通天草提取物對Aβ1－40所致AD大鼠血清與海馬組織中細胞因子含量的影響

邱文興，賈博宇，劉永武，劉旭，李寶龍，周忠光

(黑龍江中醫藥大學，黑龍江 哈爾濱 150040)

老年性癡呆(AD)，又稱阿爾茨海默病，是一種慢性的大腦退行性變性疾病。隨著全球老齡化趨勢的日益加劇，AD越來越嚴重地危害著人們的身體健康。本研究以AD發病理論“神經免疫炎癥假說”和“β－淀粉樣蛋白級聯假說”為切入點，探討通天草提取物對AD大鼠血清與腦組織總細胞因子含量的影響，為開發防治老年性癡呆的中藥新藥提供實驗依據。

1 材料與方法

1．1 實驗動物與分組

Wistar大鼠 80只，雌雄各半，清潔級，體質量(300±20)g，由黑龍江中醫藥大學實驗動物中心提供。適應1周后進行跳臺實驗，剔除不合格者，稱質量后隨機分成正常組、假手術組、模型組、通天草水提組、通天草醇提組、腦復康組(腦復康片劑，400mg/片，東北制藥廠)，每組10只。

1．2 主要試劑與儀器

Aβ1－40(Amyloid β－protein，Fragment1－40，Sigma公司);白細胞介素(IL)－1β、IL－6、腫瘤壞死因子(TNF)－α放免試劑盒購自北京福瑞生物公司;大鼠腦立體定位儀SN－2(日本);大鼠跳臺儀(中國醫學科學院藥研所)。

1．3 模型制備

參考本課題組前期研究成果［1］。

1．4 治療方法

各組大鼠在造模后第7天開始給藥治療，每天給藥1次，連續給藥 21天:醇提組給藥量為:1．18g/kg/天;水提組給藥量為:2.90g/kg/天;腦復康組灌胃給予0.1g/kg/天;正常組、假手術組與模型組大鼠給予等體積蒸餾水。

1．5 指標檢測

1．5．1 取材方法

參考本課題組前期研究成果［1］。

1．5．2 檢測指標

采用液相平衡競爭放射免疫分析法(RIA)檢測血清和腦組織中IL－1β、IL－6、TNF－α水平。具體方法按試劑盒說明書進行操作。

1．6 統計學處理

2 結果

2．1 IL－1β在各組大鼠血清和海馬中含量變化

與正常組和假手術組相比較，模型組大鼠血清和海馬組織中IL－1β含量顯著升高(P＜0．01)，給藥后，與模型組、空白組比較，各組IL－1β含量明顯下降(P＜0．05或P ＜0．01);在各組比較中，通天草醇提物對血清和海馬中IL－1β含量的影響最大。見表1。

表1 通天草提取物對AD大鼠血清和海馬中IL－1β含量的影響(±s，μg/L)

表1 通天草提取物對AD大鼠血清和海馬中IL－1β含量的影響(±s，μg/L)

注:與正常組比較，1P ＜0．05，2P ＜0．01;與模型組比較，3P ＜0．01;與醇提組比較，4P ＜0．05。

組別 n 血清 海馬正常組10 0．168 ±0．017 0．212 ±0．030假手術組 10 0．206 ±0．0331 0．214 ±0．023模型組 10 0．277 ±0．0152 0．345 ±0．0332水提組 10 0．211 ±0．04913 0．271 ±0．028234醇提組 10 0．196 ±0．03713 0．236 ±0．0393中藥組 10 0．216 ±0．05913 0．262 ±0．03323

2．2 IL－6在各組大鼠血清和海馬中含量變化

見表2。與正常組比較，模型組IL－6含量明顯升高(P＜0．01);與模型組、正常組比較，各給藥組IL－6含量有不同程度降低(P ＜0．05或P ＜0．01)，其中以通天草醇提組作用最明顯。

表2 通天草提取物對AD大鼠血清和海馬中IL－6含量的影響(±s，μg/L)

表2 通天草提取物對AD大鼠血清和海馬中IL－6含量的影響(±s，μg/L)

注:與正常組比較，1P ＜0．05，2P ＜0．01;與模型組比較，3P ＜0．05;與醇提組比較，4P ＜0．01。

組別 n 血清 海馬正常組10 161 ±17 13．7 ±4．8假手術組 10 178±15 15．3±5．3模型組 10 310±422 42．8±3．32水提組 10 255±4923 24．7±4．824醇提組 10 202±3714 20．5±4．914中藥組 10 216±2924 22．8±3．324

2．3 TNF－α在各組大鼠血清和海馬中含量變化

見表3。與正常組比較，模型組TNF－α水平明顯升高(P＜0．01);與模型組、正常組比較，各給藥組TNF－α水平有不同程度降低(P＜0．05)，其中以通天草醇提組作用最明顯。

表3 通天草提取物對AD大鼠血清和海馬中TNF－α含量的影響(±s，ug/L)

表3 通天草提取物對AD大鼠血清和海馬中TNF－α含量的影響(±s，ug/L)

注:與正常組比較，1P ＜0．05，2P ＜0．01;與模型組比較，3P ＜0．05;與醇提組比較，4P ＜0．01。

組別只數 血清 海馬正常組10 0．71 ±0．05 0．74 ±0．04假手術組 10 0．72 ±0．061 0．76 ±0．05模型組 10 0．93 ±0．072 1．23 ±0．162水提組 10 0．75 ±0．0313 0．88 ±0．09234醇提組 10 0．70 ±0．043 0．77 ±0．053中藥組 10 0．76 ±0．093 0．91 ±0．06234

3 討論

老年性癡呆(阿爾茨海默病，AD)是一種病因不明的原發性退行性腦變性疾病。臨床癥狀上以不可逆的認知損害為主。病理主要改變為皮質彌漫性萎縮、老年斑(SP)形成、神經元大量減少和神經元纖維纏結(NFT)。研究證實，認知損害和記憶喪失的程度與淀粉樣物質沉積范圍有關［2－3］。本實驗研究表明，通天草的水提取物和醇提取物能不同程度地調節AD模型大鼠血液和腦組織免疫炎性細胞因子IL－1β、IL－6和TNF－α水平，從而影響APP生成與代謝，合理調控Aβ過度沉積引起的免疫炎癥級聯反應，有效地減輕Aβ毒性作用所致腦組織神經元損傷，從而改善學習記憶障礙，起到防治AD的作用。

［1］ 周忠光，韓玉生，姜波，等．補陽還五湯及拆方對Aβ1～40所致AD大鼠血清與海馬組織Aβ和細胞因子含量的影響［J］．山西醫藥雜志，2008，37(2):129－131．

［2］ 周妍妍，謝寧，姚辛敏，等．地黃飲子對β淀粉樣蛋白所致PC12細胞損傷的保護作用［J］．中醫藥學報，2010，38(2):19－21．

［3］ 何秀麗，孟菲，周妍妍，等．地黃飲子含藥腦脊液對受損PC12細胞β－淀粉樣前體蛋白mRNA表達的干預［J］．中醫藥信息，2011，28(4):26－28．