規模化種豬場豬偽狂犬病凈化方法研究

彭 峰，江倩倩，章四新，王建舉，蘇 雷

（河南省諸美種豬育種集團有限公司，河南 駐馬店 463612）

豬偽狂犬病是由豬偽狂犬病病毒引起的一種急性熱性傳染病，感染后豬的臨床癥狀因感染日齡不同而異，母豬主要表現為產死胎、弱仔等繁殖障礙；公豬表現為睪丸腫大，精液質量下降；仔豬以神經癥狀最為常見，感染后15日齡內仔豬死亡率可達100%[1]，給養豬業造成巨大經濟損失。世界動物衛生組織將其列為B類動物疫病，我國將其列為二類動物疫病。豬偽狂犬病病毒可隨患病母豬的鼻液、乳汁、尿液等分泌物排出而感染仔豬，患病種公豬可經精液將病毒傳播給母豬。因此，對種豬群進行豬偽狂犬病凈化意義重大，同時，也有學者認為種豬場實現偽狂犬病凈化勢在必行[2]。

在國外，美國、英國、荷蘭等國家已在全國范圍內實現豬偽狂犬病的凈化，法國于1989年實施豬偽狂犬病根除計劃，計劃實施后，1998年法國豬偽狂犬病野毒感染抗體陽性率從1995年的24.7%降至4.5%[3]。我國豬偽狂犬病凈化起步較晚，在全國范圍內還未進行該病的凈化計劃，但經過一些學者和養殖企業的努力，部分豬場也已成功清除了豬偽狂犬病。

本次試驗豬場使用偽狂犬病gE基因缺失疫苗對豬群進行免疫，所以我們采用偽狂犬病gB-ELISA方法對豬群免疫抗體進行抽樣監測，適時調整免疫程序；采用偽狂犬病gE-ELISA對豬群野毒感染抗體進行抽樣監測，及時淘汰偽狂犬病gE抗體陽性豬。經過兩年持續不斷的檢測淘汰，使種公母豬群偽狂犬病gE抗體陽性率降至0并維持陰性，從而達到凈化目標。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

1.1.1 試驗豬場 河南某規模化種豬場，基礎母豬群1 109頭，種公豬102頭，年出欄種豬15 000頭。

1.1.2 試驗試劑 偽狂犬病gB抗體檢測試劑盒、偽狂犬病gE抗體檢測試劑盒均購自IDEXX公司；豬偽狂犬病gE基因缺失活疫苗購自梅里亞公司；豬偽狂犬病gE基因缺失滅活疫苗購自武漢科前公司。

1.2 試驗方法

1.2.1 凈化措施

（1）嚴把疫苗質量關，選擇業內口碑好的疫苗公司生產的產品。結合化驗室監測數據，確定免疫程序為：仔豬1日齡時滴鼻1頭份偽狂犬病活疫苗，70、98日齡時分別進行肌注1頭份偽狂犬病活疫苗，119、147日齡時肌注2 mL/頭偽狂犬病滅活疫苗，后備豬配種前肌注1頭份偽狂犬病活疫苗，種公母豬每年普防4次，每次肌注1頭份偽狂犬病活疫苗。

（2）完善生物安全措施。1）在距離場區大門口一定距離處建停車場和消毒中心，公司員工及外來客戶的車輛均停在停車場內。外來購豬車輛需清洗干凈后進入消毒中心進行噴霧消毒。購豬車輛不能進入場區，通過裝豬臺隔絕裝豬車和內部的接觸，賣豬結束后對裝豬臺進行徹底清洗消毒。2）購豬客戶不能進入生產區，可通過預售種豬觀察舍對種豬進行觀察挑選。本場員工外出后需進行隔離洗浴方可進入場區。3）生產區、生活區、糞污和無害化處理區通過綠化帶和圍墻進行有效分割。4）定期對豬場內部及周邊雜草進行清除，及時清除水坑等蚊蠅孳生地。5）每棟豬舍門口設有專門的消毒池，人員進出均需消毒，消毒池內的消毒液要定期更換。6）豬群實行嚴格的全進全出制，豬舍內豬群轉出后對豬舍進行全面徹底的清洗消毒。7）在生產區實施滅鼠、滅蚊蠅、防鳥、防貓狗等措施，將病原微生物的傳播媒介降到最低。

（3）部分清群法和檢測淘汰法。1）對符合體重要求的肥育豬和保育豬進行出售，剩余豬全部轉移至另一擴繁場進行飼養，對豬場肥育區和保育區進行徹底清潔、消毒、圈舍修整。2）對所有種公母豬和后備公母豬進行偽狂犬病gB和偽狂犬病gE抗體檢測，對偽狂犬病gB抗體陰性豬進行補免豬偽狂犬病gE基因缺失活疫苗，淘汰偽狂犬病gE抗體陽性豬。

（4）制定監測計劃。部分清群法和檢測淘汰法凈化之后，每季度按比例在各階段豬群中采血進行偽狂犬病gB和偽狂犬病gE抗體檢測。1）仔豬群按10%的比例分別在 2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24周齡進行采血檢測。2）母豬每季度按40頭的數量分別在妊娠、哺乳、空懷等階段豬群中進行采血檢測。3）公豬群每季度按25%的比例進行采血檢測。4）本場選留的后備豬在入群前45 d進行采血檢測，偽狂犬病gE抗體陽性豬立即淘汰，偽狂犬病gB抗體陰性者補免后2周重新檢測，抗體合格者入群，仍為陰性者淘汰。

1.2.2 血樣采集及化驗室檢測

（1）按照監測計劃對各階段豬群進行前腔靜脈采血，血樣采集由豬場各階段負責人監督采血，確保采血豬只耳號及免疫背景記錄清晰準確，采血結束后血樣由專人送至化驗室。常規方法分離血清后保存于無菌離心管，進行相關檢測之后血清于-20℃凍存。

（2）化驗室檢測人員嚴格按照檢測試劑盒步驟要求對血清進行偽狂犬病gB抗體和偽狂犬病gE抗體檢測。

（3）根據各階段豬群偽狂犬病gB抗體消長規律，適時對豬偽狂犬病免疫程序進行調整；對檢測出的偽狂犬病gE抗體陽性血清對應的豬只及時淘汰。

2 試驗結果

由表1、表2可知，該場2015年種母豬群偽狂犬病gE抗體陽性率為3.8%，種公豬群偽狂犬病gE抗體陽性率為3.3%，經過兩年持續檢測淘汰的凈化，2017年種豬群偽狂犬病gE抗體陽性率均降至0，并一直維持至今。通過堅持自繁自養、全進全出的飼養模式，以及對選留的后備豬進行嚴格的免疫抗體及野毒感染抗體的檢測，后備母豬及后備公豬偽狂犬病gE抗體陽性率分別從1.7%和2.2%均降至0，并一直維持至今。同時，從2015—2017年各階段豬群成活率和母豬生產性能均有明顯提升（表3、表4）。

表1 2015—2017年能繁種公母豬的偽狂犬病gB、gE抗體檢測結果

表2 2015—2017年后備公母豬的偽狂犬病gB、gE抗體檢測結果

表3 2015—2017年分娩率及產仔數

表4 2015—2017年各階段成活率

3 討論

本次凈化主要采用ELISA檢測方法，該檢測方法具有快速、簡便、敏感性高等優點，OIE（世界動物衛生組織）將其作為診斷豬偽狂犬病的首選血清學方法，美國也將其作為檢測豬偽狂犬病的法定檢測方法之一[4]。

經過兩年持續不斷的檢測淘汰方法，公豬群在2016年達到偽狂犬病gE抗體陰性狀態，這一結果也為后續母豬群進行凈化提供了有力保障，避免母豬使用陽性公豬精液被感染的風險。母豬群在2015年偽狂犬病gE抗體陽性率為3.8%，經過凈化，在2017年陽性率降至0，這也說明，當母豬群感染抗體陽性率較低時（＜5%），采用檢測淘汰陽性母豬的方法，是比較經濟快速的凈化方法。有學者經過4年凈化在72家規模化豬場中有14家豬場野毒感染抗體陽性率降為0[5]。該場后備豬群均為本場選留，在2016年也達到了偽狂犬病gE抗體陰性狀態，這與該場主要是自繁自養，未從國內引過種豬，并且在后備豬入群前進行了嚴格的免疫抗體與感染抗體檢測有關，在對后備豬進行檢測后，淘汰偽狂犬病gE抗體陽性豬只，對偽狂犬病gB抗體陰性豬只進行補免偽狂犬病gE基因缺失活疫苗，2周后重新采血進行偽狂犬病gB抗體檢測，gB抗體陽性豬只留種，仍為陰性者不留種用。

該場之所以取得了比較徹底的豬偽狂犬病凈化成果，主要與以下幾方面有關：一、實行了嚴格的全進全出制度，豬群轉出后對圈舍進行徹底的清洗消毒，并且加強了場內外的生物安全措施，降低了偽狂犬病病毒在豬群間傳播的風險；二、該場2013年最后一次從美國引進種豬，未從國內種豬場進行過引種，堅持自繁自養的模式，后備公母豬均為本場選留，避免了引種時從外場帶進病毒的風險；三、堅持對豬群免疫抗體及感染抗體的監測，及時了解豬群免疫抗體消長規律，適時調整免疫程序。對檢測到的偽狂犬病gE抗體陽性豬及時淘汰，避免其傳播病毒，感染其他豬只；四、及時調整免疫程序，通過對豬群免疫抗體及感染抗體進行監測發現，豬場肥育后期會出現部分豬偽狂犬病gE抗體轉陽現象，本場將119日齡免疫科前公司偽狂犬病gE基因缺失滅活疫苗改為免疫梅里亞公司偽狂犬病gE基因缺失活疫苗，豬群偽狂犬病gE抗體轉陽現象得到有效控制。調整后的免疫程序為：仔豬群1日齡滴鼻免疫梅里亞偽狂犬病活疫苗，70、98、119日齡肌注免疫梅里亞偽狂犬病活疫苗，147日齡肌注免疫武漢科前偽狂犬病滅活疫苗，后備豬配種前肌注1頭份偽狂犬病活疫苗，種公母豬每年普防4次，每次肌注1頭份偽狂犬病活疫苗。

規模化豬場進行豬偽狂犬病凈化時應充分考慮本場的免疫程序、生物安全、免疫抗體的消長規律等多方面的因素，同時不能忽視飼養管理在疫病凈化工作中所起的作用，以及豬場中其他疾病如豬瘟、藍耳病、圓環病毒病等影響，應采取綜合防控措施才會在偽狂犬病凈化的工作中取得良好效果。