酶抑制法快速檢測(cè)農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留的研究與應(yīng)用

[摘 要] 由于酶抑制法具有方便快捷、成本低、操作簡(jiǎn)單、對(duì)環(huán)境要求低的優(yōu)勢(shì)，因此是我國(guó)農(nóng)藥殘留檢測(cè)的重要技術(shù)。本文就酶抑制法快速檢測(cè)農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留的應(yīng)用展開(kāi)分析。

[關(guān)鍵詞] 酶抑制法；農(nóng)產(chǎn)品；農(nóng)藥殘留

[中圖分類號(hào)] S481 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1674-7909（2017）23-81-1

酶抑制法是當(dāng)前市場(chǎng)上進(jìn)行農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留檢測(cè)的主要方法，因此，市場(chǎng)上出售的快速檢測(cè)試劑一直以酶抑制劑為主。但是，由于試劑使用的酶來(lái)源不同，對(duì)檢測(cè)的要求則有所區(qū)別，經(jīng)常會(huì)出現(xiàn)檢測(cè)結(jié)果呈假陰性或者假陽(yáng)性現(xiàn)象，導(dǎo)致測(cè)試結(jié)果并不準(zhǔn)確。

1 材料與方法

試驗(yàn)需要不同種類農(nóng)藥稀釋溶液若干，5種不同廠家的酶抑制檢測(cè)試劑（試劑A、B、C、D、E），分光型光度計(jì)，農(nóng)藥殘留測(cè)試儀1臺(tái)，恒溫水浴鍋1個(gè)。

首先，取農(nóng)藥稀釋溶液1支，用不同廠家的酶抑制檢測(cè)試劑進(jìn)行快速檢測(cè)。然后，用光度計(jì)進(jìn)行測(cè)量，計(jì)算不同廠家試劑的抑制率，并進(jìn)行對(duì)比分析[1]。

2 結(jié)果與分析

2.1 試劑酶活性

通過(guò)對(duì)5個(gè)廠家的檢測(cè)試劑進(jìn)行酶動(dòng)力檢測(cè)分析發(fā)現(xiàn)，試劑A的酶動(dòng)力曲線出現(xiàn)彎曲的時(shí)間為445 s，吸光度為1.6；試劑B和試劑E的酶動(dòng)力在874、864 s出現(xiàn)彎曲，吸光度為2.7；試劑C和試劑D的酶動(dòng)力在610、712 s時(shí)發(fā)生彎曲，吸光度一直呈上升趨勢(shì)。通過(guò)對(duì)5個(gè)廠家的試劑進(jìn)行檢測(cè)可以看出，試劑B的酶動(dòng)力反應(yīng)時(shí)間最長(zhǎng)，而時(shí)間最短的是試劑A，結(jié)合酶抑制率的計(jì)算公式可以得出，當(dāng)試劑的酶抑制反應(yīng)結(jié)束之后進(jìn)行對(duì)照分析試驗(yàn)時(shí)，吸光值減小，結(jié)果呈假陰性。而如果當(dāng)吸光反應(yīng)數(shù)值趨近于0時(shí)，則結(jié)果為假陽(yáng)性。

在日常的檢測(cè)工作中，需要通過(guò)酶抑制法進(jìn)行大量的檢測(cè)試驗(yàn)，因此，所有試驗(yàn)?zāi)芊裨谕粫r(shí)間內(nèi)完成一級(jí)酶抑制反應(yīng)非常重要。在國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的檢測(cè)中，酶抑制吸光值>0.3則為合格，而許多反應(yīng)試驗(yàn)中，吸光度的數(shù)值已經(jīng)>1.0，超出了試驗(yàn)范圍。因此，在日常檢測(cè)過(guò)程中，儀器的吸光度標(biāo)準(zhǔn)還需要具體研究，建議在進(jìn)行農(nóng)藥殘留檢測(cè)時(shí)，先進(jìn)行一次試驗(yàn)，找到一級(jí)酶抑制反應(yīng)時(shí)間，然后再進(jìn)行檢測(cè)，保障每次檢測(cè)都在一級(jí)反應(yīng)過(guò)程中完成。此外，試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)同一試劑進(jìn)行二次試驗(yàn)時(shí)，結(jié)果差距很大，經(jīng)分析可能與試驗(yàn)溫度、試驗(yàn)設(shè)備有關(guān)。所以，在日常檢測(cè)過(guò)程中，每次檢測(cè)的樣品都需要進(jìn)行對(duì)照試驗(yàn)，不能與過(guò)去的檢測(cè)結(jié)果相比，檢測(cè)時(shí)必須在一級(jí)酶抑制反應(yīng)時(shí)間內(nèi)得出結(jié)果，保證檢測(cè)的準(zhǔn)確性。

2.2 酶活性與檢測(cè)抑制率

在當(dāng)前的農(nóng)藥市場(chǎng)中，主要的幾種農(nóng)藥產(chǎn)品有敵百蟲(chóng)、氧化樂(lè)果、滅多威等。經(jīng)過(guò)試驗(yàn)可以得出，酶抑制快速檢測(cè)試劑對(duì)滅多威、敵百蟲(chóng)等農(nóng)藥較為靈敏，對(duì)氧化樂(lè)果等農(nóng)藥反應(yīng)較慢。經(jīng)測(cè)試發(fā)現(xiàn)，當(dāng)試劑中的酶動(dòng)力不斷上升之后，農(nóng)藥對(duì)試劑的抑制能力開(kāi)始不斷下降，最終進(jìn)入平緩階段。在試驗(yàn)中，當(dāng)酶的活性值達(dá)到0.3～0.6時(shí)，農(nóng)藥對(duì)試劑的抑制率變化較小。但是，當(dāng)酶的活性值大于0.6之后，各個(gè)農(nóng)藥的抑制率開(kāi)始出現(xiàn)變化，數(shù)值呈波形運(yùn)動(dòng)，經(jīng)分析可能是吸光度對(duì)抑制率產(chǎn)生影響。因此，建議在實(shí)際的檢測(cè)中添加酶的數(shù)量需要使其活性保持在0.3～0.6，保障檢測(cè)的穩(wěn)定性。一旦酶的活性超過(guò)0.6，則會(huì)影響檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性，同時(shí)增加檢測(cè)成本，浪費(fèi)檢測(cè)材料[2]。

3 結(jié)論

在酶抑制法快速檢測(cè)過(guò)程中，不同酶的活性并不一致，直接影響檢測(cè)的抑制率。而且試驗(yàn)試劑的吸光值也會(huì)對(duì)試驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生影響。因此，建議先進(jìn)行試驗(yàn)，確定檢測(cè)的一級(jí)反應(yīng)時(shí)間，再進(jìn)行檢測(cè)。此外，不同廠家生產(chǎn)的試劑的抑制率不同，建議制定統(tǒng)一的抑制率標(biāo)準(zhǔn)，保障檢測(cè)的可靠性。

參考文獻(xiàn)

[1]程景.酶抑制率法在4種蔬菜農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)中的應(yīng)用[J].農(nóng)業(yè)與技術(shù)，2015（4）：3.

[2]陶程，賈君，郭俊.農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量檢測(cè)分析技術(shù)規(guī)范化操作探討——以酶抑制法快速檢測(cè)農(nóng)藥殘留為例[J].江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2014（6）：279-281.