MS基本培養基誘導玉米成熟胚愈傷組織影響因素的研究

[摘 要] 為了解成熟胚愈傷組織誘導的影響因素，以MS培養基為基本培養基，玉米成熟胚為外植體，NAA和2，4-D為生長調節劑進行試驗研究。結果表明，對于玉米成熟胚愈傷組織的誘導，NAA為1.0、2.0mg/L和2，4-D為5.0 mg/L最為有利；與NAA相比，2，4-D的誘導效果略好。

[關鍵詞] 玉米；成熟胚；愈傷組織；誘導

[中圖分類號] S513 [文獻標識碼] A [文章編號] 1674-7909（2017）31-74-1

玉米組織培養有利于克服育種中存在的問題，建立高效的體細胞再生體系，為玉米外源基因的轉化創造有利條件，是遺傳轉化中的重要環節[1]。不同外植體形成愈傷組織及分化能力有很大差異，幼胚是最易誘導且使用最多的外植體[2]，目前已建立了比較完善的組織培養體系。但從取材時間、保存難易、取用是否方便來看，成熟胚更加適合。

1 材料與方法

1.1 試驗材料、儀器

試驗材料為先玉335成熟種子。試驗儀器有超凈工作臺、高壓滅菌設備、培養皿、不銹鋼鑷子、解剖刀、解剖針、酒精燈和三角瓶等。

1.2 試驗方法

1.2.1 培養基設計。以蔗糖濃度為30 g/L，瓊脂為7 g/L，pH值為5.8的MS培養基，共設計10種成熟胚愈傷組織誘導培養基組合，濃度均分別為1.0、2.0、3.0、5.0 mg/L和8.0 mg/L的NAA和2，4-D為生長素。

1.2.2 誘導玉米成熟胚的愈傷組織。在溫度為24～25 ℃的黑暗和12 h光照強度為1 500～2 000 lx的光照條件下，將每個接了3塊分離出的成熟胚的滅菌培養基培養30 d。

2 結果與分析

在MS基本培養基上，當NAA和2，4-D的濃度為2.0、3.0 mg/L時，2種生長劑的誘導情況基本沒有差別，其他濃度時兩者差別明顯。但用平均數作比較，MS基本培養基上NAA和2，4-D對玉米成熟胚愈傷組織的誘導率分別為64.00%和65.35%，二者差別很小，生長素NAA與2，4-D都起到了誘導作用，起到的作用差別不大，但2，4-D的誘導效果比NAA稍微好一些。

由圖1可以看出，在MS培養基上NAA在濃度為1.0 mg/L和2.0 mg/L時的誘導率最高且相同，均為76.67%，明顯高于在其他濃度時對玉米成熟胚愈傷組織的誘導率；2，4-D濃度為2.0、3.0、5.0 mg/L時的誘導率分別為80.00%、70.00%、86.67%，高于在其他濃度時對玉米成熟胚愈傷組織的誘導率，其中濃度為2.0 mg/L和5.0 mg/L時的誘導率略高于NAA濃度為1.0 mg/L和2.0 mg/L時的誘導率。

3 結論

以MS培養基為基本培養基，NAA和2，4-D為生長調節劑，進行玉米成熟胚愈傷組織誘導，NAA為1.0、2.0 mg/L時和2，4-D為5.0 mg/L時最為有利；雖然二者在平均值來看，差別不明顯，但2，4-D的誘導效果略好些。

通過開展MS培養基上不同種類、不同濃度生長素處理下玉米成熟胚愈傷組織的誘導試驗，以篩選出比較適合成熟胚誘導愈傷組織的培養基，從而建立完善的玉米成熟胚培養體系，為玉米的品質改良奠定基礎。在后續試驗中，還需繼續對玉米成熟胚愈傷組織誘導中的各種影響因素進行更深一步的研究，以便提高玉米成熟胚愈傷組織的誘導率，從而建立完善的玉米成熟胚培養體系。

參考文獻

[1]祁新，趙穎君，胡文河，等.玉米幼胚培養的研究[J].河北師范大學學報（自然科學版），2003（2）：189-206.

[2]陳英，曹毅，周先禮.玉米幼胚的組織培養及其植株再生的研究[J].四川大學學報（自然科學版），1999（6）：1125-1129.