黃芪甲苷、人參皂苷Rg1對慢性萎縮性胃炎大鼠Hedgehog信號通路的調控影響

趙唯含 史瑞 楊美娟 高康麗 李寧飛 李軍祥

慢性萎縮性胃炎(chronic atrophic gastritis，CAG)是臨床常見的消化系統疾病，以胃黏膜上皮和腺體萎縮或伴有腸化生及不典型增生為特征表現[1]。現代醫學對于本病的治療主要是緩解癥狀，如應用促胃動力藥、胃黏膜保護劑及抑酸劑等，而中醫藥憑借其優勢在治療CAG中扮演著重要角色[2]。黃芪和三七是健脾益氣和活血化瘀藥的代表，黃芪中的主要有效成分是黃芪甲苷，三七中的主要有效成分是人參皂苷Rg1。以往研究發現黃芪及三七可以通過激活Hedgehog信號通路關鍵因子改善萎縮性胃炎大鼠胃黏膜的萎縮狀態。本次實驗將進一步對黃芪和三七的有效成分黃芪甲苷及人參皂苷Rg1治療CAG的作用機制進行探討。

1 材料與方法

1.1 實驗動物

健康雄性Wistar大鼠80只，體重(160±20) g，SPF級，由北京華阜康生物科技股份有限公司提供，動物許可證編號：SCXK(京)20090007，飼養于北京市中醫研究所SPF級動物飼養間，12小時光照/黑夜循環，相對恒溫(25℃)，恒濕(75%)。

1.2 試劑與藥物

黃芪甲苷(Astragaloside IV，AST)分子式：C41H68O14，分子量784，標準品，購自北京市藥品檢驗所，編號：110781；人參皂苷Rg1(Ginsenoside Rg1，GSS)：標準品，購自北京萬誠科貿有限公司，純度≥98%(HPLC); Purmorphamine購自上海浩然生物有限公司; 特異性抗體Shh購自美國CST公司，Gli-1、Ptch、SUFU、CyclinD1和β-actin購自美國abcam公司；辣根過氧化物酶(horse radish peroxidase，HRP)標記羊抗鼠或兔抗羊二抗購自北京中杉金橋生物技術有限公司；組織裂解液和BCA蛋白濃度測定試劑盒購自美國Promega公司；ReverTra Ace qPCR RT Kit和THUNDERBIRD SYBR qPCR Mix購自日本Toyobo公司；PV-9001、PV-9003免疫組化檢測試劑購于北京中杉金橋生物技術有限公司。

1.3 實驗動物分組及給藥

采用幽門彈簧植入術配合高鹽熱淀粉糊灌胃法制備萎縮性胃炎大鼠模型[3]。……