聯合檢測腎病綜合征患兒尿β2-MG、α1-MG及NAG的臨床意義

鄧鵬飛 陳少華 謝生勇 盧 濤 孫明珠

1.福建省三明市第二醫院兒科，福建三明 366000；2.福建省三明市第二醫院檢驗科，福建三明 366000

目前臨床上對腎小管早期損傷的檢測主要有：尿β2-微球蛋白（β2-MG）、α1-微球蛋白（α1-MG）和N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（NAG）。本文對腎病綜合征（激素敏感型，SSNS）患兒尿β2-MG、α1-MG和NAG進行聯合檢測，以探尋其臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇自2014年1月～2017年6月于我院兒科首次診斷并接受正規住院治療的NS（腎病綜合征）患兒，共30例，男23例，女7例，平均發病年齡（10.6±3.4）歲，平均身高（132.0±4.6）cm，平均體重（30.25±5.02）kg，平均病程（3.2±0.3）個月。30例患兒和2009年中華醫學會兒科學的分會腎臟病學組所提出的《兒童常見腎臟疾病診治循證指南(一)》中腎病綜合征相關診斷標準符合[1]，（1）患兒存在大量的蛋白尿癥狀：患兒24h的尿蛋白定量≥50mg/kg，或是隨機或是晨尿中的尿蛋白/肌酐（Cr）≥2.0mg/mg；（2）患兒存在低蛋白血癥情況：患兒的血漿白蛋白含量≤25g/L；（3）患兒存在高脂血癥現象：患兒血漿中的膽固醇含量≥5.7mmol/L；（4）患兒存在一定程度的水腫癥狀。以上指標（1）及指標（2）是臨床確診的必要條件。并將由于繼發性的腎小球相關病變等引發的腎病綜合征排除。所有病例確診后均給予足量糖皮質激素（潑尼松）口服治療，檢測尿蛋白連續2次轉陰后至少予原劑量糖皮質激素治療2周，所有病例均于治療4周內尿蛋白轉陰（激素敏感型），同時給予利尿、抗凝等基礎治療。

對照組為于2014年1月～2017年6月來我院門診進行健康體檢的兒童，共31例，男24例，女7例，平均發病年齡（10.8±3.2）歲，平均身高（132.2±4.7）cm，平均體重（30.23±5.03）kg，平均病程（3.0±0.2）個月，兩組患兒的一般資料比較差異無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 研究方法

1.2.1 尿β2-MG、α1-MG及NAG的檢測 對對照組受檢者就診當天及SSNS組腎病綜合征患兒在治療之前收集20mL清潔中段晨尿，并置入干燥的試管中，進行混勻和離心處理之后，將5mL上清液用于β2-MG、α1-MG及NAG的檢測。尿β2-MG采用放射免疫分析法開展測定，試劑由北京北方生物技術研究有限公司提供，結果用μg/mL表示。尿α1-MG采取免疫比濁法開展測定，檢測試劑購于美國貝克曼公司，尿α1-MG的單位是mg/dL。尿NAG采用分光光度計比色法開展測定，檢測試劑購于北京九強生物技術股份有限公司，尿α1-MG的單位是U/L。并依據試劑說明書相關步驟開展檢測，并開展質控。

1.2.2 腎功能相關指標測定 收集所有61例受試者治療前清晨空腹血3mL，混勻離心后，采用美國貝克曼AU5800全自動生化儀進行尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）、胱抑素C（CysC）檢測，BUN 采用尿素酶-谷氨酸脫氫酶法進行檢測，結果用mmol/L表示。Cr采用肌氨酸氧化酶法進行檢測，結果用μmol/L表示。CysC采用免疫比濁法進行檢測，結果用mg/L描述。試劑購自美國貝克曼公司。依據試劑說明書相關步驟開展檢測，均同時進行質控。

1.3 統計學處理

2 結果

2.1 兩組患者尿β2-MG、α1-MG、NAG的比較

表1顯示SSNS組患者尿β2-MG、α1-MG和NAG與對照組受檢者相對比更高，差異有統計學意義（P ＜0.05）。

2.2 SSNS組與對照組BUN、Cr、CysC的比較

表2顯示SSNS組患者BUN、Cr及CysC與對照組受檢者相對比更高，差異無統計學意義（P ＞ 0.05）。

3 討論

一般把BUN、Cr作為腎功能的常規檢測項目，但BUN、Cr受性別、飲食、肌肉量等因素的影響，同時腎臟有強大的儲備和代償能力，只有在嚴重腎小球損害(腎小球濾過率降低50%以下)時，BUN、Cr濃度才明顯升高[2]。CysC是一種半胱氨酸蛋白酶抑制劑，而且，CysC于患者的近曲小管幾乎全部被重吸收并降解，不返回血液，其血中濃度由腎小球濾過率（GFR）決定，不受任何外來因素影響，是反映GFR變化的理想內源性標志物，對比BUN、Cr更有優勢[2]。郭慧娟[3]的研究表明CysC作為評價慢性腎臟病（CKD）患者GFR的指標，在1、2期CKD中比Cr更有優勢。本研究顯示SSNS組CysC與對照組比較無統計學差異，提示CysC對兒童SSNS的療效觀察無臨床意義，與張旭光[4]的研究認為CysC是NS療效觀察敏感的指標，但對于微小病變型NS意義不大一致；兒童PNS76%的病理為微小病變型，因此推測監測胱抑素C的變化對兒童PNS的療效及預后判斷臨床意義有限。

表2 SSNS組患者與對照組受檢者的BUN、Cr、CysC水平比較（ ± s）

組別 n BUN（mmol/L）CysC（mg/L）SSNS組（A組） 30 4.6±2.3 38.2±14.6 0.8±0.5對照組(B組) 31 3.9±1.1 36.6±12.6 0.6±0.4 t 1.449 0.474 1.727 P 0.155 0.637 0.089 Cr（umol/L）

β2-MG是由體內各種有核細胞產生小分子蛋白，α1-MG同樣是小分子蛋白，主要由肝臟產生，二者均能自由通過腎小球，在腎小管中幾乎全部被上皮細胞攝取、分解，故尿中生理濃度極低，當腎小管發生病變時，二者尿中濃度均升高，因此尿β2-MG和α1-MG濃度是診斷和評價腎小管損傷或恢復的敏感指標，二者在原發性腎臟疾病中具有重要的臨床診斷意義[5-7]。β2-MG在尿液pH值＜5.5時易被尿中酸性蛋白酶降解，同時較易受腎外因素的影響，相反α1-MG在酸性尿中較穩定，且尿中濃度遠高于β2-MG，因此尿α1-MG在反映早期腎小管損傷上比尿β2-MG更特異、靈敏。陳燕等[8]的研究同樣顯示尿α1-MG檢測對早期腎損傷的敏感性高于尿β2-MG。NAG是分布于各種細胞溶酶體中的大分子蛋白，腎小管上皮細胞中含量豐富，不能由腎小球濾過，因此腎小管受損時尿NA G顯著升高；多個研究顯示尿NAG是反應腎小管損傷敏感的生物學標志物[9-10]，同時也有報道認為尿NAG升高與PNS活動有關[11]。總之尿β2-MG、α1-MG和NAG均是反映腎小管損傷的重要指標，腎小管損傷是腎間質病變的重要依據，因此尿β2-MG、α1-MG和NAG是評估腎間質病變重要指標。

Kalansooriya等[12-13]的研究顯示PNS患者尿β2-MG、α1-MG、NAG濃度與正常對照組比較差異有統計學意義（P＜0.05），同時劉瑜的研究還認為三者對于PNS的診斷具有較高的敏感度和特異度。但對于SSNS是否存在腎小管損傷的情況，相關資料報告具有差異性，陶玉[14]相關實驗資料中呈現，SSNS組患者于接受激素治療之前和之后的尿β2-MG水平和正常對照組受檢者相比較，差異無統計學意義（P＞0.05），而黃惠梅等[15]相關實驗數據展示，SSNS組患者接受激素治療之前的α1-MG、β2-MG對比正常對照組受檢者，差異有統計學意義（P＜0.05）。而本文實驗研究結果展示，SSNS組患者接受激素治療之前的尿α1-MG、β2-MG、NAG和對照組受檢者數據比較，差異有統計學意義（P＜0.05），提示SSNS患兒存在腎小管功能損傷，與黃惠梅等[15]的研究結果一致。提示早期檢測腎病綜合征患兒的尿β2-MG、α1-MG和NAG不僅對疾病診斷、估計病情有一定價值，同時對評估腎損傷程度有意義，且明顯優于腎功能指標。

存在腎小管功能損傷的PNS患兒對于激素治療的反應是良好的，且腎病綜合征（激素敏感型，SSNS）患兒的預后也比較好，和以上報告結果具有差異性，可能是和病理類型具有差異性存在相關關系，所以對PNS患兒來說，腎小管的損傷程度是不能完全看做判斷PNS患兒預后情況的指標，不過還需要進行更加深入的研究。

總之，聯合檢測患兒的尿β2-MG、α1-MG、NAG可以對腎小管的具體損傷程度進行反映，有助于腎病綜合征的臨床診斷及治療，且尿β2-MG、α1-MG、NAG聯合檢測結果對比腎功能指標更優，但對PNS預后的判斷有待進一步的研究。同時本研究為小樣本研究，對SSNS患兒預后未進行長期隨訪，對研究結果都可能產生影響，未來還需更大樣本、更長隨訪時間的研究來進一步探索聯合檢測三者對PNS的意義。