HBV感染型原發性肝癌腫瘤微環境T淋巴細胞亞群的表達

歐陽觀峰 邱磷安 詹建富 余雄輝歐陽觀峰 邱磷安 詹建富 余雄輝

[摘要] 目的 分析HBV感染型原發性肝癌患者T淋巴細胞亞群在腫瘤微環境中的表達情況。 方法 方便收集醫院2016年10月—2017年10月收治的HBV感染性原發性肝癌患者36例資料，納入感染組，取同期收治的非HBV感染原發性肝癌患者納入非感染組，對兩組患者T淋巴細胞亞群表達在腫瘤微環境中的表達情況觀察對比，并觀察微血管密度MVD值情況。 結果 T淋巴細胞亞群表達情況，Treg與CD4等陽性率感染組均相對較高，CD8陽性率非感染組相對較高，組間對比差異有統計學意義（χ2=8.134，6.020， 27.023， P=0.004， 0.014， 0.000 <0.05）。腫瘤組織微環境內，感染組與非感染組MVD值分別為（66.50±9.00）、（57.80±7.50），組間對比差異有統計學意義（t=4.456，P=0.000<0.05）。 結論 T淋巴細胞亞群在HBV感染原發性肝癌患者中有較高的表達水平，且有較高的MVD值。

[關鍵詞] 原發性肝癌；HBV感染；T淋巴細胞亞群；腫瘤微環境

[中圖分類號] R5 [文獻標識碼] A [文章編號] 1674-0742（2018）11（a）-0027-03

[Abstract] Objective To analyze the expression of T lymphocyte subsets in tumor microenvironment in patients with HBV-infected primary liver cancer. Methods Thirty-six patients with HBV-infected primary liver cancer admitted to the hospital from October 2016 to October 2017 were convenient enrolled in the infection group. Non-HBV-infected primary liver cancer patients admitted to the same period were included in the non-infected group. The expression of T lymphocyte subsets in the tumor microenvironment was observed and compared， and the microvascular density MVD values were observed. Results The expression of T lymphocyte subsets， Treg and CD4 were relatively high in the infection group， and the CD8 positive rate was relatively high in the non-infected group. There was a significant difference between the groups （χ2=8.134，6.020， 27.023， P=0.004， 0.014， 0.000 <0.05）. In the microenvironment of tumor tissue， the MVD values of the infected group and the non-infected group were （66.50±9.00） and （57.80±7.50）， respectively， and there was significant difference between the groups （t=4.456， P=0.000<0.05）. Conclusion T lymphocyte subsets have higher expression levels in patients with HBV-infected primary liver cancer and have higher MVD values.

[Key words] Primary liver cancer； HBV infection； T lymphocyte subsets； Tumor microenvironment

作為臨床常見惡性腫瘤疾病，原發性肝癌病情變化較快，部分研究資料中均指出受患者自身免疫耐受影響，可能出現細胞浸潤、細胞增殖以及細胞轉移等情況，遠期生存率較低[1]。特別部分患者存在HBV感染即乙型肝炎病毒感染情況，血清炎性因子水平更高。臨床診療中，應注意對腫瘤微環境內T淋巴細胞表達情況觀察，為臨床治療提供有效指導。該次研究將以2016年10月—2017年10月收治的HBV感染性原發性肝癌患者36例為對象，對比非HBV感染患者微血管密度、T淋巴細胞亞群表達情況，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

方便收集收治的HBV感染性原發性肝癌患者36例資料，患者年齡49～72歲，平均（61.6±5.5）歲，根據Edmondson分級[2]，Ⅰ級、Ⅱ級、Ⅲ級分別為2例、15例、19例，其中男性與女性各19例、17例。取同期收治的非HBV感染型原發性肝癌患者36例，患者年齡50～70歲，平均（61.7±5.0）歲，根據Edmondson分級，Ⅰ級、Ⅱ級、Ⅲ級分別為1例、14例、21例，其中男性與女性均為18例。入選標準：①患者均給予病理學診斷檢查，確診原發性肝癌；②患者無危重癥情況或其他影響研究配合情況；③研究經倫理委員會批準，患者及其家屬知情同意。一般資料組間數據結果對比差異無統計學意義（P>0.05），可進行對比分析。

1.2 方法

對所有患者病歷資料做回顧性分析，通過對穿刺活檢標本、根治切除標本的收集，在流式細胞儀應用下，做T淋巴細胞的檢測，若檢出結果提示有Treg（調節性T細胞CD4+25+）、CD8（CD8+T淋巴細胞）、CD4（CD4+T淋巴細胞），若檢測結果提示有上述細胞表達，判斷為陽性。另外，借助Weidner方法，對微血管密度MVD觀察。

1.3 觀察指標

對兩組患者T淋巴細胞亞群在腫瘤環境中的表達情況觀察，同時比較微血管密度值。

1.4 統計方法

經過SPSS 21.0統計學軟件進行數據處理，計量資料用（x±s）表示，計數資料用[n（%）]表示，對比分別由t檢驗、χ2檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組患者T淋巴細胞亞群表達在腫瘤微環境中的表現觀察

T淋巴細胞亞群表達情況，Treg與CD4等陽性率感染組均相對較高，CD8陽性率非感染組相對較高，組間對比差異有統計學意義（P<0.05）。見表1。

2.2 患者MVD情況觀察比較

腫瘤組織微環境內，感染組與非感染組MVD值分別為（66.50±9.00）、（57.80±7.50），組間對比差異有統計學意義（t=4.456、P=0.000<0.05）。

3 討論

3.1 惡性腫瘤微環境

惡性腫瘤的研究越來越深入，其中腫瘤微環境成為研究熱點。腫瘤微環境時指腫瘤的發生、生長、轉移與腫瘤細胞所處的內外環境關系密切，包括腫瘤所在組織結構、功能代謝，全身以及局部代謝、分泌、結構、免疫與功能改變。HBV感染是原發性肝癌的重要危險因素之一，不同于其他酒精性脂肪肝等非感染原因所致原發性肝癌，患者在發生原發性肝癌之前，患者便可能因出現HBV感染出現免疫等腫瘤微環境因素改變，從而影響腫瘤的發生，在腫瘤發生之后，HBV感染仍然發生作用，從而影響腫瘤的生長、復發、轉移。與此同時，原發性HBV相關的原發性肝癌還因腫瘤、長期肝硬化，常伴有貧血、腹水等表現，組織損傷加重，進一步導致腫瘤微環境改變[3-4]。

3.2 肝癌、HBV、T淋巴細胞水平關系

T淋巴細胞來源于骨髓多能干細胞，骨髓中的一部分多能干細胞或前T細胞在胸腺激素的誘導下，會成為具有免疫活性的T細胞。陳幸福的T細胞會經淋巴管、外周血、組織液等進行再循環，發揮細胞免疫、免疫調節等功能，加強免疫應答，維持免疫記憶。T淋巴細胞具有抗癌作用，機體會對腫瘤細胞產生抵抗作用，T淋巴細胞能夠反映腫瘤、免疫系統之間的相互作用。大量研究顯示其在乳腺癌、卵巢癌等腫瘤以及外周血中都可見T淋巴細胞功能與數量異常，反映了腫瘤患者免疫功能變化，感染對象的CD4水平異常率再40%～60%之間，CD8顯著下降在0%～10%之間，Treg異常率在30%～70%之間[5]。HBV感染通過激活免疫應答，影響T淋巴細胞水平，從而影響腫瘤發生、進展，腫瘤反過來會影響T淋巴細胞，反過來影響HBR感染的控制。T淋巴細胞反映了腫瘤、HBV、免疫細胞之間的關系。該次研究也證實這一點，感染HBV的對象Treg與CD4、CD8陽性率都與非感染組差異有統計學意義（P<0.05），感染對象CD4與陽性率50.00%、CD8異常率5.56%、Treg異常率44.44%，與前文報道的結果相近。

CD4細胞是一種重要的免疫細胞，主要表達于輔助T（Th）細胞，參與Th細胞TCR識別抗原的信號轉導，是反應細胞。感染組對象CD4陽性率高于非感染組，提示免疫應答明顯增強，這與HBV刺激CD4+T細胞有關。CD8+主要與免疫應答關系密切，可識別可溶性抗原、產生抑制因子等途徑抑制免疫應答，感染組CD8+水平低于對照組（P<0.05），提示HBV感染會削弱免疫抑制作用，這可能會導致“腫瘤逃逸”，增加腫瘤增殖風險。T淋巴細胞亞群指標變化，提示HBV會影響原發肝癌患者免疫功能，進一步加重免疫功能紊亂，機體免疫監視功能降低，引起肝癌細胞發生免疫“逃逸”，出現療效欠佳情況，提示HBV感染原發性肝癌出現療效欠佳的風險可能更高。

3.3 微血管密度MVD

另外，該次研究中，感染組與非感染組MVD值分別為（66.50±9.00）、（57.80±7.50），組間對比差異有統計學意義（P<0.05）。之所以出現該情況，主要受新生血管影響。腫瘤轉移或侵襲均以新生血管為基礎，這些新生毛細血管具有較高的通透性，且管壁不完整，腫瘤細胞通過新生毛細血管更加容易，其他文獻報道顯示MVD存在顯著的個體差異，水平在50%～80%之間，該組對象患者MVD處于較低水平，這可能與MVD不僅與感染有關，還與腫瘤分期、腫瘤大小等因素有關[7-8]。同時，毛細血管生成后，有較多基質降解酶包括纖溶酶原激活物、Ⅳ型膠原酶與內皮細胞產生，這些均會導致基質屏障被破壞，為腫瘤細胞的轉移提供條件[9-10]。從該次研究結果中發現，在微血管密度值MVD值上觀察比較，感染組相對較高，便能反映除原發性肝癌患者有HBV感染情況，新血管生成能力強，這可能與HBV感染相關的免疫功能紊亂有關。對于腫瘤轉移情況，是否受肝癌血管生成影響，需在未來研究中進一步深入分析。

綜上所述，T淋巴細胞亞群在HBV感染原發性肝癌患者中有較高的表達水平，且有較高的MVD值，之所以與非HBV感染型患者存在差異，很大程度受腫瘤血管生成、HBV異常增殖影響，應將這些診斷結果作為臨床治療的參考指導。

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（收稿日期：2018-08-09）