jìn)行判斷；僅在前列腺上皮存在前列腺特異性抗原（PAS）；B細(xì)胞淋巴瘤可以通過(guò)CD20和CD79a陽(yáng)性來(lái)進(jìn)行判斷；膠質(zhì)腫瘤則可以通過(guò)膠質(zhì)纖維酸性蛋白（GFA P）陽(yáng)性來(lái)進(jìn)行判斷；內(nèi)皮細(xì)胞標(biāo)記物CD34陽(yáng)性可以提示為血管源性腫瘤；原癌基因蛋白產(chǎn)物CD117陽(yáng)性則提示患者為胃腸道間質(zhì)瘤。

來(lái)源不明的轉(zhuǎn)移瘤原發(fā)部位的確定：如果患者的轉(zhuǎn)移瘤來(lái)源不明，惡性腫瘤的組織學(xué)來(lái)源則能夠通過(guò)免疫組化技術(shù)來(lái)進(jìn)行確定，從而能夠?qū)υl(fā)部位進(jìn)行進(jìn)一步的確定。例如，在膽管癌、胰腺癌、胃腸道癌中角蛋白抗體（CK20）為陽(yáng)性，但是在乳腺癌、腎癌以及肺癌中則呈現(xiàn)為陰性；如果通過(guò)免疫組化技術(shù)顯示Tg陽(yáng)性，則首先需要懷疑為甲狀腺出現(xiàn)轉(zhuǎn)移；如果通過(guò)免疫組化技術(shù)顯示染色法（PAS）陽(yáng)性，則首先需要懷疑為前列腺出現(xiàn)轉(zhuǎn)移；如果通過(guò)免疫組化技術(shù)顯示S-100蛋白若為陽(yáng)性，則首先需要懷疑為黑色素瘤；如果通過(guò)免疫組化技術(shù)顯示結(jié)蛋白、肌紅蛋白、肌球蛋白、肌動(dòng)蛋白陽(yáng)性，則首先需要懷疑為橫紋肌肉瘤。由此能夠看出，免疫組化技術(shù)能夠?qū)?lái)源不明的轉(zhuǎn)移瘤的原發(fā)部位進(jìn)行確定，并且對(duì)患者的臨床治療和預(yù)后均具有至關(guān)重要的作用。

對(duì)“未分化”的惡性腫瘤的判斷：肉瘤或者癌是臨床上常見(jiàn)的“未分化”的惡性腫瘤類(lèi)型，由于腫瘤尚未分化，就不存在典型的細(xì)胞起源特征，從而也就無(wú)法對(duì)其進(jìn)行準(zhǔn)確的分類(lèi)。非特異性與特異性抗體是組織學(xué)分類(lèi)中常用的鑒定方法，而在臨床病理診斷中，則一般采用免疫組化技術(shù)來(lái)對(duì)其進(jìn)行準(zhǔn)確的判斷，這種技術(shù)不僅能夠?qū)ζ溥M(jìn)行準(zhǔn)確的定位，還能夠?qū)M織器官交界處的不同類(lèi)型的腫瘤進(jìn)行較為準(zhǔn)確的區(qū)分，并且能夠?qū)ξ⑿〔≡钸M(jìn)行準(zhǔn)確的發(fā)現(xiàn)，這對(duì)于患者疾病的臨床治療以及預(yù)后效果的判斷均具有至關(guān)重要的作用和意義。除此之外，免疫組化技術(shù)能夠利用細(xì)菌、病毒、真菌等特異性的抗體來(lái)對(duì)各種傳染病進(jìn)行較為準(zhǔn)確的診斷，具有十分顯著的臨床應(yīng)用價(jià)值。

免疫組化技術(shù)的局限性

理想的腫瘤標(biāo)記物應(yīng)該具備靈敏度高、精確性和特異性強(qiáng)等特點(diǎn)，但是目前在臨床研究和實(shí)踐中均未發(fā)現(xiàn)這樣的腫瘤標(biāo)記物存在，適當(dāng)?shù)年?yáng)性與陰性對(duì)照是免疫組化技術(shù)操作過(guò)程中必須具備的重要內(nèi)容。

假陽(yáng)性：在免疫組化技術(shù)應(yīng)用過(guò)程中如果出現(xiàn)背景著色、著色不勻、邊緣效應(yīng)等情況，則均有可能出現(xiàn)陽(yáng)性信號(hào)定位不正確的現(xiàn)象，即假陽(yáng)性的出現(xiàn)。除此之外，假陽(yáng)性的出現(xiàn)還有可能是由于組織的某些特定成分所導(dǎo)致的。假陽(yáng)性出現(xiàn)的原因有很多，主要有以下幾種情況：一抗是否失效以及一抗?jié)舛龋唤M織未經(jīng)試劑覆蓋；組織變干；非特異性染色的出現(xiàn)；抗體孵育時(shí)間過(guò)長(zhǎng)；DAB（3，3'-二氨基聯(lián)苯胺）顯色時(shí)間太長(zhǎng)；壞死組織中非特異性抗體的吸附導(dǎo)致較高的背景染色。

假陰性：所有抗體標(biāo)記的切片均無(wú)陽(yáng)性信號(hào)，均呈陰性就是免疫組化結(jié)果中的假陰性，該結(jié)果不是真實(shí)的反應(yīng)，導(dǎo)致這種情況出現(xiàn)的原因主要有以下幾點(diǎn)：①?zèng)]有選擇合理的抗原修復(fù)方法，修復(fù)方法需要根據(jù)不同的抗原特點(diǎn)來(lái)進(jìn)行針對(duì)性的選擇，熱修復(fù)是最常用的修復(fù)方法，但是還有些抗原需要用酶消化，例如表皮生長(zhǎng)因子要求使用胃蛋白酶消化。②一抗本身的問(wèn)題：一抗效價(jià)降低或失效均會(huì)導(dǎo)致免疫組化結(jié)果中的假陰性的出現(xiàn)，從而有可能造成臨床疾病的漏診或者錯(cuò)診。

綜上所述，隨著越來(lái)越多的新型抗體的出現(xiàn)以及各種抗體新的用途不斷被發(fā)現(xiàn)，臨床病理診斷中免疫組化技術(shù)在臨床上的應(yīng)用也越來(lái)越廣泛，該技術(shù)能夠判斷腫瘤的性質(zhì)、確定腫瘤的分期、判定細(xì)胞的屬性、確定來(lái)源不明的轉(zhuǎn)移瘤的原發(fā)部位以及判斷“未分化”的惡性腫瘤，其臨床應(yīng)用價(jià)值十分顯著。但是這項(xiàng)技術(shù)也存在著一定的局限性，因此相關(guān)醫(yī)護(hù)人員要明確該技術(shù)的優(yōu)勢(shì)和缺陷，并且通過(guò)不斷總結(jié)經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)等來(lái)充分發(fā)揮其優(yōu)勢(shì)。endprint