萬遂如
(中國畜牧獸醫學會動物傳染病學分會,吉林 長春 130122)
在獸醫臨床上豬常發生水皰病(VD),一般都認為是由口蹄疫病毒(FMDV,小RNA病毒科口瘡病毒屬)、水皰性口炎病毒(VSIV,彈狀病毒科水皰病毒屬)、豬傳染性水皰疹病毒(VESV,杯狀病毒科水皰疹病毒屬)與豬水皰病病毒(SVDV,小RNA病毒科腸病毒屬)等4種RNA病毒所引起的。但自2007年加拿大發生豬原發性水皰病(PIVD)以來,隨后巴西和美國于2014年和2015年先后也暴發該病,澳大利亞和新西蘭、意大利也曾有報道,均未檢測到上述4種RNA病毒,而認為與塞尼卡病毒A(SVA)密切相關。我國于2015年首次在廣東的豬群中發現塞尼卡病毒A感染,2016—2017年先后在華南、華中、福建、河南、湖北及東北地區發生疫情,表明我國豬群中的SVA感染已呈現區域性分布,應引起高度重視。本文就豬塞尼卡病毒A感染作一簡要介紹,以引起養豬場注意,加強疫病監測與防控,避免造成重大的經濟損失。
塞尼卡病毒A(SVA)原名為塞尼卡谷病毒,屬于小RNA病毒科(Picornaviridae)塞尼卡病毒屬(Senecavirus)成員。為單股、正鏈、不分節段的RNA病毒,直徑約27納米,二十面體。病毒基因組含有7 280個核苷酸,其中包括5'端666個核苷酸的非編碼區,一個開放閱讀框含有6 543個核苷酸,編碼2 181個氨基酸的多聚蛋白,可以分割成12個多肽,構成標準的小RNA病毒科L-4-3-4模式,3'非編碼區有71個核苷酸,帶有ploy與所有小RNA病毒科成員一樣,p1多肽由3C蛋白酶裂解生成VP0、VP3和VP1,構成病毒核衣殼。成熟的VP0裂解生成VP2和VP4,病毒VP1~VP4亞基蛋白結構保守,可能與病毒的細胞嗜性有關。VP2和VP4某些區域相互作用參與核酸包裝。SVA的2A是一個短肽,帶有預測的核糖體跳躍基序NPG。SVA的導肽序列缺乏蛋白水解酶活性必要的催化殘基,在氨基末端區域沒有鋅指結構,缺乏酪氨酸磷酸化基序。SVA與其他小RNA病毒科成員的2B蛋白有相似的二級結構,能起到病毒孔蛋白的作用。
愛荷華州立大學獸醫診斷實驗室將SVA毒株VP1和全基因組測序發現,所有的新分離毒株之間同源性高達99%~100%,但與早期分離的SVA毒株(1988—2001年)序列差異顯著。美國SVA毒株與巴西SVA毒株同源性達97%~98%。通過系統進化樹分析表明,近期分離毒株與最先分離的毒株有著共同的祖先,但也表明SVA在近十幾年來已發生變異,致病性已增強。
用發病豬的水皰液接種PK-15細胞,盲傳4~5代均能產生明顯的細胞病變(CPE),將病變細胞反復凍融3次后進行RNA提取,采用常規PCR和實時熒光定量PCR可進行檢測與鑒定病毒。
發病豬只與亞臨床感染帶毒豬只,其鼻吻、蹄冠、口唇等部位的水皰中含有大量的病毒,是本病的主要傳染來源。其次鼠類糞便與小腸中以及蠅類、吸血昆蟲等都可攜帶SVA,并能在其體內增殖,因而在本病的傳播中能發揮重要作用。
本病可通過直接接觸病豬與污染物或通過氣溶膠發生傳播。
血清學調查顯示,豬、牛和小鼠的血清中存在SVA的中和抗體。牛與鼠類可能是SVA自然宿主。豬屬于SVA的易感動物,成年豬常呈亞臨床感染;種母豬和種公豬感染時其鼻吻、蹄冠等部位可見充血、水皰、潰瘍等病變;仔豬感染呈急性發病,1~3日齡仔豬感染死亡率可達30%~70%,4~7日齡的仔豬發病表現出中等死亡率(30%左右)。
目前本病先后流行于巴西、加拿大、新西蘭、意大利、美國與澳大利亞等許多國家。并多發生于春、秋兩季,具有一定的季節性。2015年3月我國廣東某豬場暴發豬水皰性疾病,發病豬只鼻部和口腔形成潰瘍,厭食、跛行、新生仔豬急性死亡。經檢測證實為感染SVA所致。從陽性病料中成功擴增獲得SVA全基因組,并命名為CH-01-2015。研究顯示該分離毒株與來自加拿大、巴西和美國的8株分離株SVA同源性高達94.4%~97.1%。首次報道我國豬群中存在SVA感染。2016—2017年在我國華南、華中、福建、河南、湖北及東北地區的豬群先后發生該病,現已表明我國豬群中的SVA感染已呈現區域性分布,應引起高度重視。
豬只感染SVA后,病豬鼻吻、口腔黏膜及蹄冠部(任何皮膚黏膜交界處)出現小水皰,水皰破損后導致急性跛行與出現潰瘍性病變,冠狀帶和蹄壁周圍發紅,皮膚充血,病豬表現出四肢無力、厭食、發熱、昏睡、流涎。發病3天左右,新生仔豬可突然出現急性死亡(死亡率可達30%~70%),并伴有腹瀉。肥育豬發病有80%~90%的病例出現蹄部病變,鼻與口腔出現病變的比例不足25%,但均表現出跛行(瘸腿)。母豬發病約有10%的病例表現跛行與蹄部病變癥狀,并伴有輕度的嗜睡與厭食。
死亡仔豬剖檢可見腎臟點狀出血,間質性肺炎,舌、鼻吻、蹄冠等處有潰瘍病灶,舌炎等。組織學變化可見舌上皮細胞球樣變性和膀胱尿路上皮細胞球狀變性等。
根據本病的流行特點、臨床特性及病理變化只能作出初步診斷,確診本病一定要進行實驗室診斷,并要與豬口蹄疫(FMD)、豬水皰性口炎(VSI)、豬傳染性水皰疹病(VES)和豬水皰病(SVD)等進行鑒別診斷。
競爭ELISA(cELISA),通過待測抗體與預先制備的抗SVA單克隆抗體(mAb)競爭結合SVA抗原,來評價待測抗體的效價。此法特異性強、敏感性高,不存在交叉反應,目前已被廣泛用于豬病毒血清學診斷。
間接免疫熒光試驗、實時熒光定量PCR、原位雜交技術以及免疫組化染色法等均可用于病原學診斷、流行病學調查與鑒別診斷,其具有敏感、特異、快速的特點。
SVA為外來動物疫病,國家有關行政主管部門要密切關注國際疫情動態,做好風險評估與預警預報工作,十分必要。我國每年從巴西、美國、新西蘭與加拿大等國引進種豬、種牛及遺傳物質(胚胎、精液等)數量較大,國家還沒有把本病列入進出境檢疫動物疫病名錄。因此,通過引種和遺傳物質可能已把SVA傳入我國。雖然SVA是一種新出現的動物疫病,目前對公共衛生安全和造成的經濟損失不像其他動物疫病那樣明顯與嚴重,但也不能掉以輕心,一定要引起高度重視。目前在密切關注本病發生與流行的國際疫情動態的同時,更要重點關注國內發生流行出現的新情況與新態勢。盡快啟動對本病的專項監測工作,對種豬場進行嚴格排查,做好風險評估和預警預報工作,盡可能控制SVA發生與流行,降低其造成的經濟損失,保障養豬業的健康持續發展。
血清學研究發現,在自然條件下,豬感染SVA后可產生中和抗體,但目前尚無可使用的疫苗。因此,我國應盡快組織相關的科研院所和高等農業院校的科技力量,開展SVA流行病學調查、病原學生物特性研究以及快速鑒別診斷方法和疫苗的研發,盡快為防控提供高效、安全的疫苗,以保障養豬生產與公共衛生的安全。
目前國內發生SVA疫情時可參照農業部頒布的《口蹄疫防控技術規范》和防控應急預案進行果斷處置,能取得滿意的防控效果。養豬場引種時要嚴格檢疫;豬群實行“全進全出”隔離分群飼養;加強科學的飼養管理,飼喂全價的綠色飼料,禁止添加抗生素;建立良好的生物安全體系,堅持消毒制度,定期滅鼠、殺滅吸血昆蟲,消滅傳染源,切斷傳播途徑,防止SVA在豬場的發生與流行。豬場發生SVA要及時進行封鎖、隔離,撲殺病豬,徹底消毒,嚴防疫情擴散。
目前本病無特效的治療藥物,一般臨床上可進行對癥治療。如用黃芪多糖注射液(每千克體重1毫升)、加豬用干擾素(每40千克體重1毫升)、加排疫肽(復合免疫球蛋白,每50千克體重1毫升),混合肌注,每日1次,連用3天;為防止水皰破裂后與潰瘍病灶繼發感染細菌及體溫升高,可肌注頭孢噻呋鈉注射液,每千克體重2毫升,每日1次,連用3天。鼻部、蹄冠部及口唇部潰瘍病灶可用0.1%高錳酸鉀溶液沖洗,然后涂擦碘甘油,每日處理1次。病豬一律改飲:電解質多維600克、葡萄糖粉600克、維生素C 200克,對水1噸,連續飲用7天;哺乳仔豬實施人工喂乳。