血清CEA、miR-1、let-7聯合檢測在肺癌診斷中的應用價值

葉火林，高淑平，畢向軍，孫成暉，劉漢起，譚艷玲，陳桂茹

(陽春市人民醫檢驗科1、腫瘤科2，廣東 陽春 529600)

血清CEA、miR-1、let-7聯合檢測在肺癌診斷中的應用價值

葉火林1，高淑平1，畢向軍2，孫成暉2，劉漢起1，譚艷玲1，陳桂茹1

(陽春市人民醫檢驗科1、腫瘤科2，廣東 陽春 529600)

目的探討血清癌胚抗原(CEA)、血清miR-1、let-7聯合檢測在肺癌診斷中的應用價值。方法選取陽春市人民醫檢2015年8月至2016年12月期間收治的62例肺癌患者為研究對象，選擇同期健康體檢者50例納入對照組，檢測血清CEA水平，同時采用定量反轉錄聚合酶鏈式反應(qRT-PCR)法檢測血清miR-1、let-7水平。結果肺癌組血清CEA水平為(25.18±9.85)ng/mL，明顯高于對照組的(3.86±1.54)ng/mL，血清miR-1、let-7相對表達量分別為(0.286±0.112)、(0.368±0.158)，明顯低于對照組的(0.975±0.398)、(1.296±0.547)，差異均有統計學意義(P＜0.05)。結論血清CEA聯合miR-1、let-7的檢測有利于肺癌的早期診斷。

癌胚抗原；肺癌；微小核糖核酸；腫瘤標志物

肺癌是嚴重危害我國居民健康和生命的最常見惡性腫瘤，其病死率遠高于其他惡性腫瘤，并且其發病率和死亡率近年來在我國也呈現出上升趨勢[1]。目前臨床已廣泛開展血清癌胚抗原(CEA)等腫瘤標志物的檢測以期望對肺癌進行早期發現、診療，但是單一血清腫瘤標志物檢測最大的不足在于靈敏度及特異性不強，特別是在腫瘤的早期檢出率不高[2]。微小RNA(miRNA)是一類內源性、非編碼的單鏈小分子RNA，近年來研究證明其在惡性腫瘤發生、發展過程中具有重要作用[3]。本研究旨在探討血清CEA聯合血清miR-1、let-7檢測在肺癌診斷中的應用價值，以期望為臨床上肺癌的早期診斷提供更充分的依據，為肺癌的治療研究提供新的診療策略。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取陽春市人民醫院2015年8月至2016年12月期間收治的62例肺癌患者為研究對象，其中男性36例，女性26例，年齡36～77歲，平均(62.8±11.3)歲；均經術后病理確診為肺癌，鱗癌30例、腺癌16例、腺鱗癌10例、小細胞肺癌6例。排除合并急慢性感染、其他惡性腫瘤、血液系統疾病、自身免疫性疾病、肝腎功能不全以及合并遠處轉移的患者。選擇同期健康體檢者50例納入對照組，體檢結果均正常且無腫瘤病史，其中男性30例，女性20例，平均年齡(61.0±12.8)歲。兩組受檢者的年齡、性別比較差異均無統計學意義(P＞0.05)，具有可比性。

1.2 研究方法兩組受檢者均于入組次日抽取空腹靜脈血3 mL，在24 h內以3 000 r/min離心，10 min后分離上清液并保存于-80℃條件下待測。血清CEA在Luminex200多功能流式點陣儀上采用流式熒光發光法進行檢測，血清miR-1、let-7采用定量反轉錄聚合酶鏈式反應(qRT-PCR)法進行測定。

1.3 統計學方法應用SPSS19.0統計學軟件進行數據分析，計量資料以均數±標準差(x-±s)表示，兩樣本均數的比較采用t檢驗，計數資料采用χ2檢驗，均以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

肺癌組血清CEA水平明顯高于對照組，血清miR-1、let-7相對表達量明顯低于對照組，差異均有統計學意義(P＜0.05)，見表1。

表1 兩組受檢者血清CEA、miR-1、let-7水平的比較(±s)

表1 兩組受檢者血清CEA、miR-1、let-7水平的比較(±s)

組別 例數CEA(ng/mL)miR-1let-7肺癌組對照組t值P值64 50 25.18±9.85 3.86±1.54 15.147＜0.05 0.286±0.112 0.975±0.398 13.219＜0.05 0.368±0.158 1.296±0.547 12.914＜0.05

3 討論

肺癌的發病率和死亡率在我國一直居于所有惡性腫瘤的首位，調查顯示我國肺癌發病率、死亡率占所有惡性腫瘤的19.59%、24.89%[4]。肺癌早期缺乏特異性的臨床表現，多數患者經影像學和病理診斷時已經發生了擴散或遠處轉移。雖然很多學者針對肺癌臨床和機制的研究已經進行了深入研究，但肺癌患者的預后仍然不盡人意，肺癌的五年生存率僅為11%[5]。因此，尋找可靠的肺癌腫瘤標志物對其進行早期診斷、早期治療對改善患者的預后具有重要的臨床意義。CEA是傳統的肺癌血清學標志物，其在胚胎期表達，但是不表達于正常成年人。研究表明血清CEA升高程度與癌細胞數量、腫瘤復發或轉移均有相關性，是目前肺癌早期診斷中應用最廣泛的血清腫瘤標志物[6]。單一的腫瘤標志物檢測可能會造成部分患者漏診，聯合檢測則可明顯提高早期腫瘤的檢出率[7]。

目前在腫瘤發生發展的分子機制的研究中，蛋白質編碼基因已經成為各研究的重點。miRNA是一類大小約22 nt的單鏈小分子RNA，可參與到多種生物學過程包括肺癌的發生、發展[8]。miRNA在腫瘤發生時存在突變、表達上調或降低等現象。最近的研究顯示，miRNA表達差異有助于惡性腫瘤早期診斷和療效預測，是一種新型的腫瘤標志物，結合傳統腫瘤標志物與相關miRNA的檢測有助于發現早期腫瘤，提高腫瘤診斷的正確性和特異性。研究發現，miR-21、miR-486、miR-375和miR-200b在痰液標本及手術切除肺癌組織中的共表達作為預測肺腺癌的生物標記物，敏感度與特異度分別達到了80.6%和91.7%[9]。miR-1、let-7均被眾多研究證實可在腫瘤中起到“抑癌基因”的作用。劉旭斌等[10]研究指出肝細胞癌患者血清let-7表達水平較正常對照組降低；2011年日本學者發現，在肺癌患者樣本中let-7表達異常，這也為其診斷和治療提供了新基礎[11]；Mohd等[12]研究發現miR-1是治療肺癌的一個潛在靶點。本研究發現肺癌組血清CEA水平明顯高于對照組，血清miR-1、let-7相對表達量明顯低于對照組，說明血清CEA是診斷肺癌的可靠血清標志物，進一步聯合血清miR-1、let-7的檢測有利于肺癌的早期診斷。

綜上所述，血清miR-1、let-7在肺癌患者明顯降低，血清CEA聯合miR-1、let-7的檢測有利于肺癌的早期診斷。

[1]姚曉軍,張洪偉,蒲強,等.2000年與2010年四川大學華西醫院收治肺癌患者的臨床流行病學特征及病理類型分布特點[J].四川大學學報(醫學版),2014,45(2):309-315.

[2]李海燕,劉紅,王靜,等.腫瘤標志物聯合檢測在肺癌診斷中的價值[J].中國老年學雜志,2012,32(1):46-48.

[3]鄭翠玲,韓曉紅.微小RNA在肺癌診斷和靶向治療及預后判斷中的作用[J].中華檢驗醫學雜志,2012,35(6):571-573.

[4]張仁鋒,張巖,溫豐標,等.6 058例肺癌患者病理類型和臨床流行病學特征的分析[J].中國肺癌雜志,2016,19(3):129-135.

[5]侯量,朱佳龍,顧國軍.非小細胞肺癌患者行胸腔鏡下手術治療的圍術期狀況及遠期生存狀況研究[J].中國內鏡雜志,2016,22(8):70-73.

[6]魯礴,楊玉梅.血清糖類抗原及癌胚抗原聯合檢測在肺癌診斷中的意義[J].檢驗醫學與臨床,2012,9(2):172-173,176.

[7]曾聰,全國莉,王春蓮.聯合檢測6種血清腫瘤標志物在肺癌診斷中的意義[J].廣東醫學,2012,33(6):808-810.

[8]毛愷,張平暉,張立國.microRNA在肺癌早期診斷中的研究進展[J].腫瘤研究與臨床,2012,24(6):430-432.

[9]Yu L,Todd NW,Xing L,et al.Early detection of lung adenocarcinoma in sputum by a panel of microRNA markers[J].Int J Cancer,2010,127(12):2870-2878.

[10]劉旭斌,鄒漢良,余德奎,等.肝細胞癌患者血清let-7a,let-7f表達水平及其臨床意義[J].肝臟,2015,20(9):733-735.

[11]Osada,H,Takahashi.let-7 and miR-17-92:small-sized major players in lung cancer development[J].Cancer Sci,2011,102(1):9-17.

[12]Mohd W,Nasser,Jharna Datta,et al.Down-regulation of micro-RNA-1(miR-1)in lung cancer.Suppression of tumorigenic property of lung cancer cells and their sensitization to doxorubicin-induced apoptosis by miR-1[J].J Biol Chem,2008,283(48):33394-33405.

R734.2

B

1003—6350（2017）23—3938—02

10.3969/j.issn.1003-6350.2017.23.053

廣東省陽春市科技計劃項目(編號：社【2016】45)

葉火林。E-mail：13829868868@139.com

2017-04-13)