冠心病患者介入治療前后血清CGRP、HMGB1變化及其與支架內(nèi)再狹窄的關(guān)系

張 巍 石 蓓 許官學(xué) 趙然尊 劉志江 王正龍

(遵義醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院心內(nèi)科，貴州 遵義 563000)

冠心病患者介入治療前后血清CGRP、HMGB1變化及其與支架內(nèi)再狹窄的關(guān)系

張 巍 石 蓓 許官學(xué) 趙然尊 劉志江 王正龍

(遵義醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院心內(nèi)科，貴州 遵義 563000)

目的探討冠心病患者介入治療術(shù)前后血清降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)和高遷移率族蛋白(HMG)B1水平的變化及與支架內(nèi)再狹窄(ISR)的關(guān)系。方法選擇經(jīng)冠狀動脈造影(CAG)檢查確診并行經(jīng)皮冠狀動脈介入(PCI)治療的冠心病患者196例，依據(jù)診斷分為穩(wěn)定型心絞痛(SAP)組66例、不穩(wěn)定型心絞痛(UAP)組95例和急性心肌梗死(AMI)組35例，平均年齡(60.47±10.36)歲。分別檢測手術(shù)前后血清CGRP和HMGB1濃度。依據(jù)再次入院復(fù)查CAG，分析血清CGRP和HMGB1濃度與ISR發(fā)生的關(guān)系。結(jié)果血清學(xué)檢查顯示，患者術(shù)前CGRP水平為(57.44±6.34)ng/L，術(shù)后為(65.48±7.16)ng/L；術(shù)前HMGB1水平為(105.47±11.91)μg/L，術(shù)后為(128.57± 12.71)μg/L，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)，且術(shù)后水平變化隨疾病嚴重程度呈現(xiàn)增加趨勢。對150例患者隨訪發(fā)現(xiàn)，16例發(fā)生ISR。ISR組CGRP、HMGB1水平均高于非ISR組，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。結(jié)論ISR者血清CGRP和HMGB1術(shù)后濃度較術(shù)前有所升高，對臨床上預(yù)測ISR發(fā)生具有一定參考價值。

冠心病；介入治療；血清降鈣素基因相關(guān)肽；高遷移率族蛋白B1；支架內(nèi)再狹窄

冠心病是一種炎癥反應(yīng)相關(guān)性疾病，各種促炎癥和抗炎癥細胞因子如高遷移率族蛋白(HMG)B1、TNF-α和IL-6等參與并在疾病的發(fā)病過程中可能起著重要調(diào)節(jié)作用。經(jīng)皮冠狀動脈介入(PCI)治療是目前冠心病治療的一種重要手段，但PCI治療過程可能導(dǎo)致動脈內(nèi)皮損傷、激活平滑肌細胞遷移和增殖及促進多種炎癥細胞因子釋放〔1〕。研究顯示，血清降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)和HMGB1兩種因子可能具有擴血管、抑制血管平滑肌細胞增殖、保護內(nèi)皮細胞及參與血管重構(gòu)等生理過程，在PCI術(shù)后支架內(nèi)再狹窄(ISR)的發(fā)生中起著重要作用〔2〕。本研究擬分析PCI術(shù)前后血清CGRP和HMGB1水平的變化及其與ISR發(fā)生的關(guān)聯(lián)。

1 資料與方法

1.1研究對象 選取2013年1月至2016年9月遵義醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院心內(nèi)科冠狀動脈造影(CAG)確診的、行PCI手術(shù)治療的冠心病患者196例，男126例，女70例，年齡46～79歲，術(shù)后6～8個月復(fù)查CAG。依據(jù)入選對象診斷分為穩(wěn)定型心絞痛(SAP)組66例、不穩(wěn)定型心絞痛(UAP)組95例和急性心肌梗死(AMI)組35例，平均年齡(60.47±10.36)歲。另對150例患者術(shù)后進行隨訪，根據(jù)CAG復(fù)查分為ISR組16例和非ISR組134例。ISR診斷標準：PCI術(shù)后復(fù)查CAG，支架內(nèi)或支架邊緣5 mm血管內(nèi)徑狹窄程度不小于參照血管的50%。

1.2研究方法

1.2.1血清標本采集 抽取研究對象PCI術(shù)前、術(shù)后15 min冠狀動脈竇口處動脈血10 ml，4℃，3 000 r/min離心15 min，收集血清，于-80℃冰箱備用。

1.2.2GAG及PCI治療 應(yīng)用數(shù)字減影血管影像系統(tǒng)(Artis Zee Ceiling)，患者術(shù)前以2%利多卡因進行局部麻醉，取橈動脈或股動脈作為手術(shù)路徑血管，采用Seldinger法行左、右冠脈造影，造影結(jié)果由兩名富有介入和臨床經(jīng)驗的心血管內(nèi)科醫(yī)師，依照量化冠狀動脈造影(QCA)法獨立計算冠脈狹窄程度。

1.2.3血清CGRP、HMGB1檢測 采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)檢測血清CGRP、HMGB1濃度，分別加入標準品和經(jīng)5倍稀釋的待檢血清，每孔50 μl。加入酶標試劑50 μl，充分混勻后將反應(yīng)板置37℃中孵育30 min。接著每孔先加入顯色劑A和顯色劑B各50 μl，輕輕震蕩，37℃孵育15 min；然后每孔加50 μl終止液混勻，30 min內(nèi)用酶標儀于450 nm處檢測吸光度值(OD)。判定：以標準品建立標準曲線，根據(jù)樣品OD值計算出樣品血清中CGRP、HMGB1的濃度，×5為真實濃度。

1.3統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用SPSS17.0軟件進行t檢驗。

2 結(jié) 果

2.1各組PCI術(shù)前后血清CGRP和HMGB1濃度比較 冠心病患者PCI術(shù)后血清CGRP、HMGB1的濃度較術(shù)前均明顯升高，且在SAP、UAP和AMI亞組變化程度呈一定的上升趨勢。見表1。

2.2PCI術(shù)前后血清CGRP、HMGB1水平與IRS的關(guān)系 見表2。

表1 各組患者PCI術(shù)前和術(shù)后CGRP、HMGB1濃度比較

表2 ISR組和非ISR組PCI術(shù)前和術(shù)后CGRP、HMGB1濃度比較

ISR組術(shù)后血清中CGRP和HMGB1濃度較術(shù)前均有一定程度升高，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。

3 討 論

臨床治療冠心病仍以改善冠狀動脈血供、減少心肌耗氧挽救缺血心肌降低病死率、治療和延緩動脈粥樣硬化等為主。PCI手術(shù)治療可以顯著改善冠心病患者的預(yù)后，但PCI術(shù)后增加ISR風險，一直困擾其遠期療效〔3〕。ISR的形成主要由于PCI手術(shù)損傷血管內(nèi)膜完整性，導(dǎo)致炎癥反應(yīng)、血管內(nèi)皮功能障礙等所致〔4〕。臨床研究認為，ISR的發(fā)生與血管彈性回縮、血管內(nèi)皮細胞損傷、新生內(nèi)膜過度增生及血管重塑〔5～8〕等關(guān)系密切。具體機制表現(xiàn)為，內(nèi)皮細胞損傷和功能障礙可能引發(fā)平滑肌細胞激活、增殖、遷移和新近內(nèi)膜增生等病理損傷修復(fù)反應(yīng)。而PCI術(shù)中對血管壁所造成的內(nèi)皮損傷、各種促炎癥和抗炎癥細胞因子，如血清CGRP、HMGB1、TNF-α、IL-6等參與的炎癥反應(yīng)和血管結(jié)構(gòu)重塑，可能是血管PCI術(shù)后病理過程的重要影響因素〔9〕。

CGRP和HMGB1兩種因子可能在PCI術(shù)后ISR的發(fā)生中起著重要作用。冠心病患者經(jīng)PCI治療導(dǎo)致血管內(nèi)皮受損，而細胞分泌的HMGB1可通過與RAGE結(jié)合刺激C-反應(yīng)蛋白和基質(zhì)蛋白酶的合成，以致發(fā)生炎癥反應(yīng)和血管重塑。HMGB1的致炎細胞因子作用可通過促進巨噬細胞遷移、加重動脈損傷及引起血管平滑肌細胞的增殖和遷移，促進ISR的發(fā)生〔10〕。目前臨床研究認為，CGRP可抑制血管平滑肌細胞的增殖及表型轉(zhuǎn)化進而阻止ISR的發(fā)生〔11〕。

本研究結(jié)果推測，PCI術(shù)后與術(shù)前血清GRP、HMGB1水平的變化可能作為冠心病患者PCI術(shù)治療對血管壁損傷程度的評估指標，進而評估患者術(shù)后ISR發(fā)生的風險。本研究中ISR組術(shù)后血清中CGRP和HMGB1的濃度較術(shù)前均有一定升高趨勢，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義。可能因本研究樣本量不夠大，統(tǒng)計學(xué)效能不足而致使本研究未發(fā)現(xiàn)CGRP和HMGB1 PCI手術(shù)前后濃度變化與ISR的顯著關(guān)聯(lián)，有待進一步增大樣本量進行確認。

1褚 春，楊 軍，王蘇燕，等.血管成形術(shù)后再狹窄與平滑肌細胞轉(zhuǎn)化和遷移及轉(zhuǎn)化生長因子α表達上調(diào)有關(guān)〔J〕.中國醫(yī)藥指南，2013；11(1)：73-4.

2Yang L，Sakurai T，Kamiyoshi A，etal.Endogenous CGRP protects against neointimal hyperplasia following wire-induced vascular injury〔J〕.J Mol Cell Cardiol，2013；59(1)：55-66.

3Wihanda D，Alwi I，Yamin M，etal.Factors associated with in-stent restenosis in patients following percutaneous coronary intervention〔J〕.Acta Med Indones，2015；47(3)：209-15.

4Shen Y，Li C，Zhang RY，etal.Association of increased serum CTRP5 levels with in-stent restenosis after coronary drug-eluting stent implantation：CTRP5 promoting inflammation，migration and proliferation in vascular smooth muscle cells〔J〕.Int J Cardiol，2017；228(2)：129-36.

5Lan H，Wang Y，Yin T，etal.Progress and prospects of endothelial progenitor cell therapy in coronary stent implantation〔J〕.J Biomed Mater Res B Appl Biomater，2016；104(6)：1237-47.

6Xie H，Yang J，Han Y，etal.Inhibition of intimal hyperplasia via local delivery of vascular endothelial growth factor cDNA nanoparticles in a rabbit model of restenosis induced by abdominal aorta balloon injury〔J〕.Exp Ther Med，2015；10(1)：55-61.

7Tahir H，Bona-Casas C，Hoekstra AG.Modelling the effect of a functional endothelium on the development of in-stent restenosis〔J〕.PLoS One，2013；8(6)：e66138.

8王執(zhí)兵，劉 俊，陳少源，等.冠脈支架術(shù)后再狹窄血管重塑與脂聯(lián)素，單核細胞趨化因子-1和內(nèi)皮功能的相關(guān)性〔J〕.南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報，2010；30(4)：912-4.

9Liu X，Cao H，Li J，etal.Autophagy induced by DAMPs facilitates the inflammation response in lungs undergoing ischemia-reperfusion injury through promoting TRAF6 ubiquitination〔J〕.Cell Death Differ，2017;24(47):683-93.

10Kaneko Y，Pappas C，Malapira T，etal.Extracellular HMGB1 modulates glutamate metabolism associated with kainic acid-induced epilepsy-like hyperactivity in primary rat neural cells〔J〕.Cell Physiol Biochem，2017；41(3)：947-9.

11石 蓓，陳攀科，龍仙萍，等.CGRP修飾MSCs對大鼠頸動脈球囊損傷后血管狹窄的影響〔J〕.中華醫(yī)學(xué)雜志，2015；95(20)：1619-24.

R541

A

1005-9202(2017)23-5803-03；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.23.023

遵義市科技計劃項目(遵義市科會社字〔2014〕82號)

石 蓓(1964-)，女，碩士生導(dǎo)師，主任醫(yī)師，主要從事冠心病介入研究。

張 巍(1982-)，男，碩士，主治醫(yī)師，主要從事冠心病介入治療研究。

〔2017-04-20修回〕

(編輯 袁左鳴/滕欣航)