探究流式細胞術（FCM）用于白血病外周血細胞檢驗對急性白血病（AL）預后的評估價值

王福超

（大慶油田總醫院，黑龍江 大慶）

0 引言

急性白血病是臨床中一種典型的非實體腫瘤，在工業污染不斷加重，社會環境日益改變的背景下，急性白血病患病人數越來越多，發病率及死亡率不斷提高，對患者及其家庭日常生活造成了嚴重影響[1]。近年，急性白血病治療方法不斷更新，其治療水平也隨之提高，初次治療急性白血病緩解率較高，但是依舊可能復發[2]?，F階段，患者接受治療后機體內部依舊殘留部分腫瘤細胞是導致急性白血病復發的主要原因，而這些腫瘤細胞可于機體內部進一步繁殖，最終造成疾病復發[3]。通常情況下，急性白血病細胞是一種表面抗原表型，其特點以異常光散射為主，所以，可利用單克隆抗體及流式細胞術等對細胞表明不同抗原檢測，從而識別熒光信號。本文主要針對流式細胞術（FCM）用于白血病外周血細胞檢驗對急性白血?。ˋL）預后評估價值分析，以下是具體報告。

1 資料與方法

1.1 一般資料

隨機選取本院2018年2月至2019年7月接收的56例急性白血病患者，其中，30例男，26例女；年齡21～67歲，平均（38.47±5.23）歲。分型：24例急性淋巴白血病（ALL）和32例急性髓系白血病（AML）。本次研究經醫院倫理委員會批準。

納入標準：①與急性白血病診斷標準相符；②年齡在18歲以上；③自愿簽署研究同意書。

排除標準：①具備較差依從性；②確診為急性早幼粒細胞白血病者。

1.2 方法

通過流式細胞術檢驗所選患者外周血標本，收集56例患者3 mL空腹靜脈血，采用乙二胺四乙酸二鉀抗凝，免疫標記分別采用別藻青蛋白、藻紅蛋白、甲硫氫酸熒光素及多甲藻葉綠素蛋白，并檢測免疫分型。將1×106有核細胞加入到每支試管中，采用由美國BD公司提供的單克隆抗體，嚴格按照說明書開展操作。最低采集可供分析的有核細胞10萬個，細胞的采集應用由美國BD公司生產的FACSCalibur流式細胞儀，利用配套軟件分析每個試管。以原始細胞是否跨系表達、表達強弱、表達是否同時等為依據對是否是微小殘留病變（MRD）判定，MRD陽性判定依據為MRD超過0.01%，相反為陰性[4]。與此同時，與骨髓細胞形態學檢驗對比，骨髓液涂片6～8張，在吉木薩-瑞士染色后，置于顯微鏡下觀察并劃分，以形態為依據實施分類計數。

1.3 觀察指標

對比檢驗結果，并分析MRD與復發率相關性。

1.4 統計學方法

將實驗所得數據采用統計學軟件SPSS 21.0進行分析處理，計量數據通過t檢驗，以（）表示，計數資料采用χ2檢驗，以（%）表示，P＜0.05表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 分析檢驗結果

ALL組敏感性、特異性、陽性預測值及陰性預測值分別 是 68.75%、62.50%、72.22% 和 33.33%，AML組 分 別 是95.24%、18.18%、74.07%和80.00%，在敏感性、特異性及陰性預測值方面，兩組對比，差異明顯（P＜0.05）；而陽性預測值比較，差異無統計學意義（P＞0.05），見表1。

表1 分析檢驗結果（%）

2.2 分析MRD與復發率相關性

MRD陰性患者11例中，復發3例，復發率是27.27%；MRD陽性患者45例中，33例復發，復發率是73.33%，MRD陽性患者復發率較MRD陰性患者更高，差異有統計學意義（P＜0.05）。

3 討論

現階段，流式細胞術被視為研究急性白血病的主要方法，其通過檢測MRD從而判定預后效果[5]。相關研究表明，誘導治療方法可將大部分AL細胞殺滅，但是全部清除難度較大，有些患者經過化療后病情有所緩解，但是，依然伴有MRD陽性，經過一段時間的發展出現復發，所以，截止到目前為止，MRD陽性在化療緩解程度評估中具有重要作用[6]。目前，臨床上主要通過骨髓細胞形態學檢測方法判斷AL治療效果及診斷，盡管細胞學檢驗方式被視為診斷AL的金標準，但是局限性較大[7]，譬如：經過骨髓穿刺得到的標本僅可以將該部分骨髓狀況反映出來，但是，通常僅有在機體AL細胞數量在1%以上時才可以被檢出，而MRD依舊持續反映在外周血中，利用MRD檢查可將AL患者預后狀況更加全面的反映出來[8-10]。除此之外，針對急性白血病患者而言，骨髓穿刺方式具有較大的創傷性，而外周血取樣操作簡單且方便。

由實驗結果可知，ALL組敏感性、特異性、陽性預測值及陰性預測值分別是68.75%、62.50%、72.22%和33.33%，AML組 分 別 是 95.24%、18.18%、74.07% 和80.00%，在敏感性、特異性及陰性預測值方面，兩組對比，差異明顯（P＜0.05）；而陽性預測值比較，差異無統計學意義（P＞0.05）；MRD陽性患者復發率（73.33%）較MRD陰性患者（27.27%）更高，差異有統計學意義（P＜0.05）。由此可見，MRD可被視為判斷AL預后的一個重要指標。相關研究表明，MRD判定界限為0.01%，在0.01%以上的患者3年復發率相比于低于0.01%患者更高，大約是其3倍，所以，臨床上，通常以MRD檢驗水平為依據劃分預后等級，并根據具體狀況開展相應的化療方案，若MRD長時間呈陰性，則可以結束治療，若MRD長期呈陽性，則需要對化療方案進行適當的調整。

總而言之，急性白血病患者檢驗過程中流式細胞術具有較高的敏感性，其可用于評估急性白細胞復發率，值得臨床進一步推廣、采納。