化學發光免疫法在甲胎蛋白患者中的檢測效果及對結果的影響研究

鐘燕

（上海市普陀區曹楊街道社區衛生服務中心檢驗科，上海 200062）

化學發光免疫法在甲胎蛋白患者中的檢測效果及對結果的影響研究

鐘燕

（上海市普陀區曹楊街道社區衛生服務中心檢驗科，上海 200062）

目的探究化學發光免疫法在甲胎蛋白患者中的檢測效果及對結果的影響。方法使用化學免疫自動分析儀器對含有甲胎蛋白的血清進行檢測，此過程中要開展測量范圍驗證與最大可允許稀釋度兩項實驗，建立科學的可報告范圍，服務于臨床檢測工作。結果測量范圍為每毫升0.00 mg-912 mg，最大允許稀釋度為1:50，實驗測量值均值基本上符合分析儀靈敏度說明的數據。結論臨床檢驗醫師采用化學發光免疫法檢測甲胎蛋白，可準確測定甲胎蛋白的測定范圍及最大可允許的稀釋度，為建立臨床報告范圍提供參考。

化學發光免疫法；甲胎蛋白；檢測效果

近幾年化學發光免疫分析技術飛速發展，因其簡便、快速、無污染、自動化水平高等特點被廣泛應用于社區衛生服務中心。腫瘤標志物的最小濃度具有十分重要的意義，嚴重影響著臨床病情的判斷[1]，本文以甲胎蛋白為例，以社區衛生服務中心的就診患者的具體情況對化學發光免疫法在甲胎蛋白（AFP）患者中的檢測效果及對結果的影響進行研究分析，對廠家聲明的全自動發光儀的檢驗底限（LLD），進行驗證并建立對定量報告具有重要意義的生物檢測（BLD）及功能靈敏度（FS），現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 該實驗研究所用的檢驗儀器為貝克曼ACCESS II全自動化學發光儀，此外還包括配套校準物質、AFP試劑和質控產品。將AFP配套稀釋液作為空白樣品，低濃度校準品作為原始樣品。用空白樣品對原始樣品做系列稀釋（濃度依次為1.06 ng/mL、1.32 ng/mL、1.76 ng/mL、2.65 ng/mL、3.53 ng/mL、5.29 ng/mL），若檢測結果顯示低濃度樣品比預期檢測限度低，則將這些系列樣品做為檢測全自動化學發光儀靈敏度的實驗樣品。

1.2 方法 實驗操作前先按作業指示書對儀器進行維護保養、校檢和質量監控。并完成樣品準備，空白樣品批內重復測定10次；稀釋后的系列濃度實驗樣品日間重復測定10次。

開展測量范圍驗證時，首先將制備好的空白樣品置于發光儀上，實施測定并重復4次，確保每一次的實際測得值都能被準確讀取并記錄，實驗結束后將其與預期值進行比較，分析測量范圍[2]。在測量最大稀釋度時，將預先準備好的實驗樣品置于發光儀上進行檢測，實時記錄監測數據，并將其與稀釋后的預期值比較。

1.3 觀察指標 LDL是指樣品單次檢測達標時對映的分析物量。按照國際純粹和應用化學聯合會的規定，測量值平均水平為99.7%時，可按照規定的公式計算其檢測底限。BLD確定所采用的方式為LDL加3倍檢測底限樣本標準差，確定檢測系統可定量報告分析物的最低濃度。在系列的濃度測定時，以AFP、LLD的光強度值（RLUs）為界，將某濃度下所測的光強度值均值減去三倍，并將樣品標準差的光強度值仍然大于并和LLD的光量值最接近的對應濃度定為該濃度的BLD。

1.4 統計學方法 應用SPSS 18.0進行數據統計分析，計數資料采用率（%）表示，組間比較采用χ2檢驗；計量資料采用均數±標準差（Mean±SD）表示，組間比較采用t檢驗，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

測量范圍為每毫升0.00 mg-912 mg，最大允許稀釋度為1:50，實驗測量值均值臨床醫師可以此為根據設置AFP的報告范圍。基本上符合分析儀靈敏度說明的數據。結果見表1。

表1 AFP定量分析靈敏度實驗結果

3 討論

AFP屬于糖蛋白，主要在卵黃囊、胚胎肝、胎兒胃腸道等部位合成。它在血漿蛋白總量中占據比例會在胎兒發育到13周時達到1/3，在妊娠30周時達到最大值，此后呈逐漸降低趨勢，周歲時即可達到成人的水平。化學發光的原理是激發態分子恢復到基態時，以光的形式釋放而產生的發光現象[3]。用發光劑直接標記抗體的免疫分析法的主要操作是利用化學發光系統作為抗原抗體反應的指示系統，標記所選用的試劑具有穩定和無毒性的特點，不僅不會污染環境，也不會損害到工作人員的身體健康。實驗過程中使用的全自動化學發光儀，可以直接處理并檢測樣品，檢驗不受時間、空間的限制，出結果所需的時間大大縮短，顯著提高了工作效率，能充分滿足臨床的需求[4]。

綜上所述，化學發光免疫法靈敏度高，有效期長，對環境和工作人員負面影響十分輕微。臨床檢驗醫師采用化學發光免疫法檢測AFP，可準確測定AFP的測定范圍及最大可允許的稀釋度，為建立臨床報告范圍提供參考，臨床推廣運用是大勢所趨。

[1] 廖妮. 基于自增強Ru(II)復合物構建的新型電致化學發光免疫傳感器檢測甲胎蛋白[J]. 分析測試學報, 2016, 35(7):832-838.

[2] 郭俊美. 磁微粒化學發光法測定甲胎蛋白[J]. 科研, 2016(5):00269.

[3] 鈔雪鵬, 袁姍. 不同免疫分析法檢測甲胎蛋白在原發性肝癌診斷中的臨床意義分析[J]. 醫學理論與實踐, 2017, 30(5):742-743.

[4] 肖俐霞, 林冠峰, 陳少瑯, 等. 人附睪分泌蛋白4光激化學發光免疫分析法的建立[J]. 熱帶醫學雜志, 2015, 15(5):592-595.